الفحص المجهري الفلوري داخل الحيوية لدراسة تكوين الجلطات الوعائية الدقيقة

الملخص

المصدر: Strüder ، D. ، et al. الفحص المجهري داخل الحيوية وتحريض الجلطة في شحمة أذن فأر أصلع. J. Vis. Exp. (2017)

يوضح هذا الفيديو تقنية الفحص المجهري الفلوري داخل الحيوية لدراسة تكوين الجلطة في نموذج الفأر. يتم حقن الفأر بعديد السكاريد المسمى بالفلوروفور لمراقبة الدورة الدموية. عند الإضاءة بضوء عالي الكثافة ، يؤدي الحث السام الضوئي لإصابة في الأوعية الدموية الدقيقة للأذن إلى تكوين جلطة الدم ، والتي يتم تأكيدها من خلال تصور الانسداد في تدفق الدم.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. الترتيب المسبق للحيوانات

1. قم بوزن الفأر وقم بتحميل الدواء المعني (على سبيل المثال ، القنب ، 5 مجم / كجم من وزن الجسم (BW)) في حقنة الأنسولين. تطبيق الدواء قبل 30 دقيقة من تحريض الجلطة.
2. عن طريق إمساك عنق الفأر بين الإبهام والسبابة وذيل الفأر بالإصبع الصغير ، قم بتمديد وحقن الدواء داخل الصفاق (ip) في الربع الأيسر السفلي من البطن. أعد إلى القفص لمدة 15 دقيقة.
3. تحضير التخدير بالكيتامين (90 ملغم/كغ وزن الجسم) والزيلازين (25 ملغم/كغ وزن الجسم). قبل 15 دقيقة من تحر....

النتائج

p class = "jove_content" >
الشكل 1. تحضير الوريد الوداجي (أ) ووضع الأذن للفحص المجهري داخل الحيوية (ب). (أ) باستخدام المجهر المجسم للعملية ، يتم تحضير الوريد الوداجي الأيمن. يتم خياطة الغرز الخاصة بوضع الأذن اليسرى قبل حقن FITC-dextran. يتم إغلاق الجرح الناتج عن التشريح السابق للوريد الوداجي الأيسر بخيوط عبر الجلد (B). يتم تثبيت الأذن اليسرى بخيوط البولي بروبيلين 7/0. يتم وضع غطاء بعناية دون ضغط الأوعية القاعدية للأذن. تحافظ لوحة التس.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات SKH-1 / ساعة الفئران نهر تشارلز 477 ح. يمكن شراؤها من بائعين آخرين عملية المجهر المجسم لايكا M651 / M655 يمكن شراؤها من بائعين آخرين المجهر داخل الحيوية زييس أكسيوتيك فاريو 100 يمكن شراؤها من بائعين آخرين الهدف (20x/0.95) زييس 20x / 0,50 واط ؛ Plan-NEOFLUAR يمكن شراؤها من بائعين آخرين الهدف (63x/0.95) زييس 63x / 0,95 W ؛ أكروبلان يمكن شراؤها من بائعين آخرين كاميرا CCD بالأبيض والأسود بيبر FK 6990 IQ-S يمكن شراؤها من بائعين آخرين مسجل DVD باناسونيك DMR-EX99V يمكن شراؤها من بائعين آخرين كلوريد الصوديوم براون 5/12612055/1011 م يمكن شراؤها من بائعين آخرين الكيتامين 10٪ بيلا فارم F3901-6 يمكن شراؤها من بائعين آخرين زيلازين 2٪ باير 6293841.00.00 يمكن شراؤها من بائعين آخرين FITC-dextaren 5٪ سيغما 46945-100 ملغ إف يمكن شراؤها من بائعين آخرين ديكسابانثينول 5٪ مرهم للعين باير 6029009.00.00 يمكن شراؤها من بائعين آخرين DMSO سيغما 472301 يمكن شراؤها من بائعين آخرين أغطية 5 × 5 × 1 مم مينزل L4339 يمكن شراؤها من بائعين آخرين اللصقات ليوكوسيلك هاتف: 4683400 يمكن شراؤها من بائعين آخرين مسحات القطن سانيو 604-أ-1 يمكن شراؤها من بائعين آخرين ضوء الأشعة تحت الحمراء بيورير 5/13855 م يمكن شراؤها من بائعين آخرين حقنة للاستخدام الواحد براون 2020-08 يمكن شراؤها من بائعين آخرين حقنة الأنسولين براون 9161502 يمكن شراؤها من بائعين آخرين الإبر تحت الجلد التي يمكن التخلص منها براون 465 7640 يمكن شراؤها من بائعين آخرين الشعيرات الدموية من طرف إلى طرف سارستيدت 19,447 يمكن شراؤها من بائعين آخرين لوحة التسخين كلاوس إيفنبرغ المرجع الاختياري 185/03 يمكن شراؤها من بائعين آخرين مقص 14.5 سم أسكولاب BC259R يمكن شراؤها من بائعين آخرين حامل إبرة أسكولاب BM081R يمكن شراؤها من بائعين آخرين الملقط الدقيق أسكولاب 331 د.ب يمكن شراؤها من بائعين آخرين مقص دقيق أسكولاب OC496R يمكن شراؤها من بائعين آخرين مشرط 21 دالهاوزن 11.000.00.511 يمكن شراؤها من بائعين آخرين البرولين 7-0 إيثيكون XNEH7470 يمكن شراؤها من بائعين آخرين الكي الكهربائي سيرفوبراكس H40140 يمكن شراؤها من بائعين آخرين وسادة أكريلجلاس تدفئة متكاملة، مستوى بارتفاع 0.5 سم