مقالة منهجية

كسر كاذب : والصدمات الحادة الأنسجة الطرفية النموذجي

DOI:

10.3791/2074

⸱

أبريل 18, 2011

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Surgery, University of Pittsburgh, 2Department of Orthopedic Surgery, University of Aachen Medical Center

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

كسر كاذب ، وهذا نموذج يمكن استنساخه الفئران من الصدمة العضلية العقيمة ، ويسمح للتقييم في وقت متأخر من ردود ما بعد الصدمة الأجل المناعي. تصف هذه المقالة تنفيذ الخطوة الإجرائية للنموذج خطوة ، بما في ذلك احتمال لمجموعات النموذج التجريبي للسماح لدراسة الصدمات المتعددة.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

بعد الصدمة هناك في وقت مبكر فرط رد الفعل استجابة التهابية يمكن أن يؤدي إلى خلل الجهاز متعددة ، وارتفاع معدل الوفيات في المرضى الذين يعانون الصدمات النفسية ؛ وغالبا ما يترافق هذا الرد من قبل أن يضيف المناعي تأخير المضاعفات السريرية للعدوى ، ويمكن أيضا زيادة معدل وفيات 1-9. وقد بدأت العديد من الدراسات لتقييم هذه التغيرات في تفاعل الجهاز المناعي بعد الصدمة. 10-15
معتمدة إلى حد كبير من خلال الدراسات المناعية تشكيلة واسعة من الفئران المعدلة وراثيا والمتاحة للخروج المغلوب في النمذجة فيفو ؛ هذه المساعدات في سلالات تحقيقات مفصلة لتقييم المسارات الجزيئية تشارك في الردود المناعية 16-21

التحدي في النمذجة التجريبية الصدمة الفئران هو التحقيق على المدى الطويل ، وتقنيات تثبيت الكسر في الفئران ، ويمكن أن تكون معقدة وليس استنساخه بسهولة. 22-30

هذا النموذج كسر كاذب ، نموذجا الصدمة تتكرر بسهولة ، ويتغلب على هذه الصعوبات عن طريق محاكاة بيئة مناعيا كسر أقصى ، في حين أن السماح بحرية الحركة في الحيوانات وطويلة الأجل البقاء من دون استخدام ، واستمرار لفترة طويلة من التخدير. والقصد من ذلك هو إعادة ملامح كسور العظام الطويلة ، ويتعرض المصاب العضلات والأنسجة اللينة إلى العظام التالفة ونخاع العظم دون كسر العظم الأصلي.

نموذج كسر كاذب يتكون من جزئين : سحق العضلات الثنائية إصابة hindlimbs ، تليها حقن حل العظام في هذه العضلات الجرحى. مستعدة الحل العظام من خلال حصاد العظام الطويلة من كلا hindlimbs من العمر والوزن المتطابقة مسانج المانحة. ثم يتم سحق هذه العظام ومعلق في الفوسفات مخزنة المالحة لإنشاء حل العظام.

كسر عظم الفخذ الثنائية هو نموذج استخداما وراسخة من الصدمة أقصى ، وكان نموذج النسبية خلال تطوير النموذج كسر كاذب. من بين مجموعة متنوعة من النماذج المتاحة الكسر ، اخترنا لاستخدام أسلوب مغلق للكسر مع إصابة الأنسجة اللينة والمقارنة لدينا لكسر كاذب ، كما أردنا معقمة بعد الصدمة الشديدة نسبيا الأنسجة الطرفية نموذج (31).

صدمة نزفية هي الحقائق المشتركة في الإعداد للصدمة شديدة ، ونقص انسياب الدم العالمية يضيف عنصر مهم جدا لنموذج الصدمات ، ويمكن كسر كاذب 32-36 نموذج مجتمعة بسهولة مع نموذج صدمة نزفية لنموذج متعددة من شدة الصدمة عالية (37).

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. وإعداد صك الجراحية الميدانية :

يتم تنفيذ جميع الإجراءات التجريبية باستخدام تقنيات العقيم. قبل البدء ، يجب أن تكون منطقة تجريبية تنظيفها وتعقيمها. يجب تطهيرها من الفوق ، سمحت للهواء جاف ثم مسحت أسفل مع الكحول 70 ٪. وضع لوحة زرقاء والجراحية الميدانية عقيمة خلع الملابس في منطقة العمل التجريبية.

يتم تعقيم تعقيم جميع المواد والأدوات قبل استخدامها. وردت المحاقن والإبر المعقمة. يجب أن يكون الباحث garbed مناسب في معطف المختبر ، وقناع الجراحية ، والقفازات الجراحية المعقمة.

يتم تعقيم تعقيم الأدوات الجراحية لدينا كل مساء. يتم غسلها بعد الجراحة باستخدام صابون مضاد للجراثيم وماء. يسمح لهم حتى يجف على لوحة زرقاء نظيفة الجراحية. وبعد ذلك وضعت بعناية في الحقيبة وتعقيمها التعقيم لاستخدامها لاحقا.

بدوره على حبة تعقيم الساخنة لضمان وصولها إلى درجة الحرارة المناسبة -- 300-350 درجة فهرنهايت قبل بدء التجربة. وسيتم استخدام هذه الأدوات معقمة لتنظيف بين الإجراءات التجريبية التي أجريت على الفئران منها. الحصول على صك الفولاذ المقاوم للصدأ وملء علبة 1 / 3 من الطريق مع الايثانول 70 ٪. يجب أن يكون هناك ما يكفي من الإيثانول بنسبة 70 ٪ لتغطية الصكوك الخاص الجراحية. بدوره على لوحة تعميم التدفئة ووضع لوحة زرقاء الجراحية أكثر من ذلك ومن ثم حقل عقيمة خلع الملابس على أعلى من ذلك. ويستخدم هذا تدفئة كافية لضمان الدفء للفأرة أثناء إجراء التجارب وفترة الاسترداد. وضع جميع الأدوات المعقمة والشاش والحقن والإبر وأنبوب microfuge 1.5mL في مجال الملابس المعقمة. توخي الحذر عند فتح أي صكوك العقيمة وغيرها من البنود ، لا لتلويث لهم عن طريق لمس منهم. فمن الأفضل استخدام قفازات معقمة عند القيام بهذا الإجراء الإعداد.

2. كسر كاذب النموذجي -- إجراءات التجريبية :

1. التخدير وتحديد المواقع من الفأرة.

تبدأ بالإدارة حقنة داخل الصفاق من Pentobarbitol (70mg/kg). ويتم إنجاز ذلك من خلال رفع لأول مرة الماوس من قفصه به نهاية القريبة من ذيله. ثم يجب أن يكون وزنه الماوس لحساب الجرعة الصحيحة من anaesthesic. المقبل ، وضع على رأس الحيوان من القفص ، بينما ما زالت تحتجز ذيله. الاستيلاء على القفا من الرقبة من الفأرة مع الابهام والاصبع الوسطى على جانبي الماوس فقط وراء forepaws. يستخدم السبابة لسحب الجلد على المنطقة الرأس / الرقبة والظهر شل جزئيا في الرأس. يقام ذيل الفأر بين الاصبع الصغير والبنصر ، بينما يتم الضغط على البنصر في المنطقة القطنية من العمود الفقري الفأر. ينبغي للتخدير نافذة المفعول بالكامل في غضون 5 دقائق تقريبا ، وينبغي تأكيد مع اختبار رد الفعل.

بعد هذا الحيوان هو نائم ، ضع الماوس في موقف ضعيف على لوحة زجاج شبكي واستخدام شريط حلقة فضفاضة تقنية لشل حركة عليهم تسجيل القصوى بهم. تقنية حلقة فضفاضة ينطوي ببساطة قطع شرائط رقيقة من الشريط والشريط فضفاضة التفاف حول الجزء الأعلى من كل طرف. عالق ثم الشريط مرة أخرى إلى نفسه ، ويعلق على اليسار الشريط إلى متنها. هذا يسمح للتلاعب التجريبية التي سيتم تنفيذها بطريقة متناسقة ، وكذلك ضمان القصوى من الفئران موقفا أكثر طبيعية. ثم يتم حلق المناطق الحيوان في البطن ، والاربية ، والفخذ باستخدام دينا اوستر كليبرز A5 (حجم 40 شفرة) ، للمساعدة في الحفاظ على حقل معقمة. ووصب والشاش 4x4 مع betadine وتمحى ثم منطقة جراحية لتعقيم. ثم يتم طي ضمادة معقمة ورايات الميدان عبر الماوس للسماح تعرض أطرافه السفلى فقط ، والرأس.

بعد الشلل والتعقيم ، ووضع مخروط الأنف مع isoflurane على الأنف الماوس ، لبضع ثوان قبل البدء في إجراء التجارب. مخروط الأنف يتكون من أنبوب مخروطي 50cc ل مليئة الشاش. هو قطع نصف من نهاية الجزء السفلي من أنبوب إلى خلق مساحة للأنف الماوس ، لتناسب. يتم وضع سقف (قاع حاوية تخزين الأنسجة أي مستقيم جرة الجانب الفم واسعة) على قطع من نهاية مخروطية لضمان البقاء في أبخرة isoflurane الأنبوب عندما لا تكون قيد الاستعمال. وينبغي أن أضيف مل من isoflurane إلى الشاش داخل مخروط. وينبغي إيلاء اهتمام دقيق لاستخدام الماوس أثناء التخدير واستخدامها ، وخصوصا من خلال isoflurane مخروط الأنف. بمجرد التنفس الحيوان تبدأ بطيئة ، يمكن أن تبدأ التجربة ، ويجب إزالة مخروط الأنف ومغلقة.

إذا كان مطلوبا في جميع أنحاء تخدير إضافية أي جزء من هذه التجربة ، قد يكون حقن بنتوباربيتال إضافية أو تديرها isoflurane. طرق بديلة لإدارة isofluorane المتاحة وتحديث المبادئ التوجيهية موصى بهاوضع حد لاستخدام المرذاذ الدقة للسماح للسيطرة أفضل من التخدير ، وإذا كان ذلك ممكنا. ومع ذلك ، يجب أن يضمن اهتمام وثيق للفسيولوجيا الجهاز التنفسي للفأرة على أي من هذه الأساليب.

2. كسر كاذب التجربة.

كسر الزائفة هو مزيج من إصابة الأنسجة اللينة تليها حقن محلول العظام الى عضلة الجرحى ويتم تنفيذها على المستوى الثنائي hindlimbs. يجب أن يكون مستعدا الحل العظام قبل أي تلاعب التجريبية للفئران يبدأ المتلقي.

3. حل العظام الإعداد.

سيكون الحل العظام المحضرة من الماوس مانح واحد يكون كافيا بالنسبة للفئران المستلم 3. وينبغي استخدام الماوس المانحة مسانج أن العمر والوزن مطابقة الماوس المتلقي التجريبية.

وسوف يتم التخلص من الفأر مع المانحين isoflurane استنشاقه. وعندئذ تكون الجهة المانحة ملصقة على متن شبكي مع الحرص على الاهتمام الشريط السفلية فقط على طرف القدم. يجب أن يكون حليق السفلية بعناية ومغطاة جيدا في betadine ، ومسحت ثم مع الكحول للعقم. ثم سيتم عظم الفخذ والساق ازالتها جراحيا بطريقة عقيمة من كلا السفلية. لإزالة العظام الطويلة من السفلى ، وجعل شق جراحي في الجلد في المنطقة الأربية ، والاستمرار في قطع الجلد على طول اقصى ، وصولا الى الكاحل. سحب الجلد ، وبعيدا عن تشريح اللفافة تحت الجلد والعضلات سواء في الجوانب الإنسي والجانبية للتعرض الأقصى. ادخال شفرة واحدة من تحت مقص العضلات التي تقع الأمامية والجانبية لو (الظنبوبي الأمامي ، الباسطة لأصابع إبهام ، الباسطة الطويلة hallicus ، الشظوية الطويلة ، الشظوية القصيرة) الساق الشريحة النصل قريب وبشكل أقصى لرفع العضلات نظيفة بعيدا عن الكامنة العظام. كرر هذه التقنية على الجانب السفلي الخلفي وسطي من الساق لفصل عضلات أسفل الساق (عضلة الساق ، النعلية ، أخمصي ، الظنبوبي الخلفي ، المثنية لأصابع الطويلة ، الطويلة المثنية hallicus). وينبغي استخدام الحد الأدنى من الجهد الإضافي على الجانب الخلفي عندما ينزلق بشكل أقصى ، وذلك لالتقاط وبعيدا عن شظية في الساق. في نهاية القريبة من هذه العضلات في الساق قطع الأوتار أقرب إلى الملاحق الخاصة بهم ممكن ، وسحب العضلات بشكل أقصى ، في حين سحب على مجموعة العضلات معا في أزياء النزولي قاطرة صغيرة ستطلق سراح المرفقات القاصية من هذه العضلات من مفصل الكاحل. ويمكن خفض مفصل الكاحل خلال مباشرة مع المقص. لا فصل الساق من عظم الفخذ عند هذه النقطة! هذا الصدد يعطي قوة إضافية من شأنها أن تساعد في تشريح عظمة الفخذ من مفصل الورك. اتبع أسلوب مماثل لاطلاق سراح عضلات الفخذ من الخلف وتنفيذ هذا وإعلامي على حد سواء ، وكذلك أفقيا إذا لزم الأمر. قطع المرفق القاصية من هذه المجموعات العضلية للافراج عنهم من مفصل الركبة. مواصلة ومتابعة تشريح تحت العضلات لتشريح نهاية عظم الفخذ من مفصل الورك. للمساعدة في هذا التشريح ، ينبغي تمديد شق الجلد بقدر كما هو مطلوب لتحقيق التعرض الكافي. يمكن اقتراح من عظم الفخذ في مفصل الورك مساعدة في تحديد نهاية القريبة من عظم الفخذ أثناء تشريح.

بمجرد إزالة عظم الفخذ (مع الساق المرفقة) من الماوس المانحة وضعها على 4x4gauze العقيمة. ويمكن فصل اثنين في عظام مفصل الركبة بواسطة مجرد استيعاب كل العظام في اليد والتواء منفصلة بلطف / تناوب العظام اثنان في اتجاهين متعاكسين على امتداد محور الطويلة. ينصح تشريح لطيف ومناولة هذه العظام اثنين كما أنها يمكن أن كسر بسهولة مع أي مجهود المفرط للالتلاعب اليدوي. لإزالة المرفقات وتر المتبقية من العظام الطويلة ، واستخدام قطعة من الشاش المعقم الجافة 4X4 ملفوفة حول طول العظام. اغتنام هذه الشاش بإحكام ضد العظام an تسحبه كامل طول عدة مرات العظام ، وهذا سوف تتخلص من الأنسجة المتبقية من السطح من العظام لأنها سوف تنضم إلى الشاش وتكون بسرعة وسهولة سحبها بعيدا عن العظام. ثم ينبغي أن العظام التي تم جمعها توضع مباشرة في أنبوب microfuge 1.5mL العقيمة ووضعها على الجليد للنقل.

وستتخذ هذه العظام المانحة الأربعة إلى مجلس الوزراء لإعداد السلامة البيولوجية من أجل حل العظام. يجب أن يكون غطاء تطهيرها جيدا قبل استخدامها ، ومكان حقل عقيمة خلع الملابس فوق منطقة العمل داخل غطاء محرك السيارة. مكان التخزين المؤقت قذيفة هاون ومدقة العقيمة ، أنبوب 8mL معقمة والفوسفات العقيمة المالحة (PBS) في مجال العمل. وينبغي أن يكون pipetteman 1mL ، ونصائح منها أن تكون متاحة داخل غطاء محرك السيارة.

وينبغي أن يستخدم الزوج العقيمة ملقط لإزالة العظام التي تحصد بطريقة عقيمة من أنبوب microfuge 1.5mL وضعت في الهاون ، وسوف ثم مدقة أن تستخدم لسحق بلطف العظام. Phosphأكل مالحة التخزين المؤقت هو الوسيلة المستخدمة لresuspend شظايا العظام للحقن. ماصة 1mL من برنامج تلفزيوني في هاون والاستمرار في سحق الشظايا المتبقية ، مع حركات دائرية إضافية لضمان إعادة تعليق كامل. ثم إضافة أخرى 1mL من برنامج تلفزيوني ومواصلة سحق لإنشاء "الحل العظام. ينبغي أن يكون لها حل هوى وردي ، وسيكون هناك بقايا اليسار في الجزء السفلي من قذائف الهاون التي لا يمكن كسرها بالكامل. صب ببطء الحل للخروج من قذائف الهاون في أنبوب 8mL ، للقبض على حجم الحد الأقصى ، مع ضمان أكبر مخلفات بقوا في الهاون. وينبغي أن يظل هذا الحل العظام على الجليد حتى استخدامه التجريبي وسيتم نقلهم إلى المحاقن 1mL للحقن. وسيتم قياس twenty إبرة تعلق في وقت لاحق إلى حقنة تحتوي على محلول 1mL العظام من أجل أن إدارة الماوس. وقد تم اختيار هذا الحجم إبرة كبيرة لضمان أن جميع أجزاء العظام دخول المنطقة على الحقن وليس كتلة الإبرة.

قبل الحقن لوضع الماوس المتلقي ، انخفاضا من الحل على طبق من العظام آغار ماكونكي للثقافة (حضانة 48hours - 24). هذا هو التأكد من عقم الحل العظام. الرقم الهيدروجيني من الحل العظام ويجب أيضا أن يتم التحقق لضمان وجود درجة الحموضة محايد.

4. إصابة الأنسجة الرخوة.

إصابة الأنسجة اللينة هذا هو سحق hindlimb الثنائية الاصابة. الموضع الأولي من الفأرة ، مع أطراف خلفية خطف قليلا وأفقيا استدارة ، ويساعد في الوصول إلى مجموعة العضلات الصحيحة ، والعضلات القابضة في الركبة (ذات الرأسين الفخذية ، والعضلات الوترية الغشائية النصف). وسيتم استخدام مرقئ 18cm كبيرة لتنفيذ سحق الإصابة. تم تحليل توزيع قوة هذه المرقأة التطبيقية وجدت لتكون 270psi Topaq باستخدام نظام التحليل بواسطة جهاز قياس الضغط يجب أن تكون منتجات شركة شنت مرقئ العضلات حول الفخذ الخلفية ، نقطة الوسط على طول عظم الفخذ ، مع منحنى محدب التي تواجه عظم الفخذ. ثم ينبغي أن يكون مؤمنا مرقئ الى اغلاق فوق الأول فقط ، وتبقى لمدة 30 ثانية. الاهتمام الدقيق لوضع هذه مرقئ مهم -- يجب ألا يكون فرضت على عظم الفخذ ، لضمان عدم كسر ذلك. وينبغي أن يتم تنفيذ هذا بطريقة متناسقة في كل مرة لضمان اصابة استنساخه بين الفئران. يتم تنفيذ هذا الضرر على كل من سحق السفلية.

5. عظم حل الحقن.

سوف الماوس المتلقي التجريبية يكون تخدير وأعد كما هو موضح سابقا ، وسوف تشهد إصابات الأنسجة اللينة قبل هذه الحقن العظام.

وعندئذ يكون الحل العظم حقن عضلات الفخذ سحقت من الماوس المتلقي على المستوى الثنائي. وباستخدام إبرة قياس 20 ، 0.15mL هذا الحل يمكن حقنها في عضلات الفخذ الخلفية من كل. إدخال إبرة عبر الجلد حوالي 2 ~ 3mm وإيلاء الاهتمام لمسافة الإدراج من الإبرة -- سوف يشعرون كما غيض من اللمسات شطبة فقط ضد عظم الفخذ ، وهذا الموقف هو مثالي. حقن محلول العظام الآن. سحب الإبرة والمكان بسرعة إصبع القفاز المعقم على موقع الحقن لوقف تدفق الخلفي من أي حل للخروج من العظام الجرح. عقد هذا الاصبع هناك لعدة ثوان.

وبعد ذلك يتم وضع الماوس مرة أخرى في قفص والسماح بحرية الحركة الكاملة مباشرة مع انحسار التخدير. يجب أن تدار المناسبة لإدارة الألم ويوقظ الماوس.

6. Post-operative/recovery الفترة.

تتم إزالة الشريط حلقة فضفاضة وتوضع الحيوانات في قفص النظيفة التي يتم الاحتفاظ بها على وسادة التدفئة المنتشرة في العديد من الانتعاش بعد ساعات. وينبغي ضمان الدفء المناسب مع مصباح الحرارة إضافية إذا لزم الأمر.

والغذاء والماء تكون متاحة بسهولة.
يجب أن تدار مسكن والحيوانات من أجل ايقاظ تبدأ من التخدير من أجل إدارة الألم بشكل صحيح. البوبرينورفين (0.1mg/kg) يحقن تحت الجلد مثل الحيوانات تبدأ ممارسة النشاط البدني ، ولكن ليس قبل ذلك ، بحيث لا تسوية وظيفة الجهاز التنفسي.

وينبغي أن الفئران رصد مستمر أثناء التخدير ، حتى الشفاء من التخدير أو نقطة النهاية التجريبية. وينبغي أيضا أن الفئران بعناية فائقة للمراقبة في فترة ما بعد الجراحة ، وينبغي أن تدار أي دواء الألم الإضافية المطلوبة حسب الحاجة. رصد النشاط البدني الحيوانية ، والوضع الجهاز التنفسي ، وتناول الطعام والماء وأية علامات الضائقة (صعوبة في التنفس ، وألم ، والتغيرات في عادات الاكل والشرب) يجب أن تعالج وفقا لذلك.

مكان الصكوك الخاص الجراحي في 70 ٪ كحول والقضاء عليها مع شاش معقم ثم وضعهما في جهاز التعقيم microbead عن 20 ثانية ~ لتعقيم بين الحيوانات. إزالة الأدوات الجراحية وترشها مع الكحول 70 ٪ لمساعدتهم على تهدئة. مكان لهم على شerile مجال الملابس. تأكد من عدم وجود الكحول اليسار على الصكوك التي سوف بالتنقيط العودة الى الحيوانات المقبل.

3. المقارنة الثنائية كسر عظم الفخذ النموذجي -- إجراءات التجريبية :

وسوف تكون تجريبية الماوس تخدير وأعد كما هو موضح في البداية. وينبغي ان فرضت مرقئ كبير 18cm حول hindlimb حوالي 2 - 3mm فوق مفصل الركبة مع سطحه محدب تواجه الركبة. مكان إبهامك على أعلى مرقئ فرضت والسبابة بين مرقئ والورك. لا شك أن يشعر الفخذ قبل التواء حتى تعرف أين أنت الانهيار. ثم تطور عكس اتجاه عقارب الساعة في حين مرقئ التواء يدك الأخرى في اتجاه عقارب الساعة.
تكرار الإجراء مع الساق المقابل.

4. الصدمات المتعددة النموذجي -- إجراء تجريبي لمزيج من الصدمة النزفية مع كسر كاذب :

وسوف يتم تخدير المتلقي الماوس ، وأعد كما هو موضح في البداية. والفئران التي هي على الخضوع لصدمة نزفية في تركيبة مع كسر الزائفة والشريان الفخذي إقناء ؛ إدخال القنية قبل الإجراء كسر كاذب ومن ثم سيتم استنزف من هذه القسطرة بمجرد الانتهاء من كسر الزائفة.

5. أسرار للنجاح :

العامة :

  • تأكد من أن تتخذ مزيدا من الجهد لتبقى عقيمة ممكن.
  • وينبغي إيلاء اهتمام دقيق لحالة الفسيولوجية الشاملة للفأرة ، بما في ذلك معدل التنفس ، وخلال ادارة التخدير وخصوصا عبر isoflurane مخروط الأنف.

عظم حل التحضير :

  • تلاعب لطيف العظام -- كما يمكن كسر بسهولة مع الجهد المبذول المفرط خلال التلاعب دليل بسيط!
  • وينبغي ضمان ازالة شظية من الساق عند تشريح.
  • تبدأ عن طريق سحق العظام برفق في البداية -- وذلك للحفاظ على جميع شظايا قذائف هاون داخل!
  • فقط إضافة 1 مل PBS في البداية ومواصلة سحق شظايا العظام المتبقية ، مرة واحدة في التعليق جيدة شكلت ، إضافة 1mL المتبقية.
  • وينبغي جمع سوى حل من هاون ومدقة -- دون الأنسجة الأكبر المتبقية التي لا يمكن كسر أسفل تماما -- قد تكون هذه الكتلة / استقرت في الحصول على إبرة الحقن في الماوس المتلقي.

إصابة الأنسجة الرخوة :

  • الموضع الدقيق لهذا مرقئ المهم -- وليس أكثر من عظم الفخذ أو يمكن أن تكون مكسورة ذلك. المشبك في مرقئ على عضلات الصحيح (الفخذ الخلفي -- العضلات القابضة في الركبة) لاصابة في استنساخه.

عظم حل الحقن :

  • عند حقن محلول ، وإيلاء الاهتمام لمسافة الإدراج من الإبرة -- سوف يشعرون كما غيض من اللمسات شطبة فقط ضد عظم الفخذ ، وهذا الموقف هو مثالي.
  • سحب الإبرة ووضع الإصبع بسرعة اكثر من موقع الحقن لوقف أي تدفق الخلفي من العظم حل للخروج من الجرح. عقد الاصبع هناك لعدة ثوان.

6. آخر المخاوف من المنطوق :

  • الاختيار للإصابة في ساقه.
  • فحص العظام ثقافة الحل.
  • يمكن أن يكون مشكلة في استخدام الحيوان أطرافه الخلفية نتيجة للتلاعب والالتهابات التجريبية المرتبطة بها. إدارة الألم بشكل مناسب.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

كسر كاذب ، وهذا نموذج يمكن استنساخه الفئران من الصدمة العضلية العقيمة ، ويسمح لتقييم ما بعد الصدمة الاستجابات المناعية. نموذج يحاكي كسر كاذب مناعيا بيئة من خلال كسر أقصى الترفيه من ميزات وجود كسر العظم الطويل : تتعرض عضلات المصاب والأنسجة اللينة إلى العظام التالفة ونخاع العظم دون كسر العظم الأصلي ويمكن رؤية 38،39 استجابة مناعية ثنائي الطور التالي. الصدمة التي تتكون من كسر كاذب استجابة hyperinflammatory المبكرة التي يمكن أن ينظر إلى الذروة في 6 ساعات يعقبها العنصر الثاني...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد أجريت تجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح التي وضعتها المؤسسات ورعاية الحيوان واستخدام اللجنة إجراء البحوث ومكتب الالتزام من جامعة بيتسبرغ ، وهي مؤسسة AALAS / AAALAC المعتمدين. وتشمل المصادر الحيوانية جاكسون المختبرات والمعامل تشارلز ريفرز. تخضع جميع الحيوانات واسعة لضمان الصحة من خلال كل بائع ، وكذلك جامعة بيتسبرغ الداخلية برامج رصد الصحة الحيوانية. وتجري هذه البحوث وفقا لمدراء الحكومة الامريكية لاستخدام الحيوانات الفقارية. تم تسجيل البرنامج مع وزارة الزراعة ، وخطاب ضمان مع مكتب الخدمات الصحية العامة لرعاية الحيوان المعملية.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

مصدر التمويل / رقم البيولوجيا الجزيئية من الصدمة النزفية GM053789

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
وسادة زرقاء جراحيةفيشر Scientific50-7105
ضمادات ميدانية معقمةفيشر NC9517505
وسادة تسخين تعميم 18 × 26 بوصةجهاز هارفاردpy872-5272
معقم أداة حبة ساخنةVWR الدولي11156-002
صينية من الفولاذ المقاوم للصدأ 8 × 11 بوصةVWR ألواح زجاج شبكيدولية 62687-049
(10 × 15 × 0.5 سم) جامعة بيتسبرغ لفات
"Corporate ExpressMMM26001
50cc أنبوب مخروطيأي مورد
برطمانات واسعة الفم على الجانب المستقيم (تستخدم كغطاء لمخروط الأنف)VWR الدولية159000-058
Oster A5 كليبرز مع مقاس 40 شفرةVWR الدولية10749-020
مقص جراحي (مستقيم &# 8211 ؛ 12 سم)أدوات العلوم الدقيقة14068-12
مرقئ منحني -18 سمجهاز هارفارد81331718
ملقط (طرف 0.8 مم ، منحني -10 سم)أدوات العلوم الدقيقة11050-10
شاش 4 "× 4"أي مورد
1.5cc أنبوب الطردأي مورد
دلو ثلجأي مورد
ملاط ومدقة فيشر العلمي12-961AA
1cc حقنة ث / 25G إبرةفيشر العلمية14-826-88
20G إبرةأي مورد
1 مل ماصةأي مورد
1 مل نصائح ماصةأي مورد
Falcon البوليسترين 8 مل أنابيب VWR الدولية60819-331
حقيبة التعقيم 3 "x8"VWR الدولية24008
حقيبة التعقيم 5 "x10"VWR الدولية24010
أجارBD Biosciences221172
الكحول الإيثيلي - 200 دليل على Pharmco-AAPER[70٪]
Pentobarbital Sodium (محلول الصوديوم Nembutol)OVATION Pharmaceuticals70 مجم / كجم
Aerrane (Isoflurane)Baxter Internationl Inc.99.9٪
Triadine بوفيدون اليود (بيتادين)ثالوث المستهلكات
محلول ملحي مخزن الفوسفات (PBS)
بوبرينورفين هيدروكلوريكبيدفورد0.1 مجم / كجم
الشريط 1 الشكل الدقيق لوحة مختبرات

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. DeCamp, M. M., Demling, R. H. Posttraumatic multisystem organ failure. JAMA. 260, 530-534 (1988).
  2. Deitch, E. A. Multiple organ failure. Pathophysiology and potential future therapy. Ann Surg. 216, 117-134 (1992).
  3. Carrico, C. J., Meakins, J. L., Marshall, J. C. Multiple organ failure syndrome. Arch Surg. 121, 196-208 (1986).
  4. Hauser, C. J., Joshi, P., Jones, Q. Suppression of natural killer cell activity in patients with fracture/soft tissue injury. Arch Surg. 132, 1326-1330 (1997).
  5. Faist, E., Baue, A. E., Dittmer, H. Multiple organ failure in polytrauma patients. J Trauma. 23, 775-787 (1983).
  6. Baker, C. C., Oppenheimer, L., Stephens, B. Epidemiology of trauma deaths. Am J Surg. 140, 144-150 (1980).
  7. Faist, E., Kupper, T. S., Bakeer, C. L. Depression of cellular immunity after major injury its association with posttraumatic complications and its reversal with immunomodulation. Arch Surg. 121, 1000-1005 (1986).
  8. Lenz, A., Franklin, G. A., Cheadle, W. G. Systemic inflammation after trauma. Injury. 38, 1336-1345 (2007).
  9. Flohe, S., Flohe, S. B., Schade, F. G. Immune response of severely injured patients--influence of surgical intervention and therapeutic impact. Lang Arch Surg. 392, 639-648 (2007).
  10. Ayala, A., Wang, P., Ba, Z. F. Differential alterations in plasma IL-6 and TNF levels after trauma and hemorrhage. Am J Physiol. 260, R167-R171 (1991).
  11. Kalicke, T., Schlegel, U., Printzen, G. Influence of a standardized closed soft tissue trauma on resistance to local infection. An experimental study in rats. J Ortho Res. 21, 373-378 (2003).
  12. Kobbe, P., Vodovotz, Y., Kaczorowski, D. J. The role of fracture associated soft tissue injury in the induction of sytemic inflammation and remote organ dysfunction after bilateral femur fracture. J Ortho Trauma. 22, 385-390 (2008).
  13. Kobbe, P., Vodovotz, Y., Kaczorwoski, D. J. Pattern of cytokine release and evolution of remote organ dysfunction after bilateral femur fracture. Shock. 30, 43-47 (2008).
  14. Flohe, S. B., Flohe, S., Schade, F. U. Deterioration of the immune system after trauma: signals and cellular mechanisms. Inn. Immun. 14, 333-344 (2008).
  15. Maier, B., LeFering, R., Lhenert, M. Early versus late onset of multiple organ failure is associated with differing patterns of plasma cytokine biomarker expression and outcome after severe trauma. Shock. 28, 668-674 (2007).
  16. Mestas, J., Hughes, C. W. Of mice not men: differences between mouse and human immunology. J. Immunol. 172, 2731-2738 (2004).
  17. Hoth, J. J., Wells, J. D., Brownlee, N. A. Toll like receptor 4-dependent responses to lung injury in a murine model of pulmonary contusion. Shock. 31, 376-381 (2009).
  18. Matsutani, T., Samy, A. nantha, Rue, T. S., W, L. Transgenic prolactin-/- mice: effect of trauma-hemorrhage on splenocyte functions. Am J Physiol Cell Physiol. 288, 1109-1116 (2005).
  19. Matsutani, T., Samy, A. nantha, Kang, T. S., S-C, Mouse genetic background influences severity of immune responses following trauma-hemorrhage. Cytokine. 30, 168-117 (2005).
  20. Tsukamoto, T., Pape, H. C. Animal models for trauma research: What are the options. Shock. 31, 3-10 (2008).
  21. DeMaria, E. J., Pellicane, J. V., Lee, R. B. Hemorrhagic shock in endotoxin resistant mice : Improved survival unrelated to deficient production of tumor necrosis factor. J Trauma. 35, 720-724 (1993).
  22. Jamsa, T., Jalovaara, P., Peng, Z. Comparison of three-point bending test and peripheral quantitative computed tomography analysis in the evaluation of the strength of mouse femur. Bone. 23, 155-161 (1998).
  23. Bounarens, F., Einhorn, T. A. Production of a standard closed fracture in laboratory animal bone. J Ortho Res. 2, 97-101 (1984).
  24. Holstein, J. H., Menger, M. D., Culemann, U. Development of a locking femur nail for mice. J Biomech. 40, 215-219 (2007).
  25. Holstein, J. H., Garcia, P., Histing, T. Advances in the establishment of defined mouse models for the study of fracture healing and bone regeneration. J Orthop Trauma. 23, Suppl 5. S31-S38 (2009).
  26. Histing, T., Garcia, P., Matthys, R. An internal locking plate to study intramembranous bone healing in a mouse femur fracture model. J Orthop Research. 28, 397-402 Forthcoming.
  27. Manigrasso, M. B., O'Connor, J. P. Characterization of a closed femur fracture model in mice. J Ortho Trauma. 18, 687-695 (2004).
  28. Mark, H., Bergholm, J., Nilsson, A. An external fixation method and device to study fracture healing in rats. Acta Orthop Scand. 74, 476-487 (2003).
  29. Bhandari, M., Shanghnessy, S. A minimally invasive percutaneous technique of intramedullary nail insertion in an animal model of fracture healing. Arch Orthop Trauma Surg. 121, 591-593 (2001).
  30. Sonanis, S. V., Lampard, A. L., Kamat, N. A simple technique to remove a bent femoral intramedullary nail and broken interlocking screw. J Trauma. 63, 435-438 (2007).
  31. Kobbe, P., Kaczorwoski, D. J., Vodovotz, Y. Local exposure of bone components to injured soft tissue induces Toll-like receptor 4-dependent systemic inflammation with acute lung injury. Shock. 30, 686-691 (2008).
  32. Bumann, M., Henke, T., Gerngross, H. Influence of haemorrhagic shock on fracture healing. Lang Arch Surg. 388, 331-338 (2003).
  33. Santry, H. P., Alam, H. B. Fluid resuscitation: past, present, and the future. Shock. 33, 229-241 (2010).
  34. Hierholzer, C., Billiar, T. R. Molecular mechanisms in the early phase of hemorrhagic shock. Lang Arch Surg. 386, 302-308 (2001).
  35. Chaudry, I., Ayala, A., Ertel, W. Hemorrhage and resuscitation: immunological aspects. Am J Physiol. 259, 63-678 (1990).
  36. Kawasaki, T., Hubbard, W. J., Choudhry, M. A. Trauma-hemorrhage induces depressed splenic dendritic cell functions in mice. J Immunol. 177, 4514-4520 (2006).
  37. Kohut, L., Darwiche, S. S., Frank, A. M., Brumfield, J. M., Billiar, T. R. Fixed volume or Fixed Pressure: A Murine Model of Hemorrhgaic Shock. J Vis Exp. , (2010).
  38. Menzel, C. L., Pfeifer, R., Darwiche, S. S. Models of lower extremity damage in mice: time course of organ damage and immune response. J Surg Res. 166, e149-e156 (2011).
  39. Pfeifer, R., Kobbe, P., Darwiche, S. S. Role of hemorrhage in the induction of systemic inflammation and remote organ damage: Analysis of combined pseudo-fracture and hemorrhagic shock. J Orthop Res. 29, 270-274 (2011).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Pseudofracture ModelBone Solution PreparationBilateral Hindlimb CrushHemorrhagic Shock ModelImmune Response MonitoringRemote Organ AssessmentSterile Surgical TechniqueLong Bone HarvestingMouse Trauma Model

مقالات ذات صلة