دروسوفيلا ميلانوغاستر (ذبابة الفاكهة)

نظرا لحجمها الكبير وتنظيمها البسيط نسبيا ، فإن خلايا ممرضة ذبابة الفاكهة مناسبة بشكل مثالي لدراسات تصوير الخلايا الحية. يصف هذا الفيديو طريقة الحقن المجهري لتوصيل المركبات الخارجية إلى الخلايا ، ويوضح البروتوكول المميز الإجراء باستخدام مجسات قليل النوكليوتيدات الفلورية التي تسمى المنارات الجزيئية (MBs) المستخدمة لتصور نصوص mRNA الذاتية.

ذبابة الفاكهة الجنين محاط بأغشية خارجية واقية. للوصول إلى الجنين ، غالبا ما تتم إزالة المشيمة - أقصى الأغشية - يصف هذا الفيديو طريقة شائعة الاستخدام لإزالة الكسادة باستخدام هيبوكلوريت الصوديوم. يوضح بروتوكول المثال الإجراء أثناء استخدام التقنيات المعقمة اللازمة لتربية المحورية أو الغنوتوبيوتيكية.

يمكن أن يكون التلوين المناعي لذبابة الفاكهة في المرحلة المتأخرة أمرا صعبا بسبب الأغشية المحيطة بالبويضات. يصف هذا الفيديو طريقة عالية الإنتاجية للحصول على البويضات وتثبيتها وإزالة الأغشية للتلوين المناعي. يوضح البروتوكول المميز هذه التقنيات مع البويضات في المرحلة المتأخرة المستخدمة لتصور مراحل مختلفة من الانقسام الاختزالي.

يصف هذا الفيديو طريقة لإزالة أغشية المشيمة والفيتلين ميكانيكيا من بويضات ذبابة الفاكهة الناضجة المثبتة مسبقا. يظهر البروتوكول المميز عرضا توضيحيا مفصلا للإجراء الذي ينتج عنه بويضات متوافقة مع فحوصات التهجين الفلورية في الموقع.

يصف هذا الفيديو كيفية إجراء الحقن المجهري الذي ينقل الكواشف إلى أجنة ذبابة الفاكهة الحية. يمكن للباحثين استخدام هذه الطريقة لإدخال مركبات خارجية مثل الأحماض النووية والبروتينات خلال المراحل المبكرة من نمو الجنين. يوضح البروتوكول المميز كيفية إعداد وتنفيذ إجراء حقن أي كاشف قابل للذوبان - هنا ، بروتين فلوري لتجارب التصوير الحي.

Source:Siddarth Gunnala1, Nafisa M. Jadavji2,3,41Department of Biomedical Sciences, Midwestern University, Glendale, AZ, USA2Division of Integrative and Molecular Physiology, Department of Biomedical Sciences, Southern University of Illinois, Carbondale, IL, USA3Department of Child Health, College of Medicine Phoenix, University of Arizona, Phoenix, AZ, USA4Department of Neuroscience, Carleton University, Ottawa, ON, CanadaThis video demonstrates hypoxia-induced climbing behavior in Drosophila...

يوضح هذا الفيديو طريقة لاختبار نقص الأكسجة في ذبابة الفاكهة من خلال تقييم قدراتها على الحفر والحفر النفقي. باستخدام هذه التقنية ، يمكن للباحثين التمييز بين اليرقات التي تعاني من الحرمان من الأكسجين وتلك التي تعاني من عجز في النمو. يوضح مثال البروتوكول إعداد هذا الفحص.

عند تلطيخ ذبابة الفاكهة الأقراص الخيالية ، غالبا ما يتم إجراء تشريح تقريبي حيث تتعرض الأقراص ولكنها تظل متصلة بالجسم. بمجرد تلطيخها ، يتم عزل الأقراص ذات الأهمية وتركيبها. يوضح بروتوكول المثال إجراء لتشريح القرص التخيلي للجناح وتركيبه.

< p class = "jove_content" >ذبابة الفاكهة يتم استخدام الوصلة العصبية العضلية (NMJ) كنموذج لدراسة مورفولوجيا ووظيفة نقاط الاشتباك العصبي. يصف هذا الفيديو الميزات المهمة التي يحددها الباحثون لتوصيف NMJ. يوضح مثال البروتوكول برنامجا قادرا على إجراء القياس الكمي تلقائيا.

يصف هذا الفيديو الاستئصال بالليزر ثنائي الفوتون للمحاور العصبية في يرقة ذبابة الفاكهة السوداء ومثال على بروتوكول للحث على الإصابة وتصوير موقع الإصابة.

يصف هذا الفيديو كيفية تحضير شرائح اليرقات المستخدمة لتصور الخلايا العصبية للتشجير الشجيري الحسي (da) وخلايا البشرة المرتبطة بها. يوضح البروتوكول المميز بالتفصيل كيفية إزالة الأنسجة العضلية من جدار الجسم مع الحفاظ على مورفولوجيا الخلايا ، مما يحسن التلوين المناعي وتصور الخلايا العصبية وخلايا البشرة المحجوبة.

ذبابة الفاكهة هيموليمف بمثابة دم وسوائل خلالي ، ينتشر في جميع أنحاء الجسم خلال مراحل اليرقة والبالغين. يصف هذا الفيديو بروتوكولا لجمع اليرقات من أجل تحديد الخلايا المنتشرة.

ذبابة الفاكهة حساسة للضوء وتستجيب للتغيرات في الضوء المحيط. يصف هذا الفيديو فحصا يختبر قدرتهم على تجنب الضوء ، ويسمى مقايسة بقعة الضوء. يوضح البروتوكول المميز كيفية إعداد الاختبار باستخدام مصباح LED للضوء الأزرق ويوضح كيفية تسجيل سلوك استجابة لمواجهة الضوء.

يصف هذا الفيديو ذبابة الفاكهة الغدة الحلقية ، وهي بنية غدد صماء معقدة مهمة للتخليق الحيوي وإفراز الستيرويدات والهرمونات الأخرى. يوضح البروتوكول المميز تشريحه وتثبيته وتلوينته المناعية.

ذبابة الفاكهة لديها خلايا عصبية حسية مخصصة - مستقبلات الألم - التي تؤدي استجابتها للمنبهات الحرارية الضارة المحتملة إلى سلوكيات مكروهة - أو ما يسمى ب "nocifensive" - في. يصف هذا الفيديو طريقة لتقييم الشعور بالألم الحراري عن طريق تسجيل سلوك اليرقات استجابة للتطبيق المحلي لمسبار حراري على البشرة. لذلك ، تسمى هذه الطريقة باختبار مسبار الحرارة المحلي.

ذبابة الفاكهة يمكن أن يميز ذباب الفاكهة التغيرات الصغيرة في درجة الحرارة وبالتالي اختيار البيئات ذات الظروف الحرارية المواتية. يصف هذا الفيديو فحصا سلوكيا يختبر تفضيل درجة حرارة ذبابة الفاكهة على تدرج حراري خطي.

يصف هذا الفيديو ذبابة الفاكهة الغدة الليمفاوية - الموقع الأساسي لتكون الدم في يرقة الذبابة - ويظهر مثالا على بروتوكول تشريح وتركيب العضو للكيمياء المناعية والتصوير الفلوري.

تصف هذه المقالة تقنية لإزالة شادرنية الحشرة مع الحفاظ على الخادرة الداخلية سليمة وبالتالي فهي مناسبة لمزيد من التحقيق. يوضح بروتوكول المثال الإجراء مع ذبابة الفاكهة guttifera. ومع ذلك ، فإن هذه التقنية قابلة للتطبيق على أنواع ذبابة الفاكهة الأخرى.

يصف هذا الفيديو كيفية تشريح وعزل مركب العين والدماغ من ذبابة الفاكهة الشرانق. يوضح البروتوكول المميز الإجراء الذي ينتج عنه أنسجة عالية الجودة ، متوافقة ، على سبيل المثال ، مع التلوين المناعي ، بالإضافة إلى تجارب التعبير الجيني الأخرى.

تستخدم عضلات الطيران ذبابة الفاكهة كنظام نموذجي لتنمية العضلات وعلم وظائف الأعضاء. يصف هذا الفيديو عضلات الطيران للبالغين ويسلط الضوء على بروتوكول لتشريح عضلات الطيران غير المباشرة النامية المناسبة لتسلسل الحمض النووي الريبي من الشرانق.

يصف هذا الفيديو اختبار تكييف كلاسيكي يختبر التعلم والذاكرة في ذبابة الفاكهة ، ويسمى تكييف الخطوبة. يعتمد الاختبار على تقليل مغازلة الذكور بعد تعرضهم للرفض من قبل أنثى خديجة غير متقبلة. يوضح مثال البروتوكول إعدادا للإجراء يمكن استخدامه لتقييم الذاكرة قصيرة المدى وطويلة المدى.

يصف هذا الفيديو طريقة بسيطة لتحديد حركة الذباب ويظهر مقايسة التسلق التي تم إجراؤها. مقايسة تسلق الذباب هي اختبار عام للوظيفة الحركية التي تعتمد على استجابة جيوتاكس سلبية.

يصف هذا الفيديو تشريح الغدد الملحقة من ذكور الذباب ويظهر مثالا يتم فيه فصل الغدة المعزولة إلى معلق خلية واحدة.

يصف هذا الفيديو التشريح العام للمبيض ذبابة الفاكهة ويتميز بطريقة تشريح المبايض للتصوير الحي أو الثابت.

تصف هذه المقالة تشريح الأنابيب Malpighian الأمامية (MT) من ذبابة الفاكهة الأنثوية ومثال على بروتوكول من Rossano et al. (2017) حيث يتم تحضير MTs للتصوير المباشر في غرفة التروية.

يصف هذا الفيديو اختبار الجزيرة ، وهي طريقة سلوكية تستخدم لدراسة ذبابة الفاكهة الحركة. يتميز نموذج البروتوكول بإعداد للمقايسة المتوافق مع تحليل الصور شبه الآلي.

يستخدم العلماء بروتوكول ذبابة الفاكهة لقياس كيفية تأثير الظروف التجريبية المختلفة على طول عمر الذباب وتوليد منحنيات البقاء على قيد الحياة في عملية تحديد النتائج التجريبية. يتميز بروتوكول العينة بالاختبار الذي يتم تطبيقه لدراسة التأثيرات على طول العمر من التعرض لتركيزات متفاوتة من المواد الكيميائية المسببة لاضطراب الغدد الصماء ، أو EDCs ، مثل 17-α-ethinylestradiol (EE2).

يصف هذا الفيديو اختبار تغذية ذباب الفاكهة حيث يتم استخدام الطعام الملون لمراقبة التغذية وتأثير المركبات المضافة على نشاط التغذية. يختبر بروتوكول المثال تأثيرات العديد من المواد الكيميائية المسببة لاضطراب الغدد الصماء (EDC).

يصف هذا الفيديو طريقة لتركيب أدمغة سليمة من الذباب البالغ تحت شريحة جسر ويظهر البروتوكول الذي تم إجراؤه على الأدمغة الملطخة بالمناعة للفحص المجهري الفلوري.

يصف هذا الفيديو طريقة فحص لتحديد ذبابة الفاكهة المعدلة وراثيا ، التي تم تعديل جينومها باستخدام CRISPR-Cas9. CRISPR-Cas9 هي أداة قوية لتحرير الجينوم أحدثت ثورة في الطريقة التي يمكن للعلماء من خلالها التلاعب بجينوم الكائن الحي. في مثال البروتوكول ، سنرى كيفية تحديد الطفرات التي تم إنشاؤها بواسطة CRISPR ، حيث يحل إدخال تسلسل التنشيط محل الإكسون الأول للجين عديم الفروع (bnl) ، وبالتالي إنشاء خط تشغيل خاص بجين bnl ، bnl-LexA.

الفحص المجهري الإلكتروني (SEM) هو أداة قوية لتصوير - في المقام الأول - السمات السطحية للعينة البيولوجية. ومع ذلك ، يعد التحضير المناسب للعينة أمرا بالغ الأهمية للحصول على صور عالية الجودة. يركز هذا الفيديو على خطوات الجفاف والتجفيف لتحضير ذبابة الفاكهة البالغة السليمة ل SEM.

يصف هذا الفيديو كيفية تضمين رؤوس ذبابة الفاكهة في البارافين باستخدام طريقة ذوي الياقات البيضاء ، وهي تقنية تعد رؤوس الذباب للتقسيم التسلسلي. تستخدم أقسام البارافين للفحوصات النسيجية لتشريح الدماغ ولتقييم التنكس العصبي. يوضح البروتوكول المميز كيف يمكن معالجة الذباب المتعدد في مستحضر واحد ، وبالتالي زيادة كفاءة الوقت وتقليل القطع الأثرية التجريبية.

يصف هذا الفيديو كيفية إجراء حقن الذباب الحي البالغ ويتضمن مثالا على بروتوكول يتم فيه حقن الجسيمات المسماة والتريبان الأزرق في بطن الذبابة لفحص البلعمة.

يصف هذا الفيديو مقايسة تفضيل التذوق ، وهي طريقة سلوكية تستخدم لقياس الانجذاب أو التجنب تجاه المحاليل الملونة التي يكون مذاقها مختلفا من خلال تقييم لون بطن الذبابة بعد تناول المادة المفضلة. يوضح البروتوكول المميز الإجراء المستخدم لقياس تفضيل الذباب تجاه المحاليل ذات تركيزات السكروز المتفاوتة.

يصف هذا الفيديو اختبار CApillary FEeder ، أو CAFE ، وهي طريقة سلوكية تقيس تناول الطعام وتفضيل ذباب الفاكهة غير المقيد. يوضح البروتوكول المميز كيفية إجراء الفحص بأقل قدر من التبخر من الشعيرات الدموية المملوءة بالسائل المستخدمة لتوصيل الطعام وتتبع تناوله.

يصف هذا الفيديو كيفية تشريح وعزل دماغ ذبابة الفاكهة البالغ - وهو إجراء ضروري لتصور العضو ، والذي تحجبه البشرة والعين والأنسجة القصبة الهوائية. يوضح بروتوكول المثال عرضا توضيحيا مفصلا ينتج عنه مستحضرات عالية الجودة يمكن استخدامها في التلوين المناعي وطرق التصوير في ذبابة الفاكهة البيولوجيا العصبية.

ذبابة الفاكهة تؤثر على نمو ومناعته وعلم وظائف الأعضاء. يصف هذا الفيديو طريقة لقياس البكتيريا من الذباب عن طريق تحديد وحدات تكوين المستعمرة من مستحضرات الجسم بالكامل. يوضح البروتوكول المميز هذه التقنية مع الذباب ، الذي يتم تربيته في ظل ظروف الجنوتبيوتيك باستخدام أربعة أنواع بكتيرية.

يصف هذا الفيديو طريقة لتشريح وإصلاح وتركيب الساق البالغة ذبابة الفاكهة مع الحفاظ على عضلاتها العصبية سليمة لتحليل التصوير.

يصف هذا الفيديو كيفية تتبع الذباب الذي يمشي بحرية لتقييم قدرته العامة على الحركة. يوضح البروتوكول المميز إعداد الفحص وتحليل البيانات باستخدام برنامج تتبع الفيديو.

يصف هذا الفيديو طريقة واحدة لبناء شفاط ذباب ، والذي يمكن استخدامه لنقل الحشرات بين العبوات دون تخدير. تم إعداد الشفاط في بروتوكول المثال لتجربة لتحديد سلوكيات الاستمالة...

يصف هذا الفيديو تصوير الكالسيوم في الجسم الحي في الخلايا العصبية ذبابة الفاكهة باستخدام GCaMP. يوضح مقطع البروتوكول المميز كيفية تسجيل التغييرات في مضان GCaMP من الخلايا العصبية لجسم الفطر أثناء تجربة تكييف حاسة الشم.

ذباب الفاكهة لديه نظام شمي معقد ، ويمكنه التمييز بين مئات الروائح ، واستخدام حاسة الشم لتوجيه القرارات السلوكية. يصف هذا الفيديو مقايسة مقياس الشم رباعي الاتجاهات ، وهي طريقة لدراسة الاستجابات السلوكية الشمية في الذباب. يوضح مقطع البروتوكول المميز كيفية التعامل مع ذباب الاختبار وما هي الخطوات الحاسمة أثناء إجراء الفحص.

العدوان هو سلوك فطري وتؤثر الخبرة القتالية السابقة على استراتيجية القتال ونتائج المسابقات اللاحقة في الذباب. يصف هذا الفيديو اختبارا يستخدم لدراسة السلوك العدواني لذبابة الفاكهة. يتميز بروتوكول المثال بالاختبار الذي يتم إجراؤه في إعداد يلغي التعامل مع الذباب وبالتالي يقلل من الضغط على ، مما قد يؤثر على أداء الأشخاص.

يصف هذا الفيديو طريقة لاختبار السلوك الاستكشافي الشمي في ذبابة الفاكهة، تسمى متاهة Y. يوضح مقطع البروتوكول المميز كيفية إعداد الفحص وإجرائه.

يصف هذا الفيديو نظام مراقبة نشاط ذبابة الفاكهة (DAM) المستخدم لتتبع النشاط الحركي. يستخدم الباحثون بيانات النشاط التي تم جمعها من DAM لدراسة إيقاعات الساعة البيولوجية في ذباب الفاكهة. يوضح مقطع البروتوكول المميز كيفية تحميل الذباب في الجهاز وتسجيل بيانات النشاط لتجارب الساعة البيولوجية.

يتيح علم البصريات الوراثي استخدام الضوء لمعالجة الخلايا العصبية المعدلة وراثيا للتعبير عن بروتينات معينة حساسة للضوء تؤدي تنشيطها الضوئي إلى تغيير في حالة الخلايا العصبية. نصف هنا نهجا بصريا وراثيا في ذبابة الفاكهة باستخدام opsin Channelrhodopsin2. يتميز بروتوكول المثال باختبار البصريات الوراثي لدراسة الدوائر العصبية وراء سلوك هروب الذبابة.

في هذا الفيديو ، نسلط الضوء على تشريح أمعاء ذبابة الفاكهة البالغة ومجموعة من الأمعاء الوسطى المناسبة للتفكك أحادي الخلية و FACS من أجل عزل الخلايا الجذعية المعوية.

يصف هذا الفيديو قلب الذبابة البالغ ، أو يسمى الوعاء الظهري ذبابة الفاكهة. يوضح البروتوكول المميز إجراء تشريح لمستحضرات القلب الحي.

تختار إناث ذبابة الفاكهة بين الركائز وتحديد المواقع الجذابة لوضع البيض. يصف هذا الفيديو فحصا سلوكيا يختبر عملية صنع القرار ، ويسمى مقايسة تفضيل وضع البيض. يوضح المقطع المميز الإجراء من خلال إعداد مصمم خصيصا ، والذي يمكن الباحثين ليس فقط من اختبار سلوك العديد من الإناث في نفس الوقت ولكنه متوافق أيضا مع تسجيل الفيديو وإعدادات البصريات الوراثية.