تحضير ثقافة التهاب العقدية للأمراض لدراسات التفاعل بين المضيف والممرض

الملخص

المصدر: ناجي ، أ. ، وآخرون. دراسة الإجهاد التأكسدي الناجم عن مجموعة التهاب القامة المكورات العقدية في Caenorhabditis elegans. J. Vis. خبرة. (2019).

يوضح هذا الفيديو طريقة زراعة التهاب العقدية في ظل ظروف محبة للهواء الدقيق باستخدام مستخلص خميرة تود هيويت ، أو وسط أجار THY ، لإعداد الثقافات البكتيرية لدراسات تفاعل المضيف والمسببات الممرضة.

البروتوكول

1. تحضير المكورات العقدية لمجموعة التهاب الميث للعدوى

1. قم بإخراج السلالات المرغوبة من المكورات العقدية على أجار 100 مم × 15 مم THY (مستخلص خميرة تود-هيويت) (إذا تم تخزين الألواح عند 4 درجات مئوية ، قم بتسخين الألواح مسبقا إلى 37 درجة مئوية قبل وضع سلالات معنية) ، ثم احتضان الألواح عند 37 درجة مئوية طوال الليل (~ 18 ساعة) في وعاء شمعة يوفر بيئة مجهرية لنمو المكورات العقدية (يمكن تخزين الألواح المخططة لمدة أسبوع عند 4 درجات C).
2. لنشر العزلات السريرية للمكورات العقدية ، استخدم أجار دم الصويا التربتيك. احتضن الأطباق عند 37 درجة مئوية في وعاء شمعة طوال الليل (~ 18 ساعة).
3. في اليوم التالي ، قم بإزالة الألواح من جرة الشمعة واختر مستعمرات معزولة باستخدام حلقة معقمة. تلقيح 15 مل من الأنابيب المخروطية المعقمة التي تحتوي على 2 مل من مرق THY. لنشر العزلات السريرية للمكورات العقدية ، استكمل مرق THY ب 5٪ حجمي / حجم من دم الأغنام. أغلق الأغطية بإحكام واحتضن الأنابيب عند 37 درجة مئوية في ظل ظروف ثابتة.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
مرق BD باكتو تود هيويت	فيشر العلمية	DF0492-17-6
مستخلص الخميرة	فيشر العلمية	BP1422-500
ماصات مصلية من البوليسترين يمكن التخلص منها 10 مل	فيشر العلمية	07-200-574
ماصات مصلية البوليسترين القابل للتصرف 25 مل	فيشر العلمية	07-200-575
أطباق بتري فالكون بكتريولوجية بغطاء (35 مم × 10 مم)	فيشر العلمية	08-757-100 أ
طبق بتري بغطاء شفاف (60 مم × 15 مم)	فيشر العلمية	FB0875713A
أطباق بتري بغطاء شفاف (100 مم × 15 مم)	فيشر العلمية	FB0875712
التهاب العنقوديات ATCC 49456
اجار