تفريق الخلايا السلفية العصبية المستحثة إلى خلايا نجمية

الملخص

المصدر: Meyer، S.، et al.، Edenhofer، F. اشتقاق الخلايا الليفية البشرية البالغة وتحويلها المباشر إلى خلايا سلفية عصبية قابلة للتوسيع. J. Vis. Exp. (2015)

يوضح هذا الفيديو عملية التفريق بين الخلايا السلفية العصبية المستحثة (iNPCs) إلى خلايا عصبية وخلايا نجمية باستخدام وسائط متخصصة.

البروتوكول

< p class = "jove_title" >1. تمايز iNPCs

1. التمايز نحو النسب العصبية
   1. خلايا الثقافة على ألواح مغلفة باللون الموحد كما هو موضح أعلاه. قم بتغيير الوسائط إلى وسائط الانتشار العصبي (DMEM / F-12 ، 1x N2 ، 1x B27 ، 300 نانوغرام / مل cAMP ، 200 ميكرومتر فيتامين C ، 10 نانوغرام / مل BDNF ، 10 نانوغرام / مل GDNF) عندما تكون الخلايا ملتقية بنسبة 70٪ تقريبا. قم بتغيير الوسائط كل يومين لمدة ثلاثة أسابيع. لا تقم بتقسيم الخلايا أثناء التمايز.
   2. بعد ثلاثة أسابيع ، يجب أن تعبر الخلايا عن العلامة العصبية TUJ1. لاكتساب المزيد من الخلايا العصبية والأنواع الفرعية العصبية الناضجة ، استمر في التمايز لمدة تصل إلى 3 أشهر.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات وسائط الخلايا النجمية الخلية العلمية 1801 ب 27 لايف تكنولوجيز 17504-044 BDNF بيبروتك 450-02 معسكر سيغما أ6885 DMEM لايف تكنولوجيز 41966-029 DMEM F12 لايف تكنولوجيز هاتف: 11320-033 DMSO روث 4720 DPBS لايف تكنولوجيز 14190-094 EGF تقنيات الحياة PHG0313 FCS بيوكروم إيه جي 50115 GDNF بيبروتك 450-10 إنسولين سيرالاب جيم 700-112-ف ل-جلوتامين لايف تكنولوجيز 25030-024 لامينين سيغما L2020 N2 لايف تكنولوجيز 17502-048 العصبي العصبي لايف تكنولوجيز هاتف: 21103-049 الأحماض الأمينية غير الأساسية لايف تكنولوجيز 11140-050 فيتامين سي سيغما أ 4544 β ميركابتو إيثانول لايف تكنولوجيز 21985023