تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تشمل مشاركين بشريين وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية والوطنية والدولية لرفاهية الإنسان وتمت مراجعتها من قبل مجلس المراجعة المؤسسية المحلي.
< p class = "jove_title" >1. شفط نخاع العظم وتحضير العينة
- تحضير المريض والمواد
- املأ حقنة أو حقنتين سعة 10 مل ب 1٪ ليدوكائين باستخدام إبرة قياس 16. استبدل الإبرة بإبرة قياس 21.
- ضع قطرتين من 5٪ EDTA على زجاج الساعة.
- قم بإعداد شرائح زجاجية (ن = 15 مع ترقيم وتاريخ متسق للمريض) لمستحضرات اللطاخة.
- ضع المريض في وضع الاستلقاء الجانبي. حدد موقع العمود الفقري الحرقفي الخلفي العلوي ووضع علامة بقلم.
ملاحظه: بشكل عام ، يقع العمود الفقري الحرقفي الخلفي العلوي بعرض يد واحدة بعيدا عن القمة الحرقفية وعرض يد واحدة جانبيا إلى خط الوسط. في الإناث ، قد يكون العمود الفقري الفعلي جانبيا أكثر قليلا ، وفي بعض الرجال أكثر وسطا.
- تطهير الجلد بالكلورهيكسيدين 0.5-1٪ في الإيثانول من منطقة الخزعة المقصودة إلى الخارج في دوائر.
- افتح عبوة القفازات المعقمة ، وارتد القفازات المعقمة وضع العبوة على الطاولة لإنشاء حقل معقم. افتح العبوة بإبرة الشفط وضعها على الحقل المعقم.
- تسلل إلى الجلد والأنسجة تحت الجلد وأخيرا السمحاق. في السمحاق ، قم بإدارة الليدوكائين بطريقة يتم تخدير مساحة قطرها 1 سم.
ملاحظه: يعد الإعطاء الكافي لليدوكائين في السمحاق أحد أهم العوامل لراحة المريض. اختبر ما إذا كان السمحاق قد تم تخديره بشكل كاف عن طريق النقر على موقع الخزعة المقصود بالإبرة المدخلة واسأل عما إذا كان المريض يشعر بأي ألم. ملاحظة: يتم تخدير الأطفال بالكامل أثناء الإجراء بأكمله.
- أمسك إبرة الشفط (15 Ga × 2.8 بوصة) مع الطرف القريب في راحة اليد والسبابة على جانب العمود المعدني للإبرة بالقرب من الحافة ؛ يسمح هذا الوضع بتحكم أفضل.
- أدخل الإبرة بحركة دوارة (عن طريق التناوب السريع بين حركة النقوش / الاستلقاء ) عبر الجلد باتجاه العمود الفقري الحرقفي واجعل الإبرة ملامسة للعمود الفقري الحرقفي الخلفي.
- تأكد من إدخال الإبرة إلى منطقة التخدير في السمحاق ؛ يجب أن يشعر المريض بالضغط فقط وعدم الألم. إذا شعر المريض بالألم ، فقم إما بتغيير وضع الإبرة أو إعطاء المزيد من الليدوكائين.
- باستخدام ضغط لطيف ولكن ثابت، قم بدفع الإبرة أثناء تدويرها بالتناوب في اتجاه عقارب الساعة وعكس اتجاه عقارب الساعة. يتم الكشف عن الدخول إلى تجويف النخاع بشكل عام من خلال انخفاض المقاومة.
- قم بإزالة النمط من الإبرة. قم بتوصيل حقنة فارغة سعة 10 مل بالإبرة.
- اضغط سلبيا عن طريق سحب مكبس المحقنة بسحب لطيف. تحذير المريض من أنه قد يشعر بالتشنج والألم عند شفط النخاع. إذا لم يتم إطلاق شوك نخاع العظام الكافي ، فيجب إجراء طموح آخر بسحب سريع واحد. ستكون معظم الشوكات في أول 1-2 مل تم الحصول عليها من السحب الأولي. استنشق 1-2 مل فقط لتجنب تخفيف العينة.
ملاحظه: سيؤدي التخفيف إلى التخفيف وقد يربك نتائج MRD.
- قم بإزالة المحقنة واستبدل النمط في إبرة الشفط. اخرج جزءا من النخاع في زجاج ساعة والباقي في أنبوب سعة 8 مل مغطى بالهيبارين.
ملاحظه: اقلب كل أنبوب مباشرة بعد وضع نشفط النخاع في أنبوب العينة لضمان منع التخثر الكافي. غالبا ما يكون تخثر نخاع العظم سببا لمواد غير مناسبة. يمكن شفط نخاع عظم إضافي من نفس المكان ، ولكن يفضل أن تكون الإبرة متقدمة من 5 إلى 10 مم قبل أخذ شفط جديد. يفضل ألا يؤخذ أكثر من 2 تعادلات لكل مستوى إدراج. تأكد من وضع علامة على الأنابيب بأرقام متزايدة تمثل السحوبات الأولى و / أو الثانية و / أو المتتالية. من الشائع استخدام السحب الأول للتحليل التشخيصي الأكثر صلة.
- بدلا من ذلك ، اسحب الإبرة من مكان الإدخال وأعد إدخالها في تجويف النخاع على بعد بضعة ملليمترات من مكان الإدخال الأصلي وكرر الإجراء.
ملاحظه: لا تشفط أكثر من 1-2 مل لكل سحب لتجنب تلوث الدم بشكل كبير.
- كرر كلما دعت الحاجة إلى المواد. عندما يتم شفط مادة كافية لبروتوكول الدراسة السريرية المحدد ، قم بإزالة إبرة نخاع العظم.
ملاحظه: في حالة الشفط البطيء أو الصعب لنخاع العظم ، قد يكون استخدام المحاقن التي تم غسلها مسبقا بمضادات التخثر مفيدا. في حالة الجفاف ، قم بإجراء خزعة تريفين خارج نطاق هذه المخطوطة.
< ص الفئة = "jove_title" >
2. تحضير اللطاخات للفحص المورفولوجي
- للحصول على التقييم المورفولوجي الأمثل ، اختر الشوكات (على سبيل المثال باستخدام ملعقة بلاستيكية) من الشفط في زجاج الساعة وضعها على شريحة زجاجية.
- ضع برفق شريحة زجاجية أخرى فوق الشريحة مع النخاع وانزلق برفق ؛ تجنب أي ضغط.
ملاحظه: فقط في حالة وجود شوك نخاع عظم كبيرة جدا ، يمكن ممارسة ضغط طفيف ، لتقليل سمك انتشار الخلية. يستفيد الإجراء من مساعدة مساعد يمكنه التعامل مع أنابيب العينات. يعد وضع العلامات الدقيقة على الأنابيب برقم المريض ورقم سحب نخاع العظم المتسلسل أمرا بالغ الأهمية.
- جفف الشريحة جيدا ، ثم قم بإجراء تلطيخ May Giemsa Grünwald (انظر جدول المواد). افحص تحت المجهر الضوئي بحثا عن التشكل (انظر الشكل 1).
ملاحظة: يوضح الشكل 1 أ مسحات نخاع العظم السليم الذي يتكون من أنواع مختلفة من الخلايا الوظيفية بينما يوضح الشكل 1 ب مريض ابيضاض الدم النقوي الحاد يعاني في الغالب من انفجارات سرطان الكريات. لتحديد عبء سرطان الدم المتبقي بشكل أفضل ، يجب إجراء التنميط المناعي.
