طريقة تشريح لحصاد الغدد الليمفاوية المأبضية للفئران للتصوير خارج الجسم الحي

الملخص

المصدر: Rezende, R.M., et al. تصور بنية العقدة الليمفاوية وتوطين الخلايا باستخدام الفحص المجهري متحد البؤر Ex-Vivo. J. Vis. Exp. (2019)

يوضح هذا الفيديو تقنية تشريح لحصاد الغدد الليمفاوية المأبضية من الأرجل الخلفية للفأر. تلعب الغدد الليمفاوية دورا مهما في سد الفجوة بين المناعة الفطرية والتكيفية، ويمكن أن يساعد حصاد الغدد الليمفاوية السليمة — مع بنية الأنسجة المحفوظة والقدرة الخلوية على البقاء — في دراسة الاستجابات المناعية المحلية والجهازية.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. إجراء جراحي لإزالة العقدة الليمفاوية المأبضية

1. القتل الرحيم للفئران باستخدام اختناق ثاني أكسيد الكربون₂ متبوعا بخلع عنق الرحم.
قم
2. بتثبيت الفئران في وضع الانبطاح على مرحلة الأكريليك بشريط لاصق وقم بتطبيق الزيت المعدني بقطعة قطن في ربلة الساق والركبة (الشكل 1A-D).
3. قم بإجراء شق خط الوسط في ربلة الساق من الكعب إلى الركبة (الشكل 1E ، F).
4. فصل عضلات العجل عن الجلد (الشكل 1F ، G).
5. كشف الحفرة المأبضية (الشكل 1G). ستظهر العقدة الليمفاوية المأبضية ككرة شفافة في الحفرة المأبضية.
6. قم بإزالة العقدة الليمفاوية المأبضية باستخدام ملقط منحني بالجراحة المجهرية (الشكل 1G).
7. بدلا من ذلك ، اقلب الماوس في وضع الاستلقاء ، واقترب من الحفرة المأبضية بين العضلة ذات الرأسين الفخذية وشبه الوترية لإزالة LN المأبضي عن طريق إجراء شق خط الوسط في ربلة الساق من الكعب إلى الركبة متبوعا بتفكك عضلات الساق عن الجلد.
   ملاحظه: الحفرة المأبضية هي اكتئاب ضحل يقع في الجزء الخلفي من مفصل الركبة. افتح بعناية لرؤية العقدة الليمفاوية المأبضية.

النتائج

الشكل 1: تحضير العقدة الليمفاوية المأبضية. (أ ، ب) الحقن تحت الجلد من مزيج الأجسام المضادة FACS الرئيسي في وسادة المخلب. (C ، D) بعد 3 ساعات من الحقن ، قم بالقتل الرحيم للماوس ، وشل حركة الماوس على صفيحة أكريليك بشريط لاصق (C) ، وقم بتطبيق الزيت المعدني على جلد البطن لمنع ترسب الفراء حول الشق (D). (ه) قم بإجراء شق خط الوسط في ربلة الساق من الكعب إلى ...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات طبق ثقافة Cellview غرينر بيو 627861 35 × 10 مم مع قاع زجاجي كيمويبس ماركة Kimtech Science 7557 الحجم 21 × 20 سم / 100 ورقة لكل صندوق ملقط منحني للجراحة المجهرية الأدوات الجراحية WEP حسب الطلب 12.5 سم مقص منحني للجراحة المجهرية الأدوات الجراحية WEP حسب الطلب 11.5 سم