يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

الحفاظ على الولبخية في الخلية خالية متوسطة

10.1K مشاهدة

DOI:

10.3791/223

يوليو 4, 2007

في هذه المقالة

ملخص

هذا الفيديو يصف طريقة لتنقية الولبخية pipientis من خلية خط الأنوفيلة الغامبية ثم استزراع معايش جواني في الخلية خالية من المتوسط. وأظهرت وجود جدوى لفحص للبكتيريا.

الملخص

في هذا البروتوكول الفيديو ، وأثبتت إجراءات (1) تنقية المتكافلة الولبخية من الخلايا المستنبتة البعوض ، (2) استخدام مقايسة الفلورسنت للتأكد من صلاحية الولبخية المنقى و (3) الحفاظ على الولبخية الآن في خارج الخلية خالية من الخلايا المتوسطة . تنقية الولبخية تبقى على قيد الحياة في مرحلة خارج الخلية ولكن لا تكرار حتى إعادة تلقيح في الخلايا حقيقية النواة. سوف الولبخية خارج الخلية المنقى في هذه الطريقة لا تزال قادرة على البقاء لمدة أسبوع على الأقل في درجة حرارة الغرفة ، وربما أكثر. تنقية الولبخية هي مناسبة لحقن الدقيقة ، واستخراج الحمض النووي وغيرها من التطبيقات.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

تنقية الولباخيا (Wolbachia)التحلل باستخدام الخرز الزجاجيالطرد المركزي التفاضليخطوات الترشيحمقايسة حيوية البكتيرياصبغ الخلايا الحية والميتةالطرد المركزي عالي السرعةالطرد المركزي منخفض السرعةالحفاظ على الوسط الخالي من الخلاياوسط شنايدر للحشرات (Schneider Insect Medium)