تعبير Qβ امسح منطقة العمل بمزيج 1:1 من المبيض والإيثانول. قم بتحضير مزرعتين بادئتين بحجم 3 مل في بيئة معقمة عن طريق إضافة مستعمرات منفردة من بكتيريا E. coli BL21(DE3) إلى 3 مل من وسط Super Optimal Broth (SOB) في بيئة معقمة. يتم الإنماء على هزاز بسرعة 250 دورة في الدقيقة في غرفة درجة حرارتها 37 درجة مئوية ورطوبتها النسبية (rH) 0% طوال الليل. تلقيح المزرعة البادئة في وسط SOB: ارفع المزرعتين البادئتين (3 مل) من على الهزاز، وفي بيئة معقمة، صب كل مزرعة بادئة في واحدة من قارورتين إرلنماير مائلتين (baffled Erlenmeyer flasks) سعة 2 لتر تحتوي كل منهما على 1 لتر من وسط SOB الطازج. ضع الأوساط الملقحة على هزاز بسرعة 250 دورة في الدقيقة في غرفة درجة حرارتها 37 درجة مئوية ورطوبتها النسبية 0%. قم بإنماء البكتيريا على الهزاز بسرعة 250 دورة في الدقيقة في غرفة درجة حرارتها 37 درجة مئوية ورطوبتها النسبية 0% حتى تصل الكثافة الضوئية (OD600) إلى 0.9-1.0. أضف 1 مل من isopropyl β-D-1 thiogalactopyranoside (IPTG) بتركيز 1 مولار باستخدام ماصة P1000 لتحفيز التعبير البروتيني. اترك الأوساط على الهزاز بسرعة 250 دورة في الدقيقة في غرفة درجة حرارتها 37 درجة مئوية ورطوبتها النسبية 0% طوال الليل. ارفع الأوساط من على الهزاز في صباح اليوم التالي وقم بطردها مركزياً باستخدام زجاجات سعة 1000 مل عند 20,621 × g لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارة 4 درجة مئوية لحصاد الخلايا. تخلص من السائل الطافي واجمع كتلة الخلايا المترسبة. صب السائل الطافي في قارورة تحتوي على حوالي 5 مل من المبيض لقتل البكتيريا، حيث تُعتبر هذه نفايات. استخدم ملعقة كشط (spatula) لكشط كتلة الخلايا من قاع زجاجة الطرد المركزي وضع الكتلة في أنبوب طرد مركزي سعة 50 مل. تشن، ز.، وآخرونتحضير جسيمات شبيهة بالفيروسات مـُفلورة ومـُبـيغـيـلـة مُـحـفـزة بالاقتران باستخدام كيمياء ثنائي برومو مالييميد-ثنائي الكبريتيد. مجلة التجارب المرئية (J. Vis. Exp.) (2018)
يوضح هذا الفيديو طريقة التعبير الخاضع للتحكم عن بروتين الغلاف للفاج Qβ في بكتيريا E. coli المعدلة هندسياً. وتتجمع البروتينات الناتجة ذاتياً لتشكل جسيمات شبيهة بالفيروسات، والتي يتم حصادها لعمليات الاقتران الحيوي اللاحقة.
