Method Article

تحضير رئة الفأر لقياس التدفق الخلوي: توليد تعليق الخلية من أنسجة الرئة لتحليل قياس التدفق الخلوي

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_content" >المصدر: Moll ، H. P. ، et al. زرع تقويم العظام لخلايا سرطان الرئة الغدي المتزاوي لدراسة تعبير PD-L1. J. Vis. Exp. (2019).

يصف هذا الفيديو تحضير تعليق خلايا الرئة الفأرية لتحليل قياس التدفق الخلوي لدراسة تعبير PD-L1 لخلايا سرطان الرئة الغدي.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بالحيوانات من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. تحضير الرئة لقياس التدفق

الخلوي
  1. في نقطة النهاية التجريبية المرغوبة ، تخدير الفأر عن طريق الحقن تحت الجلد لخليط من الكيتامين (100 مجم / كجم من وزن الجسم) والزيلازين (10 مجم / كجم من وزن الجسم) والقتل الرحيم عن طريق خلع عنق الرحم.
  2. انقع الذبيحة في 70٪ من الإيثانول وقم بتأمين الماوس على لوحة تشريح باستخدام شريط لاصق.
  3. قم بعمل شق بطني في خط الوسط واقلب الجلد برفق لكشف عضلات جدار الصدر وأعضاء البطن. ثقب الحجاب الحاجز وقطع الأضلاع بالمقص لفضح التجويف الصدري.
  4. قم بنقخ الر....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Materials

List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments خط خلايا سرطان غدي في الرئة للفأر معزولة في المنزل C57Bl / 6 فئران يمكن استخدام F1 من صليب الخلفيتين (8-12 أسبوعا) 129S الفئران RPMI 1640 متوسط تقنيات الحياة 11544446 مصل ربلة الساق الجنينية تقنيات الحياة 11573397 محلول البنسلين / الستربتومايسين تقنيات الحياة 11548876 ل-جلوتامين تقنيات الحياة 11539876 كيتاسول (100 مجم / مل كيتامين) أوجريس فارما 8-00173 زيلازول (20 ملغم/مل زيلازين) أوجريس فارما 8-00178 ملقط حاد روبوز RS8260 مقص الطالب قزحية العين أدوات العلوم الدقيقة 91460-11 DNase I (خال من RNase) نيو إنجلاند بيولابيس M0303S الكولاجيناز النوع الأول تقنيات الحياة 17100017 ACK Lysing Buffer لونزا 10-548 ه

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Mouse Lung PreparationFlow Cytometry AnalysisLung Tissue DigestionCell Suspension GenerationPBS PerfusionCollagenase DigestionAmmonium Chloride LysisCell Strainer FiltrationWBC Tumor Cell IsolationFlow Cytometric Staining

Related Articles