$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بنماذج الحيوانات من قبل لجنة رعاية الحيوانات المؤسسية المحلية ومجلس مراجعة الطب البيطري في JoVE.
1. مسح التجويف المهبلي لقياس كمية الحمل السليم
- جهز أنبوب طرد مركزي دقيق واحد بسعة 1.5 مل لكل فأر بإضافة 100 ميكرولتر من محلول ملحي مخبأ بالفوسفات (PBS). قبل المسح مباشرة، قم بترطيب المسحة مسبقا باستخدام PBS.
- قيد الفأر وأدخل المسحة بمقدار 10 مم في التجويف المهبلي. قم بتدوير المسحة بلطف 4 مرات مع عقارب الساعة وأربع مرات عكس اتجاه عقارب الساعة، مع تطبيق ضغط خفيف على جدار المهبل.
- انقل المسحة إلى أنبوب الطرد المركزي الدقيق بسعة 1.5 مل مع 100 ميكرولتر من PBS. قبل الطبق، قم بتدوير أنبوب الطرد المركزي الدقيق لمدة ~15 ثانية لتحرير البكتيريا من المسحة. يتم تخفيف كل عينة بشكل تسلسلي في PBS ولوحة بحجم 20 ميكرولتر من التخفيفات بنسبة 1:10 إلى 1:10,000 على ألواح أجار متوسطة تفاضلية محضرة حسب تعليمات الشركة المصنعة. حضن الصفائح عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة. ستظهر مستعمرات المكورات العقدية من المجموعة ب (GBS) إما باللون الوردي الزاهي أو البنفسجي الفاتح. ستتثبط النباتات الداخلية الأخرى، أو ستظهر كمستعمرات زرقاء أو بيضاء أو رمادية.