الولادة داخل الشعب الهوائية: تقنية لإعطاء عامل تجريبي بشكل انتقائي في رئة الفأر

الملخص

المصدر: Liao، S. et al. الإعطاء المباشر داخل الشعب الهوائية لتحسين ترسب العامل الانتقائي داخل رئة الفأر. J. Vis. Exp. (2019).

يصف هذا الفيديو نهجا داخل الشعب الهوائية لإدارة عامل تجريبي بشكل انتقائي في الرئة اليمنى واليسرى البعيدة. في البروتوكول المميز ، سنقوم بإعطاء البلومايسين داخل الشعب الهوائية في الفأر للحصول على نموذج أفضل للتليف الرئوي.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بالحيوانات من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. مناهج التنبيب والتوصيل في البكالوريا الدولية غير الجراحية

1. نهج IB للقنية الفصيصية الانتقائية للرئة اليمنى البعيدة
   1. بعد إجراء القنية داخل القصبة الهوائية (IT) (استخدم اليد المهيمنة لتنبيب القسطرة الممتدة في القصبة الهوائية عبر تجويف الفم) ، قم بتدوير اللوح البلاستيكي +30 درجة (الشكل 1 أ).
   2. أمسك محور القسطرة ووجهها بشكل طبيعي بالتوازي مع خط وسط الماوس ، مع تمديده إلى الأعماق القائمة على الوزن كما هو موضح في الجدول 1.
      ملاحظه: وتجدر الإشارة إلى المقاومة في هذه الأعماق. في هذه المرحلة ، سيصبح الفأر دچار عدم انتظام الدوران قليلا ، كما هو موضح في النتائج التمثيلية. بالنسبة للمشغل المتمرس ، فإن ما يقرب من 90٪ من المحاولات ستنجح في قنية الرئة اليمنى (مع ملاحظة عدم انتظام التنفس
   ).
   3. قم بتوصيل 20 ميكرولتر من صبغة إيفانز الزرقاء 0.3٪ (EBD ، انظر جدول المواد) مع طرف تحميل الجل.
   4. قم بتوزيع 1-2 حصة (0.1 مل لكل منهما) من الهواء باستخدام القطارة الزجاجية.
      ملاحظه: هذا يضمن إزالة محلول EBD المتبقي (أو العوامل التجريبية) من داخل القسطرة.
   5. اسحب القسطرة ، ثم حافظ على وضع الماوس لمدة 30 ثانية.
   6. ضع على بطانية دافئة حتى يستعيد وعيه. عادة ما يكتمل الاسترداد في غضون دقيقتين.
2. نهج البكالوريا الدولية للقنية المقطعية الانتقائية للرئة اليسرى البعيدة
   1. بعد إجراء قنية تكنولوجيا المعلومات (استخدم اليد المهيمنة لتنبيب القسطرة الممتدة في القصبة الهوائية عبر تجويف الفم) ، قم بتدوير اللوح البلاستيكي -74 درجة (الشكل 1 ب).
   2. أمسك محور القسطرة واضغط برفق لدفع القسطرة إلى الشعب الهوائية الرئيسية اليسرى ، مع وضع ضغط متواضع لأسفل (90 درجة) وباتجاه نهاية الكتاب. في الأعماق المذكورة في الجدول 1 ، يجب على المشغل ملاحظة المقاومة حيث يتم تعشيق الأجزاء السفلية من الرئة اليسرى. في حالة حدوث تسرع النفس ، اسحب القسطرة إلى وضع 20-25 مم ، وأعد المحاولة.
   3. بعد تقسيم أجزاء الرئة السفلية اليسرى ، يلزم تغيير الموضع للسماح بمساعدة الجاذبية لإدارة الوكيل. قم بتدوير اللوح البلاستيكي -30 درجة (الشكل 1 ب).
   4. قم بتوصيل 40 ميكرولتر من 0.3٪ EBD مع طرف تحميل جل.
      ملاحظه: من الممكن توصيل كمية أكبر من العامل لأن الرئة اليسرى بها فص واحد فقط.
   5. قم بتوزيع 1-2 حصة (0.1-0.3 مل لكل منهما) من الهواء باستخدام القطارات الزجاجية.
      ملاحظه: هذا يضمن إزالة أي بقايا من EBD (أو العوامل التجريبية) من داخل القسطرة.
   6. اسحب القسطرة ، ثم حافظ على وضع الماوس لمدة 30 ثانية.
   7. ضع على بطانية دافئة حتى يستعيد وعيه. عادة ما يكتمل الاسترداد في غضون دقيقتين.

النتائج

الشكل 1: نهج القنية الفصية الانتقائية للرئة اليمنى / اليسرى وإدارتها.(أ) لاستهداف الرئة اليمنى ، يتم تدوير اللوح البلاستيكي + 30 درجة ، مما يحسن سهولة إشراك الشعب الهوائية الرئيسية اليمنى بشكل انتقائي. يتم تطوير القسطرة (لكل مسافات مقترحة في الجدول 1) لإشراك الفصوص اليمنى بشكل انتقائي. تم إعطاء 20 ميكرولتر من 0.3٪ EBD. في ~ 90...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 22 G القسطرة الوريدية المحمية دينار بحريني 381423 صبغة إيفانز الزرقاء سيجما ألدريتش E2129 LED-30W الألياف البصرية المزدوجة معقوفة أضواء مجهر الإضاءة أمسكوب الصمام 30 واط إبرة Precisionglide ، 18 جم × 1 بوصة دينار بحريني 305195 طرف مشطوف بطول 12 مم