مقالة منهجية

مقايسة ثنائية الطبقة الدهنية المدعومة من المستوى: تقنية في المختبر تعتمد على الفحص المجهري للتحقيق في تجميع الستين على تقليد الأغشية البيولوجية

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Curtis ، B. N. et al. إعادة تشكيل تجميع septin في الأغشية لدراسة الخصائص والوظائف الفيزيائية الحيوية. J. Vis. Exp. (2022)

في هذا الفيديو ، نوضح إجراء للتحقيق في تنظيم septin على طبقة ثنائية دهنية مدعومة بالزجاج في المختبر باستخدام الفحص المجهري الفلوري للانعكاس الداخلي الكلي.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_title" >1. طبقات ثنائية الدهون المستوية

  1. تنظيف البلازما للشرائح
    ملاحظه: يزيل تنظيف البلازما الملوثات العضوية ويزيد من ماء الزجاج ، مما يضمن امتصاص الدهون بكفاءة. قد تتغير الخطوات التالية أو تحتاج إلى تحسينها اعتمادا على منظف البلازما والأغطية الزجاجية المستخدمة.
    1. قم بتطهير منظف البلازما لمدة 5 دقائق بالأكسجين لإزالة الهواء من الخطوط والغرفة. هذا للتأكد من أنه عند تشغيل منظف البلازما ، يكون هناك أكسجين في المقام الأول في الخطوط والغرفة ، مما يوفر استعدادات ثنائية الطبقة أكثر اتساقا.
    2. أثناء التطهير ، قم ببث غاز خامل ، مثل N2 أو Ar ، فوق الشرائح الزجاجية ذات الغطاء الصغير لإزالة الغبار والج....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-1
الشكل 1: تخطيطي لغرفة التفاعل التي تم إعدادها. لتحضير غرف مخصصة ، يتم قطع أنبوب PCR سعة 0.2 مل حيث يبدأ الأنبوب في الاستدقاق وعند الغطاء (خطوط متقطعة حمراء). ثم يتم طلاء الحافة غير المقطوعة للأنبوب المقطوع بطبقة رقيقة من الغراء المنشط بالأشعة فوق البنفسجية (الأزرق) وتوضع على غطاء غطاء.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 0.2 مل أنابيب PCR مع غطاء مسطح ، طبيعي واتسون 137-211 ج (EX) هيبس سيجما ألدريتش H3375-1 كجم كلوريد المغنيسيوم VWR 7791-18-6 ميثيل السليلوز 4000cp سيجما ألدريتش M052-100G أغطية زجاجية دقيقة للطبقات الثنائية المستوية ماتسونامي توقف 22 × 22 لاصق بصري نورلاند ثورلاب نوا 68 لاصق مرن للزجاج أو البلاستيك منظف البلازما حفر البلازما PE-25 الجهد: 120 فولت ، 60 هرتز. التيار: 15 أمبير كلوريد البوتاسيوم VWR 0395-1 كجم مصباح الأشعة فوق البنفسجية الطيف الطيفي ENF-260C 115 فولت ، 60 هرتز ، 0.20 أمبير ألبومين مصل الأبقار (BSA) سيجما ألدريتش أ 4612-25 جي بيتا ميركابتو إيثانول (BME) سيجما ألدريتش M6250-100 مل دوبكسل أفانتي بولر ليبيدس 850375 بيض ليس رودامين PE أفانتي بولر ليبيدس 810146

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة