مقالة منهجية

تلطيخ الكونغو الأحمر: تقنية لتصور رواسب السليلوز في أقسام جذع النبات

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Pradhan Mitra ، P. ، Loqué ، D. تلطيخ الكيمياء النسيجية لعناصر جدار الخلية الثانوية نبات الأرابيدوبسيس thaliana. J. Vis. Exp. (2014).

في هذا الفيديو ، نوضح طريقة تلطيخ الكونغو الأحمر لتصور رواسب السليلوز في أقسام ساق نبات الأرابيدوبسيس ثاليانا.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< ص الفئة = "jove_title" >1. تلطيخ الكونغو الأحمر

  1. قم بإذابة 0.5 جم من الكونغو الأحمر في 100 مل من الماء المقطر لتحضير محلول أحمر كونجو بنسبة 0.5٪.
  2. انقل أقسام الساق إلى أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 2.0 مل. أضف 1 مل من محلول الكونغو الأحمر 0.5٪ إلى الأنبوب. مرر الماصة برفق محلول الكونغو الأحمر بنسبة 0.5٪ لأعلى ولأسفل دون إزعاج الأقسام.
    ملاحظة: احرص على عدم إدخال الأقسام في طرف الماصة لأن ذلك قد يؤدي إلى تلف الأقسام.
  3. احتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق وكرر سحب العينات. يتبع ذلك ب 3 دقائق أخرى من الحضانة في درجة حرارة الغرفة.
  4. استخدم ماصة سعة 1 مل لسحب 700 ميكرولتر من محلول أحمر الكونغو 0.5٪. أضف 700 ميكرولتر من الماء المقطر لشطف محلول الكونغو الأحمر. كرر الغسيل 3-4 مرات حتى يصبح محلول الغسيل صافيا.
  5. استخدم ماصة سعة 1 مل مع قطع طرفها بحيث يمكن سحب الأقسام بسهولة دون تلف. ضع أقسام الماصة برفق في الطرف وعلى شريحة مجهرية وقم بتغطيتها بغطاء غطاء. راقب العينات الموجودة على المنزلق بالمجهر تحت إثارة الضوء الأزرق باستخدام مرشح بتمرير نطاق 560 / 40.
    ملاحظة: لا تقم بتخزين الأقسام في الماء لفترة طويلة قبل التحليل المجهري ، لأن الماء سوف يغسل الكونغو الأحمر في غضون 10-30 دقيقة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات الكونغو الأحمر سيغما ج 6277 ثنائي الصوديوم 3،3'- [[1،1'-ثنائي الفينيل] -4،4'-ديلبيس (azo)]مكرر (4-أمينونافثالين 1-سلفونات) [رقم سجل المستخلصات الكيميائية 573-58-0] أنابيب الطرد المركزي الدقيقة (0.6 مل) أكسيجن العلمية MCT-060-C كاميرا مع شريحة CCD بدون مصراع ميكانيكي هاماماتسو ج4742-95 كاميرا ملونة عالية السرعة تشي ماجينغ MicroPublisher 5.0 RTV برنامج الكاميرا الأجهزة الجزيئية إصدار MetaMorph 7.7.0.0 تخيل التحليل طُوب فوتوشوب CS4 نظارات مايكرو كشور ، مربع ، رقم 1 VWR هاتف: 48366-067 22 × 22 مم (7/8 × 7/8 بوصة) - زجاج الغطاء مقاوم للتآكل وسميك ومسطح بشكل موحد. السماكة رقم 1 من 0.13 إلى 0.17 مم. شرائح صغيرة بلوستد ، 1 مم VWR 48312-003 75 × 25 مم - 1 مم TX2 مكعب مرشح لايكا 11513851 / 11513885 المرشح المستخدم لتحليل الكونغو الأحمر مع تمرير نطاق 560/40.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Arabidopsis thaliana

مقالات ذات صلة