تصور عدوى المسالك البولية في نموذج فأر باستخدام التوهج الحيوي

Abstract

المصدر: لويتس، ن. وآخرون. المتابعة الطولية لالتهابات المسالك البولية وعلاجها في الفئران باستخدام التصوير التوهج الحيوي. J. Vis. Exp. (2021).

يوضح هذا الفيديو تحفيز وتتبع عدوى المسالك البولية في نموذج فأر باستخدام إشريكية كولوم متوهجة حيويا تحقن في المثانة، حيث يحدث التصاق البكتيريا والغزو والتكاثر داخل الخلية. يعمل الضوء المنبعث من الأوبيرون المضيء الحيوي كمؤشر فوري على حمل البكتيريا أثناء تقدم العدوى.

Protocol

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بنماذج من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس مراجعة الطب البيطري في JoVE.

1. تلقيح

1. تحضير
   1. اختر السلالة المرغوبة من الفأر حسب سؤال البحث وتوفر خطوط الإقصاء، والتفاصيل التجريبية، والاختلافات في الحساسية لعدوى المسالك البولية. ضع في اعتبارك أن القسطرة عبر الإحليل أسهل لدى إناث الفئران. لا تستخدم التي تقل عن 8 أسابيع، لأنها غير ناضجة مناعيا. هنا، تم استخدام فئران إناث عمرها 12 أسبوعا من نوع C57Bl/6J.
   2. اطلب مسبقا ودعها تتأقلم، ويفضل أن يكون ذلك لمدة 7 أيام. تجمع في أقفاص مهواة بشكل فردي، تحت ظروف ضوء/ظلام قياسية لمدة 12 ساعة.
   3. احلق منطقة البطن في للحد من فقدان الإشارة. ل....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
جهاز تبخير التخدير	هارفارد أبريتوس ليمتد	لا يوجد	https://www.harvardapparatus.com/harvard-apparatus-anesthetic-vaporizers.html
بايتريل 100 ملغ/مل	باير	لا يوجد	إنروفلوكساسين
BD Insyte Autoguard 24 GA	BD	382912	قسطرة أصفراء، استخدم رأس بلاستيكي معقم للغرس
فئران C57Bl/6J	جانفييه	لا يوجد
الطرد المركزي 5804R	إبندورف	EP022628146
دروب سينس 16	مختبرات غير مقيدة	ترينيان	لقياس OD 600 نانومتر
محلول ملحي مخزن الفوسفات من دولبيكو، Gibco	ثيرموفيشر ساينتيفيك	المرجع 14040-083
الإيثانول 5 لتر مصاب بنسبة 70٪	VWR الدولي	85825360
أنبوب بوليسترين دائري قاع فالكون 14 مل، غطاء مكبس	كورنينغ	352057
فالكون خلية 50 مل	غرينر	227285
حقنة هاميلتون GASTIGHT، قفل PTFE لوير، 100 ميكرولتر	سيغما-ألدرتش	26203	لضمان ترسيخ بكتيريا بطيء بمقدار 50 ميكرولتر
حلقة التطعيم	روث	6174.1	حامل: الفن. رقم 6189.1
Iso-Vet 1000mg/g	منتجات ديكرا البيطرية	لا يوجد	إيزوفلوران
نظام التصوير في طيف IVIS في الجسم الحي	بيركينإلمر	124262 المرجع	جهاز تصوير