إجراء توصيل البكتيريا داخل القصبة الهوائية في نموذج الفأر

الملخص

المصدر: Venuprasad, K., et al. إعطاء المستدمية النزلية داخل القصبة الهوائية في نماذج الفئران لدراسة التهاب مجرى الهواء. J. Vis. خبرة. (2016)

يوضح هذا الفيديو التوصيل داخل القصبة الهوائية للقاح بكتيري ممرض للرئة إلى فأر مخدر لنمذجة عدوى الجهاز التنفسي السفلي.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. التقطير داخل القصبة الهوائية (i.t.)

1. حقن الفأر داخل الصفاق (IP) بوزن جسم الفأر 0.1 مل / 10 جم مع محلول زيلازين 150 مجم / مل كيتامين + 20 مجم / مل. يجب أن يتم الإجراء في غطاء المحرك بمصدر ضوء للحفاظ على دفء.
2. اضغط على المساحة بين الأصابع للماوس للتحقق من تخدير الماوس بشكل كاف.
3. ضع الماوس على ظهره. احلق المنطقة البطنية من الرقبة وقم بتطهيرها بالكلوريكسيدين و 70٪ كحول إيثيلي.
4. ارفع جلد الجزء البطني العلوي من الرقبة باستخدام ملقط أسنان الفئران. قم بعمل شق صغير (0.5-1.0 سم) فوق الغدة الصعترية باستخدام مشرط وقم بتشريح العضلات بعناية لفضح القصبة الهوائية.
   1. باستخدام حقنة سعة 1 مل بإبرة 27 جرام ، يتم حقن 0.05 مل من الهواء ببطء ، متبوعا ب 0.05 مل من المستدمية النزلية النزلية غير القابلة للكتابة (NTHi) أو محلول ملحي كعنصر تحكم ، متبوعا بهواء آخر 0.05 مل. احتفظ بالحيوان عموديا لمدة 1 دقيقة.
5. أغلق الشق بالغراء الجراحي. حافظ على الماوس مستلقيا بشكل جانبي ودفئا لمدة 10 دقائق.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
حل سريع ماهر	سيغما	جي إس 500-500 مل
إبرة حقنة 20/26 جم	دينار بحريني	REF305115/175
حقنة 1 مل	دينار بحريني	المرجع 309602
مقص تشريح، مستقيم، بطول 10 سم	كينت سايفاينتيك	INS600393
ملقط القزحية ، مسنن ، طوله 10 سم	كينت سايفاينتيك	INS650915
ملاقط 5 ستانلس ستيل بطول 11 سم	كينت سايفاينتيك	INS600095