استرجاع البويضات ماوس

ملخص

هذا البروتوكول يوضح تقنية لاستخراج البويضات أو الأجنة في مرحلة مبكرة من قناة البيض المخصب من الفئران. القدرة على تحديد infindibulum وادخال ابرة في نهاية حادة من الضروري القيام بشكل صحيح الإجراء.

الملخص

حتى الآن ، وأفادت دراسات قليلة فقط التلاعب الناجح للمرحلة التطور الجنيني Peromyscus أو البيولوجيا الإنجابية. جنبا إلى جنب مع الأسهم Peromyscus مركز الوراثية (http://stkctr.biol.sc.edu) ، ونحن تميز الاختلافات البارزة اللازمة لتطوير هذا النظام. وكان أحد الأهداف الرئيسية لتحسين البويضة / أوائل استرجاع الجنين.

البروتوكول

جنين / سيت استرجاعها

1. يجب إذابة مدة ساعتين على الأقل قبل استرجاع الأجنة / البويضات ، يتم وضع KSOM في 37 درجة مئوية حاضنة ₂ أكسيد الكربون وFHM من ° -20. ويستخدم الزجاج صحن يحتوي على ثلاثة آبار ضحلة مقعرة لقطرات منزل KSOM في الحاضنة. لمنع الجفاف ، وتوضع في طبق وKSOM حاوية بغطاء الماء الذي في الأسفل. هذا الجهاز يمنع التبخر من دون استخدام الزيوت المعدنية.
   
   
2. توضع ناقلة البيضات من الإناث البيض في وسائل الإعلام FHM. لضمان التوجه infindibulum وسليمة ، ويتم قطع جزء صغير من المبي....

المناقشة

في هذه المقالة ، ونحن لشرح استرجاع البويضات من الاباضة بفعل Peromyscus (superovulated). استخدام فرط الإباضة (على العكس من دورة دقي الطبيعي) هو شائع نظرا لأعداد أكبر بكثير الناتجة عن ذلك. ومع ذلك ، يجب اتخاذ الحذر في تفسير نتائج استخدام هذه البويضات / الأجنة ، كما كل من الهرمونات المستخدمة للحث على التبويض وزراعة قد يكون لها آثار.

عندما تم تأكيد ودقي ، وeuthenized الإناث واستعادت ناقلة البيضات مع جزء صغير من المبيض. ويستخدم هذه المنطقة الصغيرة من المبيض ك.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
إبرة غسيل	أداة	Zephyrtronics	ZT5-130-L	30 G blunt
ملاقط (2)	أداة	Roboz Surgical Instruments Co.	RS-5060
Peromyscus	حيوان	Peromyscus Genetic Stock Center
مقصات	أداة	Roboz Surgical Instruments Co.	RS-5880
وسط FHM HEPES المنظم	كاشف	Specialty Media	MR-025-d
وسط زراعة الأجنة KSOM (5x 10 mL)	كاشف	Specialty Media	MR-020P-5F
ماصة فموية	أداة			سُحبت من شعيرات زجاجية وثُبّتت في أنابيب مطاطية
طبق تثبيت البويضات	أداة			وعاء زجاجي يحتوي على تجاويف مقعرة