اختبار التغذية: تقييم تفضيلات التغذية في ذبابة الفاكهة السوداء

الملخص

المصدر: Bovier ، T. F. ، et al. طرق اختبار اضطراب الغدد الصماء في ذبابة الفاكهة السوداء. J. Vis. Exp. (2019).

يصف هذا الفيديو اختبار تغذية ذباب الفاكهة حيث يتم استخدام الطعام الملون لمراقبة التغذية وتأثير المركبات المضافة على نشاط التغذية. يختبر بروتوكول المثال تأثيرات العديد من المواد الكيميائية المسببة لاضطراب الغدد الصماء (EDC).

البروتوكول

هذا البروتوكول هو مقتطف من Bovier et al. ، طرق اختبار اضطراب الغدد الصماء في ذبابة الفاكهة السوداء ، J. Vis. Exp. (2019).

< p class = "jove_title" >1. فحص التغذية

< فئة قوية = "ملاحظة" >ملاحظة: يوصى بهذا الاختبار لاختبار ما إذا كان وجود EDC المحدد في الوسط يمكن أن يؤثر على تغذية الذباب.

1. ضع 15 ذبابة صغيرة في قوارير تحتوي على وسط دقيق الذرة (CM) مكمل بتركيزات مختلفة من EDC المختار وطعام تلوين. اسمح للذباب بالتغذية على الوسائط لمدة 1 يوم.
   <فئة قوية = "ملاحظة">ملاحظة: على سبيل المثال ، استخدم الصبغة الحمراء رقم 40 (1 مجم / مل).
2. ضع 15 ذبابة صغيرة في قوارير تحتوي على CM مكمل بالمذيب وحده وطعام تلوين للتحكم. اسمح للذباب بالتغذي على وسائل الإعلام لمدة 1 يوم.
3. تخدير كل مجموعة من الذباب على حدة باستخدام الأثير.
   1. انقل الذباب من كل مجموعة إلى حاوية زجاجية أسطوانية (إيثريزر) مع إدخال قمع في الطرف المفتوح ، وعكس القارورة فوق القمع والنقر برفق على الحاويتين معا لجعل الذباب يسقط في الإيثريزر.
      <فئة قوية = "ملاحظة">ملاحظة: سيمنعهم القمع من الخروج من الإيثريزر.
   2. قم بضرب الذباب عن طريق النقر برفق على الإيثريزر على سطح ناعم ، مثل وسادة الماوس ، واستبدل القمع بسرعة بسدادة قطنية وشاش مبللة بالأثير.
   3. انتظر حوالي 1 دقيقة حتى يسقط الذباب إلى القاع ويتوقف عن الحركة.
      <فئة قوية = "ملاحظة">ملاحظة: لا تتجاوز الوقت وإلا سيموت الذباب.
4. ضع الذباب الثابت تحت مجهر مجسم وقارن تلوين البطن لكل مجموعة علاج فيما يتعلق بالمجموعة الضابطة.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 17α-Ethinylestradiol سيغما E4876-1G أجار لذبابة الفاكهة المتوسطة بيوسيجما 789148 بيسفينول أ سيغما 239658-50 جرام بيسفينول AF سيغما 90477-100 ملغ دقيق الذرة كاليفورنيا بيانكا ثنائي إيثيل الأثير سيغما ذبابة الفاكهة قوارير بيوسيجما 789008 25 مم × 95 مم ذبابة الفاكهة قوارير بيوسيجما 789009 29 مم × 95 مم ذبابة الفاكهة قوارير كالتيك 187 22 مم × 63 مم ايثانول فلوكا 2860 إيثريزر الحرف حاوية زجاجية أسطوانية مع سدادة قطنية خلاط يدوي بيمي أريتي محضر طعام خميرة النجاح الفوري إسكا خميرة بودرة صبغة حمراء رقم 40 سيغما 16035 [م] مجهر مجسمة مع مصابيح LED لايكا S4E