قياس كمية حمل بكتيريا الأنسجة في نموذج فأر للعدوى المعوية المزمنة

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: لو، ب. س. وآخرون. تليف معوي ناتج عن عدوى السالمونيلا المزمنة. J. Vis. Exp. (2019)

يوضح الفيديو قياس كمية الحمل البكتيري في نموذج فأر للعدوى المزمنة بسالمونيلا تايفيموريوم المقاومة للستربتوميسين. بعد القتل الرحيم والتشريح المعقم، يتم جمع الأنسجة المخية والطحالية، وتحاقد بحبيبات فولاذية لإطلاق البكتيريا، وتخفيفها بشكل متسلسل. يتم طلاء التخفيفات على الأجار الانتقائي، ويتم عد المستعمرات المرئية لتقدير الحمل البكتيري لكل جرام من النسيج في المواقع المعوية والجهازية.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بنماذج الحيوانات من قبل لجنة رعاية الحيوانات المؤسسية المحلية ومجلس مراجعة الطب البيطري في JoVE.

1. تحضير زراعة السالمونيلا التيفيموريوم ΔROA لزراعة الفم للفئران

من مخزون الجلسرون المجمد من S. Typhimurium ΔAroA، جهز صفيحة مخطط باستخدام أجار لوريا-بيرتاني (LB agar) يحتوي على 100 ميكروغرام/مل ستربتوميسين مع حلقة تلقيح معقمة. الحضانة طوال الليل عند 37 درجة مئوية. يمكن تخزين صفائح السلسلة حتى أسبوع واحد عند 4 درجات مئوية.
قبل يوم واحد من العدوى، حضر المضاد الحيوي عن طريق إذابة 0.5 جرام من الستربتوميسين في 2.5 مل من الماء. بعد تعقيم محلول الستربتومايسين بالتصفية، قم بتع....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article

Name

Company

Catalog Number

Comments

أنابيب قفل أمان دائرية بحجم 2 مل

إبندورف

22363344

خرزات الفولاذ المقاوم للصدأ

تشياغن

69989

PBS

جيبكو

10010031

رؤوس المناجم ذات الفتحة الكبيرة

فيشر

2707134

ألواح ميغابلوك بحجم 2 مل

سارستيدت

82.1972.002

إبر جافاج

FST

18061-22

كبريتات الستربتوميسين

سيغما

S9137

مطحنة الخلاط

ريتش

مم

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission