عزل الخلايا الوحيدة عن الدم الكامل عن طريق الانتقاء السلبي المناعي المغناطيسي

الملخص

< p class = "jove_content" >المصدر: Plaisance-Bonstaff، K.، et al. العزلة ، التعدي ، وثقافة الخلايا الوحيدة البشرية الأولية. J. Vis. Exp. (2019)

في هذا الفيديو ، نوضح عزل الخلايا الوحيدة عن دم الإنسان الكامل عن طريق الفصل السلبي المناعي المغناطيسي. يمكن استخدام الخلايا الوحيدة المعزولة لمزيد من التحليل النهائي.

البروتوكول

تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تشمل مشاركين بشريين وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية والوطنية والدولية لرفاهية الإنسان وتمت مراجعتها من قبل مجلس المراجعة المؤسسية المحلي.

فئة

1. عزل الخلايا الوحيدة البشرية الأولية عن طريق الانتقاء السلبي المناعي المغناطيسي

1. اجمع 40 مل من الدم البشري الكامل الطازج (إما من مريض فيروس نقص المناعة البشرية ⁺ أو من مجموعة تحكم سليمة) في أربعة أنابيب مفرغة من حمض الإيثيلين ديامين تترا أسيتيك (EDTA) سعة 10 مل (10 مل من الدم لكل أنبوب). باستخدام تقنيات معقمة تحت خزانة السلامة الحيوية ، انقل كل 40 مل من الدم إلى أنبوب بروبيلين مخروطي سعة 50 مل.
2. باتباع بروتوكول الشركة المصنعة ....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 0.5 مليون EDTA إنفيتروجين AM9260G أنابيب جمع الدم البلاستيكية BD Vacutainer مع K₂EDTA BD Biosciences 366643 مغناطيس سهل 50 EasySep تقنيات الخلايا الجذعية 18002 طقم عزل الخلية الأحادية البشرية سهلة Sep مباشرة تقنيات الخلايا الجذعية 19669 برنامج تلفزيوني جيبكو 20012027 RPMI 1640 مع L-Glutamine كورنينج 10040سي في إم بي