Method Article

تقييم حركة البكتيريا باستخدام جهاز ميكروفلويديك

November 28th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: شيدويلر، د.، وآخرون. دمج الأجهزة السائلة مع المجهر وقياس التدفق الخلوي لدراسة نقل الميكروبات في الأوساط المسامية عبر المستويات المكانية. J. Vis. Exp. (2020).

يوضح هذا الفيديو استخدام جهاز ميكروفلويديك لقياس حركة البكتيريا من خلال مصفوفة مسامية مكونة من أعمدة مرتبة عشوائيا. يتم إدخال بكتيريا معلمة بالفلورية إلى الجهاز، ويتم تصويرها عبر المجهر أثناء تحركها عبر المصفوفة المسامية إلى قناة المراقبة، ويتم تحليلها لتوليد منحنى اختراق (BTC).

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. ظروف زراعة البكتيريا

  1. عند العمل تحت غطاء تدفق طبقي، استخدم 100 ميكرولتر من مخزون الجلسرول من بروتين فلوري أخضر (GFP) وموسوم ب Pseudomonas putida KT2440 (1 ×10 7 مل-1، مخزن عند -80 درجة مئوية) لتطعيم 5 مل من وسط لوريا-بيرتاني (LB). الحضانة عند 30 درجة مئوية مع الرج عند 250 دورة في الدقيقة طوال الليل.
  2. في اليوم التالي، أعد تعليق 100 ميكرولتر من الزراعة الليلية في وسط 5 مل رطل واحتضن تحت نفس الظروف لمدة 5 ساعات (المرحلة الأسية). أخذ عينات من أليكوت بسعة 1 مل في أنبوب بسعة 2 مل، واتركه يبرد حتى درجة حرارة الغرفة (~15 دقيقة)، ثم استخدم الطرد المركزي (2300 × جرام لمدة 5 دقائق).
  3. أزل السوبرناتينت وأضف 1 مل من مخزن ال....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
24299_Figure_1.jpg

الشكل 1: الأجهزة السائلة لدراسة نقل الميكروبات في الأوساط المسامية (أ) توضيح لجهاز سائل مطحن من بولي (ميثيل ميثاكريلات (PMMA). يتم تشكيل المصفوفة المسامية في الطبقة الأساسية للجهاز، ويغلق الغطاء باستخدام براغي. يظهر المقطع العرضي ترتيب الأع.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
حمض الإيثيلين ديامين رباعي الأسيتيك (EDTA)سيغما  
إيلاستومر سيلغارد 184داوسيل101697 
جهاز قياس التدفق الخلوي NovoCyteالآيسيا  
الجلوكوزسيغما https://www.makeblock.com/project/xy-plotter-robot-kit
مرق لوريا-بيرتاني (LB)دينار بحريني  
موزع السائل، مجموعة XY Plotter Robotميك بلوك  
ميكروسكوب أكسيو ميميجرزييس  
ميكروسكوب أكسيوزوم v16زييس  
شرائح المجهر، 75 مم × 25 ممكورنينج  
مضخة بيريستالتيكية Minipuls 3جيلسون  
رابطة البلازما كورونا SBمختبر الثقب الأسود  
فوسفات البوتاسيومسيغما  
مضخة الحقنة نيو إيرا NE 4000العصر الجديد  
صبغة سايتو 13 الخضراء بحمض الفلورييك النوويالمجسات الجزيئية، إنفيتروجين  
أنابيب تايجونإيسماتك  
آلة التفريز العالمية WF31SAميكرون  

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Microfluidic DeviceBacterial MotilityPorous MatrixFluorescent BacteriaBreakthrough CurveSyringe PumpMicroscopy ImagingFlow CytometryObservation ChannelBuffer Saturation

Related Articles