عزل واستزراع الخلايا اللحمية لنخاع العظام من الساق الفأر

الملخص

المصدر: Maridas, D.E., et al. عزل وثقافة وتمايز الخلايا اللحمية لنخاع العظام وأسلاف ناقضات العظم من الفئران. J. Vis. Exp. (2018)

في هذا الفيديو ، نوضح عزل واستزراع الخلايا اللحمية لنخاع العظم من العظام الطويلة للفئران. يمكن استخدام BMSCs الملتصقة المعزولة لمزيد من التحليل.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< ص الفئة = "jove_title" >1. حصاد العظام من الفئران

1. قتل باستخدام ثاني أكسيد الكربون₂ متبوعا بخلع عنق الرحم ورشها بنسبة 70٪ من الإيثانول.
   ملاحظه: تأكد من استخدام من نفس الجنس ويفضل أن تكون من نفس العمر. نستخدم بشكل روتيني التي تتراوح أعمارها بين 7 و 8 أسابيع. نوصي بتجميع الخلايا من 3 على الأقل لكل مجموعة تجريبية للحصول على مجموعة خلايا تمثيلية وقابلة للتكاثر بشكل أفضل.
2. ضع الفأر القتل الرحيم على ظهره على لوح تشريح. استخدم الملقط لإنشاء خيمة من الجلد على البطن. قم بعمل ش....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات أطراف ماصة 200 ميكرولتر رينين 17014401 الأواني البلاستيكية أنابيب الطرد المركزي 1.5 مل الولايات المتحدة الأمريكية العلمية 1615-5500 الأواني البلاستيكية أنبوب مخروطي 15 مل VWR 89039-668 الأواني البلاستيكية 50 مل أنبوب مخروطي VWR 89039-660 الأواني البلاستيكية محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) سيجما ألدريتش 21-040 سم الكاشف ايثانول فيشر ساينس 04-355-451 الكاشف أدوات التشريح مرشحات 70 ميكرومتر بي دي فالكون هاتف: 352350 0.25٪ تربسين جيبكو 25200 الكاشف كيمويب VWR 82003-820