حقن وريد الذيل: طريقة لإدارة الخلايا السرطانية للدراسات النقيلية في نموذج الفأر

الملخص

المصدر: Warren et al. ، الاستخدام المشترك لمقايسات ورم خبيث في الوريد الذيل والتصوير في الوقت الفعلي في الجسم الحي لتحديد الاستعمار النقيلي لسرطان الثدي والعبء في الرئتين. J. Vis. Exp. (2019).

يصف هذا الفيديو تقنية حقن الخلايا السرطانية المصنفة باستخدام حقن وريد الذيل في نموذج الفأر. نراقب أيضا سرطان الثدي ، وتكوين ورم خبيث ، ونموه باستخدام تصوير الحية في الوقت الفعلي.

البروتوكول

< p class = "jove_title" >1. حقن الوريد الذيل للخلايا السرطانية المصنفة

ملاحظة: تم تحسين الخطوة 1.2.4 لخلايا 4T1 التي تنمو في الفئران BABB / c المتجانسة. إذا تم استخدام خطوط الخلايا السرطانية الأخرى وسلالات الفئران ، فيجب أولا تحسين عدد الخلايا المحقونة وطول المقايس.

1. قم بتوسيع خطوط الخلايا 4T1 المتولدة في الخطوة 2 على طبقين مقاس 15 سم في وسط نمو كامل بحيث تتوفر الخلايا الزائدة في يوم الحقن.
2. تحضير الخلايا لحقن وريد الذيل على النحو التالي:
   1. استنشق الوسائط واشطف ألواح الخلايا باستخدام 1x PBS.
   2. قم بتربسين الخلايا ب 5 مل من التربسين لكل طبق 15 سم لمدة 2-5 دقائق (يجب أن تشطف الخلايا قاع البئر بحرية). انقل ....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 2.5٪ تريبسين جيبكو 15090-046 التربسين لزراعة الأنسجة مناديل الكحول لتعقيم موقع الحقن قبل إنجيسيتونات وريد الذيل الفئران BALB / C (أنثى ، 6 أسابيع) تاكونيك بلب-ف للاستعمار النقيلي في الوريد الذيل ومقايسات العبء Dulbecco&39; S محلول ملحي مخزن بالفوسفات هايميديا تي إس 1006 EDTA VWR 97061-406 يستخدم لتخفيف التربسين لزراعة الأنسجة FBS 100٪ من أصل أمريكي VWR هاتف: 97068-085 مكون من وسائط النمو الكاملة ل-جلوتامين جيبكو هاتف: 25030-081 مكون من وسائط النمو الكاملة خلايا سرطان الثدي في الفئران ، 4T1 معهد كارمانوس للسرطان أسلاكسون ، سي جيه وآخرون ، 1992 فأر النقيلي الثدي cance خط الخلية البنسلين ستربتومايسين جيبكو 15140-122 مكون من وسائط النمو الكاملة