سرطان الدم (لوكيميا)

يصف هذا الفيديو تقنية تلطيخ خلايا نخاع العظم باستخدام May- Grünwald Giemsa Staining. في البروتوكول ، سنقوم بتلطيخ خلايا ابيضاض الدم النخاعي الفئراني ، خلايا C149 ، لتحليل التشكل والعد التفاضلي.

يصف هذا الفيديو تخصيب الخلايا التائية من طحال الفأر عن طريق التحديد السلبي باستخدام فاصل مغناطيسي. تتضمن هذه التقنية استهداف الخلايا الأخرى في العينة للنضوب باستخدام الأجسام المضادة أو الروابط الموجهة ضد مستضدات سطح الخلية المحددة.

يصف هذا الفيديو تقنية عزل الخلايا الإيجابية c-kit من نخاع عظم الفأر. في البروتوكول ، سنقوم بعزل الخلايا الإيجابية c-kit من الفأر المعدل وراثيا للتحقق من صحة c-Fos و Dusp1 بمفردهما أو معا كأهداف دوائية في سرطان الدم.

يصف هذا الفيديو بروتوكول تلطيخ التألق المناعي BrdU. تسمح هذه التقنية بتحديد الخلايا في مراحل مختلفة من دورة الخلية. تسمح إضافة أصباغ الحمض النووي ووضع العلامات على الأجسام المضادة بالتحليل التفصيلي لمصير خلايا الطور S في أوقات لاحقة.

< p class = "jove_content">يصف هذا الفيديو تقنية عزل خلايا ابيضاض الدم الليمفاوي المزمن (CLL) من الدم المحيطي. باستخدام هذا البروتوكول ، سنقوم بعزل خلايا CLL من عينة دم المريض البشري من أجل التوليد الفعال اللاحق للأجزاء النووية والسيتوبلازمية.

يشرح الفيديو طريقة لتنقية الخلايا البائية عن طريق الاستهداف المناعي المغناطيسي والفصل عن تعليق خلايا الدم المحيطية أحادية النواة. تتضمن الطريقة وضع العلامات على أنواع الخلايا غير المرغوب فيها بأجسام مضادة أو روابط محددة (مرتبطة بجسيمات مغناطيسية) تستهدف بروتينات سطح خلية معينة ، ليتم استنفادها من تعليق الخلية غير المتجانسة عن طريق الفصل المغناطيسي.

يصف هذا الفيديو طريقة للفصل المكاني لثلاث مجموعات سكانية فرعية لخلايا سرطان الكريات: خلايا ابيضاض الدم العالقة التي تطفو بحرية في الوسائط ، وخلايا ابيضاض الدم الساطعة الطورية الملتصقة بسطح الطبقة الأحادية للخلية اللحمية المتوسطة ، وخلايا ابيضاض الدم الخافتة التي هاجرت تحت طبقة أحادية الخلية اللحمية الوسيطة من الزراعة المشتركة ثنائية الأبعاد.

يصف هذا الفيديو بروتوكولا مفصلا لعزل نخاع العظم الكامل الطازج من الأطراف الخلفية للفأر للتحقيق في عيوب BM الكاملة للمرضى الذين يعانون من اضطرابات الدم مثل سرطان الدم.

يصف هذا الفيديو فصل خلايا ابيضاض الدم الليمفاوي الحاد عن الخلايا اللحمية لنخاع العظم باستخدام عشرة أعمدة ديكستران G-10 متشابكة من النوع الهلامي. تساعد هذه الطريقة على استعادة مجموعة الخلايا السرطانية التي هاجرت تحت الخلايا اللحمية لنخاع العظم الملتصقة مما يولد مجموعة خلايا سرطانية "خافتة الطور".

يصف الفيديو طريقة أخذ العينات لجمع الدم المحيطي من الجيوب الأنفية المدارية الرجعية للفأر ومزيد من العزل للخلايا أحادية النواة من الدم مع الطرد المركزي المتدرج الكثافة.

يصف هذا الفيديو تقنية شفط نخاع العظم من العمود الفقري الحرقفي وتحضير اللطاخة للخزعة. في المثال ، نقوم بشفط نخاع العظم من مريض ابيضاض الدم النخاعي الحاد (AML) وفحص الخلايا للتحقق من وجود مرض متبقي قابل للقياس (MRD) ، وهو مؤشر حيوي تنبؤي مهم.

يصف هذا الفيديو بروتوكولا لتوليد الخلايا المتغصنة - الخلايا الرئيسية التي تقدم المستضد والتي تنشط الخلايا التائية - من نخاع عظم الفأر البالغ.

يصف هذا الفيديو بروتوكول عزل HSPCs من نخاع العظام وفرزها باستخدام تقنية فرز الخلايا المنشطة بالفلورسنت ، وهي طريقة للحصول على HSPCs التي تم فرزها بشكل فردي. نقوم بزراعة هذه الخلايا المصنفة للحصول على استنساخ HSPC.

يصف هذا البروتوكول تقنية عزل الخلايا السرطانية لسرطان الدم الليمفاوي الحاد للخلايا التائية (T-ALL) المسمى بالفلورسنت من سمكة الزرد البالغة وقياسها باستخدام صبغة التريبان الزرقاء.

يصف البروتوكول التالي طريقة لعزل السكان الجانبيين للخلايا السرطانية لسرطان الدم الليمفاوي الحاد للخلايا التائية (T-ALL) ، والتي تتكون من خلايا جذعية ، من سمكة الزرد البالغة. تفتقر المجموعة الجانبية إلى علامات الخلايا البارزة ، وبالتالي نستخدم مقايسة تدفق الصبغة Hoechst 33342 لعزلها.

يصف هذا الفيديو بروتوكول قص الكروماتين باستخدام الهضم الأنزيمي للمكورات الدقيقة. يعد قص الكروماتين خطوة أساسية في الترسيب المناعي للكروماتين أو سير عمل ChIp ، مما يساعد على التحقيق في تفاعل البروتين والحمض النووي في خلايا ابيضاض الدم النخاعي المزمن البشري. في بروتوكول الميزة ، يتم إجراء قص الكروماتين باستخدام الصوتنة.

يصف هذا الفيديو الضرر الانتقائي لخلايا ابيضاض الدم البشرية باستخدام الموجات فوق الصوتية منخفضة التردد. يوضح هذا التطبيق للموجات فوق الصوتية منخفضة التردد في حالة ما قبل السريرية في المختبر أنه يمكن تحقيق تدمير الخلايا من أجل فحص ومقارنة آثار صوتنة على سرطان الدم والخلايا الطبيعية.

تصف هذه المقالة بروتوكول اختبار XTT وهو اختبار لوني لتقييم صلاحية الخلية ونشاط الميتوكوندريا.

يصف الفيديو مقايسة وضع العلامات النبضية التدريجية لخلايا الثدييات باستخدام برومودوكسيوريدين (BrdU) لقياس تكاثر الخلايا. يسمح امتصاص BrdU بالتتبع الزمني للخلايا التي كانت في مرحلة التوليف في وقت محدد ، دون الحاجة إلى مزامنة الخلايا.

يصف هذا الفيديو تقنية الزراعة المشتركة ثنائية الأبعاد طويلة المدى لخلايا سرطان الدم مع الخلايا اللحمية لنخاع العظم لدراسة تفاعلها مع البيئة المكروية لنخاع العظم. يستخدم نموذج الزراعة المشتركة ثنائي الأبعاد خلايا ابيضاض الدم الليمفاوية الحادة ونخاع العظم اللحمي أو بانيات العظم التي تؤثر على النمط الظاهري للخلايا السرطانية. ستدعم هذه الدراسة التحقيق في الآليات التي تكمن وراء بقاء نخاع العظم المدعوم لخلايا سرطان الدم أثناء التعرض للعلاج الكيميائي.

يصف هذا الفيديو تحضير الكسور الخلوية من خلايا سرطان الدم وهي طريقة لتوليد الكسور الخلوية والنووية من خلايا سرطان الكريات. يمكن استخدام الكسور النووية والسيتوبلازمية لمزيد من التحليل النهائي.

يوفر هذا البروتوكول نهجا كيميائيا حيويا لقياس معدل التحمض خارج الخلية (ECAR) ومعدل استهلاك الأكسجين (OCR) لخلايا سرطان الدم الأولية مع مقايسة التدفق خارج الخلية. يساعد تقييم الملف الأيضي لهذه الخلايا على توصيف متطلباتها ، مما يؤدي إلى العلاج الشخصي.

يصف هذا الفيديو بروتوكول اختبار الترسيب المناعي للكروماتين (ChIP) ، وهي تقنية كلاسيكية لإثبات تفاعلات البروتين والحمض النووي. تستخدم هذه التقنية لتحديد الجينات المستهدفة في خلايا ابيضاض الدم الليمفاوي المزمن البشري.

يصف هذا الفيديو بروتوكول التحقق الجيني عن طريق نقل الجينات المستهدفة باستخدام الفيروسات القهقرية في خطوط خلايا ابيضاض الدم النخاعي المزمن. تعمل الفيروسات القهقرية كوسيط لنقل المادة الوراثية إلى خلية سرطان الدم من خلال عملية تسمى التنبيغ ، والتي تتيح التعبير طويل المدى عن الجين المستهدف. يمكن تطبيق هذه الطريقة على أي خلايا مستهدفة للتحقق الجيني والتطوير العلاجي.

يصف هذا الفيديو بروتوكول وحدة تكوين المستعمرة القائمة على ميثيل السليلوز أو مقايسة CFU ، والتي تساعد في تحديد وحساب عدد المستعمرات التي تشكلها خلايا سرطان الدم استجابة للعلاج بالمركبات المضادة للسرطان.

يشرح هذا الفيديو طريقة الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء ذات الطور العكسي الكمي (RP-HPLC) لقياس التمثيل الغذائي للأدينوزين والبيورينات المرتبطة به الناتجة عن استهلاك AMP في بيئة خارج الخلية للخلايا السرطانية سرطان سرطان الكريات. يصف البروتوكول مقايسة RP-HPLC حساسة ومحددة وموثوقة وقابلة للتكرار تم تطويرها والتحقق من صحتها من أجل القياس الكمي لنيوكليوتيدات البيورين خارج الخلية والنيوكليوسيدات التي تنتجها خلايا ابيضاض الدم الليمفاوي المزمن المنقى (CLL) في ظل ظروف استزراع مختلفة.