الأشعة فوق البنفسجية: طريقة لدمج المصفوفات خارج الكروموسومات

الملخص

< p class = "jove_content" >المصدر: Mariol ، M. C et al. بروتوكول سريع لدمج المصفوفات خارج الكروموسومات ذات معدل الإرسال المرتفع في C. ايليجانس الجينوم.J. Vis. Exp.(2013).

عادة ما ينتج عن الحقن المجهري للجينات المعدلة وراثيا < p class = "jove_content" > الحقن المجهري للجينات المعدلة وراثيا سلالات C. ايليجانس ذات مصفوفات كبيرة خارج الكروموسومات ، مما يؤدي إلى تعبير متغير ونقل الجينات المعدلة وراثيا. يمكن أن يؤدي التشعيع فوق البنفسجي إلى تكامل الكروموسومات للمصفوفة ونقل الجينات المعدلة وراثيا بشكل أكثر استقرارا.

البروتوكول

هذا البروتوكول مقتطف من Mariol et al ، بروتوكول سريع لدمج المصفوفات خارج الكروموسومات بمعدل انتقال مرتفع في C. ايليجانس الجينوم ، J. Vis. Exp.(2013).

فئة

1. التشعيع بالأشعة فوق البنفسجية واستعادة الديدان المعدلة وراثيا

1. تشعيع الدودة:
   1. اختر 30-100 فلورسنت معدل وراثيا L4 على ألواح استزراع منفصلة (15-20 حسب الطبق).
   2. ضع الألواح ، مع إزالة الأغطية ، في رابط متقاطع للأشعة فوق البنفسجية. تشعيع الديدان عند 0.012 جول / سم². لاحظ أن السلالات أكثر أو أقل ح....

النتائج

الجدول 1. مقارنة بين البروتوكولات القياسية والمحسنة لتكامل المصفوفات خارج الكروموسومات في C. ايليجانس الجينوم.تم دمج جينين معدلين غير متكاملين يرسلان بنفس التردد تقريبا باستخدام المعيار أو البروتوكول المحسن. يكمن الاختلاف الرئيسي في حقيقة أنه في البروتوكول القياسي ، يتم إجراء شاشة للذرية على جميع لوحات F1 لتقدير النسبة المئوية للديدان F2 المعدلة وراثيا ، والتي ي.......

المواد

<حدود الجدول = "0" cellpadding = "0" cellpacing = "0" نمط = "العرض: 580 بكسل ؛" العرض = "579" > قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات < td height = "19" نمط = "الارتفاع: 19 بكسل ؛ العرض: 204 بكسل ؛ "> الرابط المتقاطع للأشعة فوق البنفسجية فيشر العلمية < نمط td = "العرض: 107 بكسل ؛ "> الطول الموجي 254 نانومتر < td height = "19" النمط = "الارتفاع: 19 بكسل ؛ "> مجهر SteREO Discovery V8 كارل زايس ، إنك. أطباق بتري, 60 ملم CML BPS55E6 <ارتفاع TD = "19" النمط = "الارتفاع: 19 بكسل ؛" > سلك البلاتينيوم 0.25 مم ألفا إيسار 6/4/7440 لاختيار الديدان