تقنيات تحرير الجينوم

يشرح هذا الفيديو مفهوم محرري قاعدة السيتوزين بوساطة كريسبر للحث على استبدال النيوكليوتيدات المستهدفة.

في هذا الفيديو ، نوضح تحرير الجينوم الكل في واحد القائم على CRISPR-Cas9 في الخلايا المستنبتة حيث يتم توفير Cas9 و sgRNA كبناء بلازميد واحد للخلايا. تم إدخال نظام CRISPR-Cas9 والجين المطلوب إدخاله في الخلايا من خلال تقنية التثقيب الكهربائي لتسهيل التحرير الجيني الناجح.

يوضح هذا الفيديو تقنية تحرير الجينوم القائم على نوكلياز إصبع الزنك في الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات (hPSCs). نظرا لأنه يمكن تمييز hPSCs إلى أنواع مختلفة من الخلايا ، فإن هذه التقنية مفيدة للدراسات المرضية والدوائية في المختبر بطريقة خاصة بالمريض.

يصف هذا الفيديو تقنية دقيقة لتحرير الجينوم في الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة البشرية ، أو hiPSCs ، باستخدام TALENs لإنشاء فواصل مزدوجة الشريطة في موضع مستهدف ، مما يؤدي إلى إصلاح موجه بالتماثل لتكامل جينات البروتين الفلوري.

في هذا الفيديو ، نوضح تكامل الجينات المعدلة وراثيا الخاص بالموقع بوساطة phiC31 في جنين Anopheles عن طريق الحقن المجهري. تساعد هذه الطريقة في إدخال الجينات المرغوبة في نظام مضيف للبحث والتطبيقات الصناعية.

في هذا الفيديو ، نوضح جيلا من نباتات نبات نبات الأرابيدوبسيس المعدلة وراثيا تعبر عن الجينات المعدلة وراثيا مستقرة من خلال التحول الجيني الثنائي القائم على الكروموسوم الاصطناعي بوساطة Agrobacterium.

في هذا الفيديو ، نوضح إجراء لتوليد خط معدل وراثيا مستقر لأسماك الزرد يعبر بشكل أساسي عن بروتين مؤشر جهد الفلورسنت بعد الحقن المشترك لنظام الينقولات Tol2 الذي يشتمل على الترانسبوزياز mRNA و Tol2 ينقولات ترميز مؤشر الجهد الفلوري.

< ص الفئة = "jove_content">يوضح هذا الفيديو الإجراء لتوليد الخلايا العصبية الحركية عن طريق تعدي iPSCs البشرية باستخدام نظام الينقولات PiggyBac عن طريق التعبير خارج الرحم لعوامل النسخ الخاصة بالنسب.

يوضح هذا الفيديو إسكات الجين القائم على تداخل كريسبر في Leptospira المسببة للأمراض. يساعد القمع المستهدف للتعبير الجيني باستخدام نظام CRISPR / Cas الذي يمنع تكوين mRNA في تحديد الجينات المرشحة للدراسات المرضية والدوائية.

يصف هذا الفيديو إجراء للضربة القاضية للجين المستهدف باستخدام نظام Cre-recombinase المحفز للتاموكسيفين بعد الحقن داخل الصفاق للتاموكسيفين في نموذج الفأر.

يصف هذا الفيديو تقنية خروج المغلوب الجيني باستخدام CRISPR-concatemer لضرب جينات متعددة في نفس الوقت في الخلايا العضوية المعوية للفأر المستنبتة. تستخدم هذه الطريقة لضرب الجين المصاب ولتوضيح وظيفة الجين وparalogues.

في هذا الفيديو ، نوضح طريقة لإجراء نقل نواقل shRNA الفيروسية للحصول على خطوط خلية قاضية مستقرة في الخلايا الجذعية المكونة للدم والخلايا السلفية (iHSPCs).

يوضح هذا الفيديو نظام التعبير الجيني التتراسيكلين ، أو Tet-On ، في نموذج الفأر. في وجود الدوكسيسيكلين ، وهو مشتق من التتراسيكلين ، يتم تنشيط نظام Tet-On الذي يتكون من بروتين منشط عكسي يتم التحكم فيه بواسطة التتراسيكلين ويعبر عن الجين محل الاهتمام.

في هذا الفيديو ، نصف إجراء لإجراء تعداء عكسي ل siRNA إلى الخلايا الشحمية لتعديل التعبير عن البروتين المستهدف.

يصف هذا الفيديو طريقة تنظيم التعبير الجيني في الخلايا المستنبتة عن طريق التعدي باستخدام البلازميد الذي يحتوي على جين مهم وبلازميد تنظيمي. يمكن التحكم في التعبير عن هذا البلازميد عن طريق التتراسيكلين أو نظائره الاصطناعية ، مما يجعل هذا النظام نموذجا مفيدا لدراسة التعبير الجيني القابل للتنظيم.

يصف هذا الفيديو تقنية ضربة قاضية للجينات باستخدام مورفولينوس الحجب الانتقالي المحقون في مرحلة الخلية الواحدة من أسماك الكهف. Morpholinos عبارة عن قليل النوكليوتيدات من الحمض النووي ترتبط بالتسلسل التكميلي ل mRNA المستهدف وتمنع ترجمته إلى بروتين. وبالتالي ، يتم استخدام المورفولينو كأدوات جزيئية لإيقاف أو تقليل تعبير الجين بشكل عابر.