تقنية لتحضير مزرعة بكتيرية وحيدة النسيلة

الملخص

المصدر: Lin, P., et al. توليف كبسولات تونجستات الصوديوم وموليبدات الصوديوم الدقيقة عن طريق إفراز المعادن البكتيرية. J. Vis. خبرة. (2018).

يوضح هذا الفيديو تحضير مزرعة بكتيرية وحيدة النسيلة لإنتاج المعادن من خلال التخفيف التسلسلي وعزل المستعمرة على صفيحة أجار. عن طريق هز اللوحة بالخرز الزجاجي ، يتم فصل الخلايا الفردية مكانيا لتشكيل مستعمرات موحدة وراثيا ، والتي يتم نقلها بعد ذلك إلى وسائط سائلة للنمو. يتم اختيار المزرعة ذات التعكر الأعلى ، مما يشير إلى كثافة السكان أحادية النسيلة وأكبر إمكانات الإنتاج المعدني.

البروتوكول

1. تحضير الخرز الزجاجي

1. ضع 100 حبة زجاجية بقطر 3 مم في زجاجة مختبر سعة 100 مل ، ثم قم بتغطيتها بإحكام.
2. قم بتعقيم المحتويات عند 120 درجة مئوية لمدة 10 دقائق.
3. اترك الزجاجة لتبرد إلى درجة حرارة الغرفة ، ثم ضعها في خزانة السلامة البيولوجية.

2. تحضير مرق الليسوجيني (LB)

1. قم بإذابة مسحوق 8 جم من مرق LB-Lennox في زجاجة مختبر سعة 500 مل مع 400 مل من الماء.
2. قلب المحتويات باستخدام قضيب التحريك المغناطيسي من البولي تترافلورو إيثيلين (PTFE) لمدة 20 دقيقة ، ثم قم بتغطيته بإحكام.
3. قم بتعقيم المحتويات عند 120 درجة مئوية لمدة 10 دقائق.
4. اترك المحلول ليبرد حتى يصل إلى درجة حرارة الغرفة وضعه في خزانة الس....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
LB (مرق لينوكس) مع أقراص أجار	سيجما ألدريتش	L7075	1 قرص ل 50 مل مرق مع أجار
رطل (مرق لينوكس)	سيجما ألدريتش	L3022-1 كجم	مسحوق LB (Lennox) 1 كجم
سكر العنب اللامائي	كاشف Nihon Shiyaku	78695 ر.ل	الجلوكوز
أنبوب الطرد المركزي 50 مل	صقر	14-432-22
أنبوب الطرد المركزي 15 مل	صقر	14-959-53 أ
زجاجة مختبر 100 مل	دوران	21 801 24 5
زجاجة مختبر 500 مل	دوران	21 801 44 5
ملعقة من الفولاذ المقاوم للصدأ	كيمزجاج	سي جي - 1981-10
PTFE قضبان التحريك القابل للتصرف	صياد	ط68066
أطباق بتري بلاستيكية	صياد	S33580A
حاضنه	صنع العميل	حسب الطلب	يسخن إلى 40 درجة مئوية أو يبرد إلى 18 درجة مئوية مع زمن cotrol
خزانة السلامة الحيوية	تسونج ين المحدودة	زيبه-420	تتم جميع العمليات المتعلقة بالبكتيريا هنا
الأوتوكلاف	Tomin Medical Equipmenco، Ltd. ، مدينة تايبيه ، تايوان ، ROC	TM-329	يسخن إلى 120 درجة مئوية لمدة 10 دقائق