يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

عزل وزراعة البكتيريا من أجنة سمك الزرد لتقييم حمل العدوى

331 مشاهدة

يناير 30, 2026

في هذه المقالة

الملخص

المصدر: بيرنوت، أ.، وآخرون، فك وتصوير سبب وربط خراجات الفطر في أجنة سمك الزرد. ج. فيس. إكسبر. (2015).

يوضح هذا الفيديو بروتوكول لعزل وقياس خراج الفطر الفطري عن جنين سمكة الزرد المصاب. يتضمن الإجراء قتل الجنين الرحيم، وتحلل الأنسجة، والتجانس لإطلاق البكتيريا، يليه الطرد المركزي وإعادة التعليق في مخزن خافض للتوتر السطحي. وأخيرا، يتم تخفيف التعليق البكتيري بشكل تسلسلي، وتغطيتها على الأجار المكملة بالمضادات الحيوية، وحضانها لتمكين تكوين المستعمرة وقياسها.

البروتوكول

  1. تحضير وتخزين لقاح الم. خراج
    1. حالات نمو M. abscessus
      1. قم بإخراج خراج M. absceus من مخزون جليسرول بدرجة -80°C إلى أجار Middlebrook 7H10 يحتوي على 10٪ من OADC و0.5٪ جليسرول (7H10OADc) وتم استكمالها بالمضاد الحيوي المناسب حسب مؤشر المقاومة الذي يحمله الناقل المشفر للبروتين الفلوري. حضن الألواح على حرارة 30 درجة مئوية لمدة 4-5 أيام.
      2. احصل على مستعمرة فطرية إيجابية للفلورة وقم بتلقيح 1 مل من مرق ميدلبروك 7H9 مع مكمل ب OADC، 0.2٪ جلسرول، 0.05٪ Tween 80 (7H9OADc/T) مع المضاد الحيوي المطلوب في أنبوب بلاستيك معقم بحجم 15 مل. حضن على حرارة....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

Figure_1.jpg

الشكل 1. تحضير مسرحية M. abscessus inocula المشتتة. تلوين زيل-نيلسن لمتغيرات R أو S المزروعة على وسط المرق قبل أي معالجة (الألواح العلوية) أو بعد العلاج (الألواح السفلية) لتقليل حجم وعدد التجمعات الميكوبكتيرية (خ.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
BBL MGIT PANTAبكالوريوس العلوم الحيوية245114 
مصل البقر ألبومينيوروميديكس04-100-811-E 
كاتالاز من كبد البقرسيغما-ألدرتشC40 
ديفكو ميدلبروك 7H10 Agarبكالوريوس العلوم الحيوية262710 
ديفكو ميدلبروك 7H9 Brothبكالوريوس العلوم الحيوية271310 
ملح إيثيل 3-أمينوبنزوات الميثان سلفونات (تريكائين)سيغما-ألدرتشA5040 
حمض الأوليكسيغما-ألدرتشO1008 
بارافورمالديهايددلتا ميكروسكوبي15710 
فينول ريدسيغما-ألدرتش319244 
توين 80سيغما-ألدرتشP4780 
أغارجيبكو لايف تكنولوجي30391-023 
أجاروز ذوبان منخفضسيغما-ألدرتش  
أملاح البحر الفوريةشركة أكواريوم سيستمز إنك  
شعيرات زجاج بوروسيليكاتشركة ساتر إنسترومنت إنكBF100-78-101 مم O.D. × 0.78 مم تعريف
جهاز سحب الميكروبايبتشركة ساتر إنسترومنت جهاز سحب الميكروبايبت المصنوع من اللهب/البني p-87
الحقن الدقيقأبحاث ترايتيك الميكروINJECTOR الرقمي، MINJ-D
الملقطساينس تولز إنك دومونت # M5S
نصائح المكرولودرإبندورف  

الوسوم

Middlebrook 7H10 Triton X 100 Tricaine