ذبابة الفاكهة تشريح دماغ البالغين: طريقة في علم الأعصاب للذباب

الملخص

المصدر: Kelly، S.M.، et al. تشريح وتلوين مناعي فلورسنت لجسم الفطر والخلايا العصبية المستقبلة للضوء في أدمغة ذبابة الفاكهة السوداء البالغة. J. Vis. Exp. (2017).

يصف هذا الفيديو كيفية تشريح وعزل دماغ ذبابة الفاكهة البالغ - وهو إجراء ضروري لتصور العضو ، والذي تحجبه البشرة والعين والأنسجة القصبة الهوائية. يوضح بروتوكول المثال عرضا توضيحيا مفصلا ينتج عنه مستحضرات عالية الجودة يمكن استخدامها في التلوين المناعي وطرق التصوير في ذبابة الفاكهة البيولوجيا العصبية.

البروتوكول

هذا البروتوكول هو مقتطف من Kelly et al. ، تشريح وتلوين الفلورسنت المناعي لجسم الفطر والخلايا العصبية المستقبلة للضوء في أدمغة ذبابة الفاكهة السوداء البالغة ، J. Vis. Exp. (2017).

< p class = "jove_title" >1. إعداد محطة التشريح

1. ضع المجهر المجسم ومصدر الضوء مع معقوفة من الألياف البصرية المرفقة على منضدة كبيرة. لتعزيز حركات اليد الثابتة وتقليل "اهتزاز" اليد أثناء التشريح ، من الضروري توفر مساحة كافية لمسند اليد والذراع حول المجهر. تأكد من وجود ما يقرب من 8-10 بوصات على جانبي المجهر و 4-6 بوصات بين قاعدة المجهر وحافة المقعد.
2. املأ 2 أو 3 آبار من طبق زجاجي مكون من 9 آبار أو 3 آبار ب 1.0 مل من المخزن المؤقت PTN (0.1 مت....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات ملقط / ملاقط التشريح المجهري تيد بيلا 505-نيو متر أطباق سيلجارد أجهزة النظم الحية DD-50-S-BLK متاح من amazon.com Na فوسفات عازلة أحادية القاعدة سيغما S3139 تريتون × 100 سيغما X100-100 مل مجهر مجسمة Leica S6D مع مصدر ضوء KL300 LED طبق 9 آبار (طبق بقعة) VWR 89090-482 طبق 35 مم جينيسي العلمية 32-103 سيلجارد صياد 50-366-794 كيمويب صياد 06-666 PTN المخزن المؤقت 0.1 مليون فوسفات الصوديوم ، درجة الحموضة 7.2 ، 0.1٪ تريتون-X-100 ، عادة ما تشكل 0.5 لتر من عازلة NaPhosphate 0.1M و aliquote 50 مل في المرة الواحدة حسب الحاجة