Method Article

الفحص التجريبي الإنبثاث

DOI:

10.3791/1942

⸱

August 24th, 2010

 , 
1Department of Biomedical Genetics, University of Rochester Medical Center, 2Department of Dermatology, University of Rochester Medical Center

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

توضح هذه المقالة الإجراءات لفحص الانبثاث التجريبية التي تستخدم لتحديد إمكانية النقيلي من خطوط الخلايا السرطانية البشرية.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الانبثاث هي السبب الرئيسي للوفاة لدى مرضى السرطان. لفهم آلية من ورم خبيث ، أنشئت لفحص الانبثاث تجريبية باستخدام الفئران العوز المناعي. هذه المادة يحدد الإجراءات التي ينطوي عليها هذا الاختبار ، بما في ذلك إعداد العينات ، والحقن في الوريد ، واستنبات الخلايا من الانبثاث الرئة. لفترة وجيزة ، تم إعداد عدد محدد مسبقا من الخلايا السرطانية البشرية

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. تحضير العينة

  1. تنمو الخلايا لمتموجة ~ 70 ٪ في وسائل الإعلام الخاصة بها مع عوامل النمو أو FBS (على سبيل المثال ، مع DMEM FBS 10 ٪ لMC - 1 الخلايا). نضح من وسائل الاعلام لوحة ، ويغسل بلطف عدة مرات مع PBS × 1 (8 ز / لتر من كلوريد الصوديوم ، 0.2 غرام / لتر من بوكل ، 1.15 جم / لتر من نا 2 4 هبو 0.7 H 2 O ، 0.2 غرام / لتر من KH 2 PO 4 ، ودرجة الحموضة 7.3).
  2. برنامج تلفزيوني ونضح إضافة 2 مل من التربسين 0.05 ٪ في versene (0.014 غرام / لتر من أحمر الفينول ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الانبثاث هي السبب الرئيسي للوفاة لدى مرضى السرطان. أنها تنطوي على أربع خطوات رئيسية : المفرزة من الخلايا السرطانية من مواضع الأساسي ، دخولهم في التداول (intravasation) ، خروجهم من التداول (التسرب) ، والبقاء والنمو في الجهاز البعيد. يعتبر ورم خبيث في الإنسان عملية بطيئة وتجلت في كثير من الأحيان بعد سنوات من الكمون. لدراسة التقدم في الوقت المناسب ، وقد تم تأسيسها في أعلاه مقايسة تجريبية سريعة نسبيا في الفئران العوز المناعي 4 منذ تأسيسها ، وقد تم استخدامه بشكل فعال لعزل ال.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد تم اختبار هذا البروتوكول وتحسينه في البداية في مختبر الدكتور ريتشارد هينز (MIT). يتم توفير التمويل من جانب NYSTEM جائزة IDEA (لLX) وروث L. كيرشتاين خدمة القومي للبحوث جائزة (لLX).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
DMEMInvitrogen10313-021
FBSHycloneSH30088.03
HBSSInvitrogen14175-095
NaClSigma-AldrichS9888
KClMallinckrodt Baker Inc.6838-04
Na2 HPO4.7H2OMallinckrodt Baker Inc.7896-04
KH2PO4Mallinckrodt Baker Inc.7100-12
فينول أحمرسيجما ألدريتشP3532
EDTA-NaEMD Millipore4010
تريبان بلوإنفيتروجين15250-061
تربسين 2.5٪Invitrogen15090-046
إيثانولفائق النقاء200-CSGP
50 مل Falcon TubeVWR الدولي89039-656
أنابيب الطرد المركزيالدقيقة Axygen ScientificMCT-175-C
Falcon 70 & mu ؛ m Cell StrainerBD Biosciences352350
5 مل Falcon Culture TubeVWR international60818-576
HemacytometerHausser Scientific15170-208
1 مل حقنةBD Biosciences329650
30 ½ ؛ إبرة قياسBD Biosciences305106
ماوسPlas Labs Inc. 551-BSRR
مقص جراحيفيشر ساينتفيك08-940
ملقطفيشر ساينتفيك08-902
تشريح المجهرنيكونSMZ1500
الطرد المركزيThermo Fisher Scientific، Inc.75003491
أجهزة

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Xu, L. Gene expression changes in an animal melanoma model correlate with aggressiveness of human melanoma metastases. Mol Cancer Res. 6 (5), 760-760 (2008).
  2. Clark, E. A., Golub, T. R., Lander, E. S., Hynes, R. O. Genomic analysis of metastasis r....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Experimental Metastasis AssayTail Vein InjectionImmunodeficient MiceLung MetastasesCell CultureCell ViabilityDissecting MicroscopeMetastatic AbilityCancer Cell LinesMetastasis Quantification

Related Articles