حركة الانزلاق في خيوط فورميديوم جونا

الملخص

المصدر: ويبر ، ن. ، وآخرون ، التحول الطبيعي ، وتعبير البروتين ، والحفاظ على التبريد للبكتيريا الزرقاء الخيطية Phormidium lacuna. J. Vis. خبرة. (2022)

يوضح هذا الفيديو إجراء تقييم حركة الانزلاق في ثغرة Phormidium عن طريق تجانس مزارع الفتيل لإنشاء تعليق موحد ، وإعداد إعداد فحص لوحة بتري على شريحة مجهر ، وتصور حركة الفتيل.

البروتوكول

1. فحص الحركة في وسط سائل
   1. للمراقبة المباشرة للحركة ، انقل 8 مل من الوسط الذي يحتوي على P. lacuna إلى طبق بتري 6 سم. انتظر بضع دقائق حتى تصل العينة إلى درجة حرارة الغرفة ، ثم قم بتغطية طبق بتري بورق السيلوفان.
   2. ضع شريحة مجهر على طاولة xy لمجهر قياسي بكاميرا. قم بتشغيل ضوء المجهر. من الناحية المثالية ، استخدم دائما نفس الإعدادات الكهربائية والبصرية للإضاءة. حرك هدفا 4x أو 10x في مسار الضوء.
   3. ضع طبق بتري فوق الشريحة. اضبط الخيوط المفردة أو حزم الفتيل بحركات x وy وz للجدول.
      ملاحظه: نظرا للترتيب ثلاثي الأبعاد ، يمكن التركيز على جزء فقط من القسم ذي الصلة. تسمح رقائق السيلوفان بضبط التركيز دون قيود.
   4. مراقبة حركات الخيوط أو الحزم الفردية. تأكد من أن العدسة الشيطية لا تلمس السائل. سجل حركات الخيوط بكاميرا مجهر قياسية.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
الأواني الزجاجية المختلفة
مجهر DM750	زييس
كاميرا العين MikrOkular Full HD	بريسر		للتسجيلات ذات الفاصل الزمني، إلى جانب الكمبيوتر الصغير Raspberry Pi
أطباق بتري بوليسترول، 60 مم × 15 مم	ميرك	P5481-500EA
البرنامج، عنوان URL
إيمج جي		برنامج لمعالجة immage (شدة البكسل ، قطر الدائرة)
الإعلام الثقافي
مياه البحر الاصطناعية	0.41 مليون كلوريد الصوديوم ، 53 ملي MgCl₂ ، 28 ملي Na₂SO₄ ، 10 ملي كالسيوم ، 9 ملي KCl ، 2.4 ملي NaHCO₃ ، 0.84 ملي KBr ، 0.49 ملي H3BO₃ ، 90 ميكرومولار SrCl₂ ، 72 ميكرومتر NaF
f / 2 - وسط سائل	مياه البحر الاصطناعية ، محلول العناصر النزرة 0.1٪ (حجمي / حجمي) ، محلول فيتامين 0.05٪ (حجمي / حجمي) ، 0.88 ملي نانومات نواد النينود النيتروجين ، 36 ميكرومولار هيدروكاليت الهيدروجين ₂PO₄
حل العناصر النزرة	0.36 ملي مولار NaH₂PO₄ ، 12 ميكرومتر Na₂EDTA ، 39 نانومتر CuSO₄ ، 26 نانومتر Na₂MoO₄ ، 77 نانومتر ZnSO₄ ، 42 نانومتر CoCl₂ ، 0.91 ميكرومتر MnCl₂
محلول فيتامين	0.3 ميكرومتر الثيامين حمض الهيدروكلورايد ، 2.1 نانومتر البيوتين ، 0.37 نانومتر سيانوكوبالامين