الديدان الربداء (Caenorhabditis elegans)

في هذا الفيديو ، نعرض طريقة لإنتاج مجموعة متزامنة تنمويا من C. ايليجانس البالغين المعقمين. يقوم بروتوكول المثال بمزامنة الديدان لدراسة معدلات استهلاك الأكسجين في الحية.

يصف هذا الفيديو تقنية لفحص الديدان الخيطية الواحدة بسرعة بحثا عن علامة وراثية عن طريق فحص تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). في مثال البروتوكول ، نقوم بفحص تحرير الجينوم المستند إلى كريسبر.

يصف هذا الفيديو طريقة تقليدية قائمة على الألواح لقياس عمر C. ايليجانس. يقيس بروتوكول المثال عمر الديدان المعالجة بالحمض النووي الريبي.

C. ايليجانس يمكن أن يوفر سلوك وضع البيض معلومات مهمة في الدراسات التنموية والإنجابية والتشريحية. يقدم هذا الفيديو الخطوات المهمة لمقايسة وضع البيض ويظهر عينة من التجربة التي يتم فيها اختبار الدواء للكشف عن السمية الإنجابية.

يصف هذا الفيديو الحقن المجهري ، وهي طريقة شائعة لإنشاء سلالات C. ايليجانس المعدلة وراثيا. في المثال ، سنرى الحقن المجهري يستخدم لإدخال مركب البروتين النووي الريبي (RNP) لتحرير الجينات في قواعد كريسبر.

يصف هذا الفيديو تكسير التجميد ، وهي طريقة لجعل أنسجة C. ايليجانس في متناول تلطيخ الأجسام المضادة عن طريق تعطيل البشرة.

أثناء التصوير المباشر ل C. ايليجانس ، يمكن استخدام وسادة الاغاروز لتثبيت الديدان الخيطية دون إتلافها أو تجفيفها. يصف هذا الفيديو كيفية تحضير وسادة تثبيت بسيطة للفحص المجهري.

يقدم هذا الفيديو المفاهيم الكامنة وراء تصوير الكالسيوم ويتضمن مثالا على بروتوكول التصوير بفاصل زمني للديدان الموجودة في آبار الاغاروز المصبوبة.

هنا ، نقدم فحصا لقياس SWIP ، وهو نمط ظاهري سلوكي ل C. ايليجانس يحدث أثناء الحركة القوية مثل السباحة. يناقش بروتوكول المثال كلا من أساليب التحليل اليدوي والآلي.

يقدم هذا الفيديو مقايسة التعود باللمس ، وهي طريقة سلوكية C. ايليجانس لتقييم الإحساس الميكانيكي وتحديد الوقت اللازم للتعياد.

يقدم هذا الفيديو الانجذاب الكيميائي في الديدان الخيطية C. ايليجانس ويظهر عينة من بروتوكول يختبر النفور الكيميائي من كبريتات النحاس.

يمكن للباحثين تشغيل الحركة عند الطلب في C. ايليجانس من خلال تطبيق مجال كهربائي تستشعر به الديدان وتستجيب له. يقدم هذا الفيديو السلوك الكهربي ويظهر بروتوكول عينة يتم إجراؤه في جهاز ميكروفيليديك.

يصف هذا الفيديو استخدام الفيديو وبرامج التتبع لتسجيل حركة الدودة في الساحة. يقيس بروتوكول المثال تأثير التعرض للإيثانول على حركة الدودة.

يصف هذا الفيديو طريقة لتشريح الغدد التناسلية من C. ايليجانس خنثى ، مما ينتج عنه أنسجة مناسبة للتلوين المناعي والتصوير الفلوري.

يقدم هذا الفيديو مقايسة البقاء على قيد الحياة قصيرة المدى التي تختبر علاجا للسمية الحادة أو تختبر سلالة وراثية لمقاومة حالة سامة. يوضح بروتوكول المثال مثالا لاختبار البقاء على قيد الحياة حيث يتم اختبار الديدان لقدرتها على مقاومة الإجهاد التأكسدي الناجم عن الباراكوات (PQ).

C. ايليجانس لها نوعان من العضلات ، قسيم عضلي واحد وعضلي عضلي متعدد ، أو عضلات مخططة. يصف هذا الفيديو ترتيب عضلات جدار الجسم المخططة ، المسؤولة عن حركة الدودة ويتضمن عينة من بروتوكول لقياس مورفولوجيا العضلات باستخدام برنامج تحليل الصور.

يقدم هذا الفيديو طريقة للجرح بالليزر ، والتي تستخدم لإحداث إصابات دقيقة للغاية في بشرة الدودة. بروتوكول العينة مأخوذ من دراسة استجابة الجرح وإصلاحه.

يقدم هذا الفيديو طريقة لتصور وقياس سلامة C. ايليجانس تجويف الأمعاء عن طريق تغذية الديدان المسمى ديكستران FITC. يوضح بروتوكول المثال الفحص الذي تم إجراؤه باستخدام 3،3'-diindolylmethane (DIM) المعالجة والديدان التي تتغذى على مسببات الأمراض.

يصف هذا الفيديو بروتوكولا لتلطيخ الدهون في الديدان الثابتة الكاملة باستخدام صبغة النيل الأحمر. لعرض الدهون المحايدة على وجه التحديد في قلب قطرات الدهون ، قم بتصوير أطياف الانبعاث الأخضر ل C. ايليجانس الملطخة.

يصف هذا الفيديو طريقة لفصل الديدان الكاملة في معلق أحادي الخلية مناسب ل FACS أو الترسيب المناعي للخلايا السليمة.

هنا ، نصف تقنية تستخدم لتصور الحمض النووي الجيني في الديدان الخيطية الثابتة والسليمة. يتضمن الفيديو مثالا على بروتوكول لحساب الكروماتين في C. ايليجانس غير المخصبة البويضات.

يقدم هذا الفيديو طريقة لعزل C. ايليجانس الأريمية من الأجنة المبكرة. الخلايا الناتجة مناسبة لزراعة الخلايا أو تجارب خارج الجسم الحي.

يقدم هذا الفيديو طريقة لعزل الخلايا الجنينية C. ايليجانس وتعقيمها في المختبر.

يصف هذا الفيديو المبادئ الكامنة وراء علاج الحمض النووي الريبي في C. ايليجانس ويوضح بروتوكولا لإسقاط لين 35 في سلالة دودة معدلة وراثيا.

RNAi هي أداة وراثية قوية متاحة لباحثي C. ايليجانس. يقدم هذا الفيديو طريقة لعلاج الديدان باستخدام الحمض النووي الريبي أكثر من تغذية الألواح باستخدام ظروف الاستزراع السائل.

يمكن نشر الديدان الخيطية بسهولة في المختبر - ويرجع ذلك جزئيا إلى أن الخنثى يمكن أن تتكاثر عن طريق الإخصاب الذاتي. ومع ذلك ، قد تتطلب التهجين الجيني والتجارب الأخرى عددا كبيرا من الذكور. يصف هذا الفيديو طريقة لإثراء الذكور C. ايليجانس.

عادة ما ينتج عن الحقن المجهري للجينات المعدلة وراثيا < p class = "jove_content" > الحقن المجهري للجينات المعدلة وراثيا سلالات C. ايليجانس ذات مصفوفات كبيرة خارج الكروموسومات ، مما يؤدي إلى تعبير متغير ونقل الجينات المعدلة وراثيا. يمكن أن يؤدي التشعيع فوق البنفسجي إلى تكامل الكروموسومات للمصفوفة ونقل الجينات المعدلة وراثيا بشكل أكثر استقرارا.