$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
فئة
1. تحريض الجين المعتمد على التتراسيكلين أو تعبير shRNA
تنبيه: قد يكون الدوكسيسيكلين ضارا. يرجى الرجوع إلى ورقة بيانات السلامة.
ملاحظة: اعتمادا على نوع التجربة ومدتها ، يمكن توفير الدوكسيسيكلين في مياه الشرب.
- بالنسبة للتجارب قصيرة المدى (<10 أيام) ، يتم تطبيق الدوكسيسيكلين عن طريق مياه الشرب باستخدام البروتوكول التالي.
- قم بإذابة 5 جم من السكروز في 100 مل من ماء الصنبور. الأوتوكلاف.
- قم بإذابة 100 مجم من الدوكسيسيكلين هيكلات في 5 مل من محلول السكروز (الخطوة 1.1.1) في أنبوب مخروطي سعة 15 مل.
- باستخدام حقنة سعة 10 مل ، قم بتصفية المحلول المعقم من خلال مرشح 0.2 ميكرومتر. أضف إلى محلول السكروز المحضر في الخطوة 1.1.1.
- توريد محلول الدوكسيسيكلين والسكروز كمياه شرب للفأر. تحقق يوميا واستبدلها عندما يصبح المحلول غائما مما يشير إلى فرط نمو البكتيريا (استبدل المحلول الشفاف بعد ثلاثة أيام على أبعد تقدير).