تصور الحركة البكتيرية باستخدام الوسط شبه الصلب المكمل بصبغة الأكسدة والاختزال

الملخص

المصدر: Chu و W. و Zhuang ، X. تصور الحركة البكتيرية بناء على تفاعل اللون. J. Vis. خبرة. (2022)

يوضح هذا الفيديو مقايسة أجار شبه صلبة قائمة على صبغة الأكسدة والاختزال لتقييم الحركة البكتيرية من خلال التمييز بصريا بين السلالات المتحركة وغير المتحركة بصريا.

البروتوكول

سلالات بكتيرية

ملاحظه: تم عزل ثمانين سلالة من البيئة المائية وتم تحديدها باستخدام أداة آلية لتحديد البكتيريا (انظر جدول المواد) ، بما في ذلك الإشريكية القولونية ، الزائفة الزنجارية ، السالمونيلا spp. ، الضمة spp. ، Klebsiella pneumoniae ، و Aeromonas hydrophila (الجدول 1). المكورات العنقودية الذهبية (انظر جدول المواد) تم استخدامه كعنصر تحكم سلبي غير متحرك. الإشريكية القولونية ، الزائفة الزنجارية ، والسالمونيلا التيفيموريوم (انظر جدول المواد) تم استخدامها كسلالات تحكم إيجابية.

1. تحديد السلالات البكتيرية الاختبارية لاستخدامها في تحليل الحركة.
2. تشمل عناصر التحكم السلبية غير المتحركة وسلالات التحكم الإيجابية المتحركة.

مراقبة الحركة البكتيرية المعززة ب TTC

1. اختر مستعمرات مفردة من بكتيريا الاختبار من ألواح أجار وقم بتلقيحها في الوسائط شبه الصلبة باستخدام TTC (2،3،5-ثلاثي فينيل تترازوليوم كلوريد) عن طريق ثقبها بإبر التلقيح.
2. زراعة الأنابيب عند 37 درجة مئوية في الحاضنة لمدة 24-48 ساعة لمراقبة النتائج.
3. راقب حالة النمو: وصف البكتيريا بأنها غير متحركة (-) إذا كان خط الثقب أحمر فقط. وصف البكتيريا بأنها متحركة (+) إذا انتشر اللون الأحمر برفق إلى الخارج على طول خط الثقب.

الجدول 1: مقارنة الحركة البكتيرية.

وتر		وسط شبه صلب مع 0.4٪ أجار		متوسط شبه صلب مع 0.4٪ أجار و 0.005٪ TTC
		24 ساعة	48 ساعة	24 ساعة	48 ساعة
ف. الزنجارية ATCC27853		+	+	+	+
الإشريكية القولونية ATCC25922		+	+	+	+
S. typhimurium ATCC14028		+	+	+	+
S. aureus ATCC25923		-	-	-	-
الإشريكية القولونية (15)		12	14	13	14
السالمونيلا (8)		7	8	8	8
أ. هيدروفيلا (20)		18	20	20	20
ضمة النياوب (8)		7	8	8	8
P. aeruginosa (24)		18	20	22	23
ك. الالتهاب الرئوي (5)		-5	-5	-5	-5
تشير الأرقام إلى عدد السلالات الموجبة (+) والبقع السالبة (-).

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
باكتو أجار	ديفكو
الإشريكية القولونية	ATCC	ATCC25922	التحكم الإيجابي
الزائفة الزنجارية	ATCC	ATCC27853	التحكم الإيجابي
المكورات العنقودية الذهبية	ATCC	ATCC25923	التحكم السلبي غير المتحركة
التربتوز	أوكسويد
TTC (2،3،5-ثلاثي الفينيل - كلوريد رباعي الزوليم)	سيغما	298-96-4
نظام التعرف الآلي على الميكروبات VITEK 2	السيرة الذاتية ميريو