Method Article

استخدام الري بالتنقيط وتدفق مفاعلات الأقراص الدوارة ل المكورات العنقودية الذهبية التحليل بيوفيلم

DOI:

10.3791/2470

December 27th, 2010

In This Article

Erratum Notice

Important: There has been an erratum issued for this article. Read More ...

Erratum

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Formal Correction: Erratum: The Use of Drip Flow and Rotating Disk Reactors for Staphylococcus aureus Biofilm Analysis
Posted by JoVE Editors on 3/14/2011. Citeable Link.

null

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وتعرض لاستخدام بروتوكولات مفتوحة مع نظام الأغشية الحيوية تدفق مفاعلات تدفق بالتنقيط والدورية المفاعلات القرص بالتفصيل.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويعتقد أن معظم الميكروبات في الطبيعة في الوجود والسطحية المصاحبة للمجتمعات المحلية في الأغشية الحيوية. 1 الأغشية الحيوية الجرثومية المغطى داخل مصفوفة وتعلق على تشكيل سطح الأرض. بيوفيلم 2 والتنمية تدرس عادة في المختبر باستخدام نظم الدفعي مثل لوحات أو تدفق microtiter نظم ، مثل خلايا التدفق. هذه المنهجيات هي مفيدة لفحص المكتبات متحولة والكيميائية (لوحات microtiter) 3 أو الأغشية الحيوية المتنامية للمرئيات (خلايا تدفق) 4. هنا نقدم بروتوكولات وإجراءات تفصيلية عن المكورات العنقودية الذهبية المتزايد في نوعين من الأغشية الحيوية إضافية نظام التدفق : بيوفيلم في تدفق مفاعل بالتنقيط وبيوفيلم القرص مفاعل بالتناوب.

تم تصميم المفاعلات بالتنقيط تدفق بيوفيلم لدراسة الأغشية الحيوية نمت في ظل ظروف القص منخفضة. بالتنقيط تدفق 5 المفاعل يتكون من أربع قنوات اختبار بالتوازي مع ذلك ، كل قادر على عقد one ميكروسكوب القسيمة الشريحة القياسية الحجم ، أو طول قسطرة أو مهمة. المفاعل بالتنقيط تدفق مثالية لرصد microsensor ، الدراسات العامة بيوفيلم ، وعينات بيوفيلم cryosectioning ، وارتفاع إنتاج الكتلة الحيوية ، وتقييم المواد الطبية ، وسكنى اختبار الجهاز الطبي. 6،7،8،9

المفاعل القرص الدورية يتكون من قرص يحتوي على تجاويف للتفلون القسائم القابلة للإزالة. القسائم القابلة للإزالة (10) التي يمكن من أي مادة ألالة. الجزء السفلي من قرص يحتوي على المغناطيس الدورية للسماح للشريط تناوب على القرص لإنشاء القص السائل عبر سطح سطح دافق القسائم. يوضع القرص بأكمله يحتوي على 18 قسيمة في كوب مل 1000 سفينة المفاعل الجانبية الذراع. ويتم توزيع وسائل الاعلام من خلال النمو السائل السفينة في حين يتم تدوير القرص من قبل النمام المغناطيسي. تتم إزالة القسائم من السفينة المفاعل ثم كشط لجمع عينة بيوفيلم لمزيد من الدراسة أو التصوير المجهري. تم تصميم المفاعلات القرص الدورية لتقييم كفاءة المختبر بالطرق البيولوجية ، وإزالة بيوفيلم ، وأداء المواد المانعة للقاذورات. 9،11،12،13

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. وبيوفيلم بالتنقيط تدفق مفاعل

  1. وبيوفيلم تدفق مفاعل بالتنقيط (يمكن عادة ما تكون متاحة من تقنيات Biosurface أو العرف تصميم إصدارات أن تدلي بها محلات آلة الجامعة ، انظر الشكل 1) يتم تجميعها وتعقيمها. ويشمل التجمع كوبونات الالصاق في الغرف وغرفة أغطية تأمين. يتم تعقيم الغرفة ، جنبا إلى جنب مع بيوفيلم المتوسطة (مرق الصويا تريبسيني 2 غرام / لتر والجلوكوز 2 غرام / لتر) ، وأنابيب المغذيات مؤثر من قبل التعقيم.
  2. غير متشكلة تلقيح من مفاعل بالتنقيط تدفق من خلال وضع المفاعل على سطح مستو ، خطوط أنابيب لق....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الأغشية الحيوية ونمت في المفاعلات مختلفة في كثير من الأحيان ، والخصائص المختلفة لكل مفاعل لها تطبيقات مختلفة. في هذا العمل ، ونحن تصف استخدام المفاعلات بيوفيلم هما : بيوفيلم تدفق مفاعل بالتنقيط ومفاعل القرص بالتناوب. المفاعلات بالتنقيط تدفق مفيدة لنمو منخفض في الأغشية الحيوية القص واجهة الهواء السائل وقابلة للتكيف مع مجموعة متنوعة من الظروف. نجدهم مريحة للغاية للدراسات حيث كمية كبيرة من الكتلة الحيوية بيوفيلم أمر مرغوب فيه. ويمكن بسهولة أن تتكيف هذا الإعداد للدراسات التي تنطوي على.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

NIAID منح K22AI081748.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
مفاعلات التدفق بالتنقيطشركة BioSurface Technologies CorporationDFR 110
مفاعلات القرص الدوارةشركة
BioSurface Technologies Corporation

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Costerton, J. W., Lewandowski, Z., Caldwell, D. E., Korber, D. R., Lappin-Scott, H. M. Microbial Biofilms. Annu. Rev. Microbiol. 49, 711-745 (1995).
  2. Costerton, J. W., Cheng, K. J., Gessey, G. G., Ladd, T. I., Nickel, J. C., Dasgupta, M., Marrie, T. J. Bacterial biofilms in nature and disease. Ann. Rev. Microbiol. 41

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Staphylococcus aureus BiofilmDrip Flow ReactorRotating Disk ReactorBiofilm FormationScanning Electron MicroscopyColony Forming UnitsFlow Rate ControlBiomass QuantificationAntimicrobial TestingCoupon Harvesting

Related Articles