Method Article

التحول الجيني القائم على نواقل الكروموسوم الاصطناعية البكتيرية الثنائية في نباتات نبات الأرابيدوبس: تقنية لتوليد نباتات معدلة وراثيا بإدخال نسخة واحدة

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Tark-Dame, M., et al. توليد نباتات معدلة وراثيا مع إدخالات أحادية النسخة باستخدام المتجه الثنائي BIBAC-GW. J. Vis. Exp. (2018).

في هذا الفيديو ، نوضح جيلا من نباتات نبات نبات الأرابيدوبسيس المعدلة وراثيا تعبر عن الجينات المعدلة وراثيا مستقرة من خلال التحول الجيني الثنائي القائم على الكروموسوم الاصطناعي بوساطة Agrobacterium.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_title" > 1. نبات الأرابيدوبسيس التحول

  1. تحضير نباتات نبات نبات الأرابيدوبسيس للتحول.
    1. قم بزراعة نباتات نبات الأرابيدوبسيس في دفيئة أو غرفة نمو يتم التحكم فيها بالمناخ حتى تزهر (12 أصيصا مع 9 نباتات لكل غمس).
    2. قم بقص البراغي الأولى للسماح بظهور المزيد من البراغي الثانوية. تكون النباتات جاهزة للغطس بعد 4-6 أيام من القص ، عندما تحتوي النباتات على العديد من رؤوس الزهور غير الناضجة وليس لديها الكثير من السيليكات المخصبة.
  2. غمس الأزهار
    1. اغمس النورات لمدة 5-10 ثوان في معلق Agrobacterium الذي يحمل T-DNA المستنسخ باستخدام كروموسوم اصطناعي بكتيري ثنائي أو BIBAC. استخ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
الشكل 1: صينية مملوءة بشتلات نبات الأرابيدوبسيس قبل وبعد معالجة Glufosinate-ammonium. تموت الشتلات التي لا تعبر عن جين الشريط الموجود في pBIBAC-BAR-GW T-DNA بعد رشها بمحلول Glufosinate-ammonium. تظهر الصور نفس صينية الشتلات (أ) قبل الرش بغلوفوسينات الأمونيوم ، بعد 14 يوما من البذر ، و (ب) بعد 10 أيام ، بعد رشها مرتين.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Materials

List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments كبريتات كاناميسين أحادي الهيدرات دوشيفا ك 0126 مزيج إنزيم كلوناز Gateway LR Thermo Scientific - Invitrogen 11791-019 Murashige Skoog وسط دوشيفا M0221 اجار دينار بحريني هاتف: 214010 جلوفوسينات الأمونيوم (باستا) باير 79391781 تصوير الفوسفور جنرال إلكتريك للرعاية الصحية لعلوم الحياة إعصار FLA 7000 فيلم التشبث (التفاف ساران) أومنيلا 1090681 أغاروز Thermo Scientific - Invitrogen 16500

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Binary Bacterial Artificial ChromosomeAgrobacterium mediated TransformationArabidopsis PlantsSingle copy InsertionFloral Dipping TechniqueFluorescence MicroscopyHerbicide Resistance ScreeningGenomic DNA ExtractionPCR AnalysisSeed specific Promoter

Related Articles