تصوير حي لتفاعلات المضيف مع الممرض في أجنة سمك الزرد المصابة بخراج الفطرطرية

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: بيرنوت، أ.، وآخرون. فك شفرة وتصوير مسببات الأمراض وربط خراج الفطر في أجنة أسماك الزرد. J. Vis. Exp. (2015)

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا يستخدم أجنة سمك الزرد المعدلة وراثيا تعبر عن بلاعم فلورية ومصابة بسلالة خرافية الفلورية لتصور التفاعلات بين المضيف والممرض. يكشف كيف يمكن الحبال خارج الخلية من التهرب المناعي، مما يعزز بقاء البكتيريا وتلف خلايا المضيف.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. تصوير مباشر لعدوى المكسوس خراج

أجنة مخدرة بجبل تريكائين في أجاروز منخفضة نقطة انصهار بنسبة 1٪ في طبق بتري بقطر 35 مم قبل ملاحظات المجهر فوق الفلوري. استخدم طبق زجاجي قاعي للمجهر الكونفوكالي المقلوب أو شريحة تجويف واحدة للمجهر الكونفوكالي العمودي. وجه الجنين إلى الموضع المطلوب وغط الأغاروز المتصلب بماء السمك الذي يحتوي على الترايكين.
استخدم مجهر فوق التألق بهدف 10 أضعاف لالتقاط ونقل الصور المتسلسلة للفلورة بالجنين بأكمله. بدلا من ذلك، استخدم مجهر كونفوكال بأهداف 40X أو 63X لرؤية نشاط الخلايا المناعية بعد العدوى.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم

الشركة

رقم فهرسي

التعليقات

أجاروز ذوبان منخفض

سيغما-ألدرتش

ملح إيثيل 3-أمينوبنزوات الميثان سلفونات (تريكائين)

سيغما-ألدرتش

A5040

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن