تقنيات زراعة الخلايا العصبية

يوضح الفيديو طريقة لزراعة الخلايا العصبية من الحصين الفئراني. في البداية ، يخضع الحصين للهضم الأنزيمي لتحطيم مصفوفة الأنسجة خارج الخلية. بعد ذلك ، يتم تعطيل الأنسجة المهضومة ميكانيكيا لعزل الخلايا العصبية الفردية. أخيرا ، يتم زراعة هذه الخلايا العصبية على الخلايا المغذية الدبقية.

يوضح هذا الفيديو طريقة زراعة الخلايا العصبية الجنينية المحفوظة بالتبريد ، والتي تتضمن الذوبان المتحكم فيه ، والتخفيف بوسط عصبي قاعدي ، والبذر على صفيحة مطلية ب poly-L-lysine. تدعم الحضانة اللاحقة نمو وصيانة الروابط العصبية.

< ص فئة = "jove_content">يوضح الفيديو تقنية لزراعة الخلايا العصبية الفلورية GABAergic والجلوتاماتيرجيك من القشرة وأنسجة الحصين لصغار الفئران المعدلة وراثيا. تتضمن العملية الحصول على معلقات خلية واحدة منقاة من الخلايا العصبية ، وفرز الخلايا العصبية GABAergic بناء على تعبير البروتين الفلوري ، وبذرها على ألواح مطلية ب poly-L-lysine لتسهيل التعلق وتكاثر الخلايا.

يوضح الفيديو تقنية لزراعة الخلايا النجمية الأولية من قشرة الفئران. يتم فصل القشرة ميكانيكيا للحصول على تعليق متجانس للخلايا الدبقية ، والذي يتم طلاؤه بعد ذلك على ألواح مطلية بالبولي ببتيد لتعزيز التكاثر الانتقائي للخلايا النجمية. بعد ذلك ، يتم فصل الخلايا النجمية إنزيميا عن الصفائح ونقلها إلى وسائط جديدة ، مما يسمح بثقافة الخلايا النجمية النقية.

يوضح الفيديو تقنية لعزل الخلايا الدبقية الصغيرة عن قشرة دماغ الفأر البالغ. أولا ، تخضع القشرة للتجزئة والتجانس لإزالة الخلايا العصبية والخلايا الدبقية الأخرى ، والحفاظ على الخلايا الدبقية الصغيرة. بعد ذلك ، يتعرض معلق الخلية للميكروبيدات المغناطيسية المضادة للمايلين ومجال مغناطيسي ، مما يفصل بشكل فعال الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا النخاعية عن بقايا المايلين والخلايا التي تحتوي على المايلين.

يوضح الفيديو طريقة بسيطة لزراعة الخلايا النجمية للفئران بمعزل عن خلايا الدماغ الأخرى. أثناء الاستزراع ، باستخدام وسائط خاصة بالخلايا النجمية وتثبيط التصاق الخلايا غير النجمية ، تقوم الطريقة بزراعة الخلايا النجمية بشكل انتقائي. تظهر هذه الخلايا النجمية المستزرعة مورفولوجيا نجمية مع عمليات دقيقة.

يوضح الفيديو طريقة لتوليد الخلايا العصبية القشرية المثيرة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان (hiPSCs). عند تحريض الدوكسيسيكلين ، تفرط hiPSCs في التعبير عن neurogenin-2 ، وهو عامل نسخ خاص بالخلايا العصبية. باستخدام وسائط معينة والزراعة المشتركة مع الخلايا النجمية ، تسهل هذه العملية تمايز hiPSCs إلى خلايا عصبية ذات وصلات متشابكة.

يوضح هذا الفيديو تقنية لتوليد ثقافة أولية للخلايا العصبية والخلايا الدبقية من المثانة البولية للفئران. يحدد الخطوات المتبعة في تحضير الأنسجة ، والهضم الأنزيمي للحصول على خلايا مفردة ، وزراعة الخلايا في وسط خاص بالخلايا العصبية لإنشاء ثقافة عصبية ودبقية أولية.

يوضح هذا الفيديو استخدام شريحة بلاستيكية مجمعة مسبقا للثقافة المجزأة للخلايا العصبية الأولية للفئران. يتم طلاء الخلايا العصبية في إحدى مقصورات الموائع الدقيقة ، حيث تلتصق وتنمو ، وتمتد محاورها من خلال الأخاديد الدقيقة للرقاقة إلى المقصورة المجاورة. تمنع الأخاديد الدقيقة الضيقة أجسام الخلايا العصبية من الدخول ، مما يتيح الفصل المادي بين المقصورات الجسدية والمحورية.

يوضح هذا الفيديو تقنية عزل واستزراع الخلايا العصبية الحبيبية المخيخية الأولية للفأر. تعالج الخلايا بمضادات الأيض للقضاء على الخلايا الدبقية المتكاثرة وإنتاج ثقافة نقية من الخلايا العصبية الحبيبية المخيخية.

يوضح هذا الفيديو عملية عزل العقدة الحلزونية من الأذن الداخلية وزراعتها المشتركة مع عضو Corti على مجموعة متعددة الأقطاب الكهربائية. يتم استخراج العقد الحلزونية بعناية وتقسيمها إلى أقسام أنسجة أصغر أو مستعصات. يتم استزراع هذه المخططات في المنطقة النشطة لمصفوفة الأقطاب الكهربائية المتعددة لتعزيز نمو العملية العصبية.

يوضح الفيديو طريقة لزراعة الخلايا العقدية الأولية للشبكية من أجنة الزرد. تخضع الأجنة في المرحلة المبكرة للتشريح لعزل العينين ، والتي يتم فصلها ميكانيكيا لاحقا في تعليق الخلايا العقدية الشبكية. يتم زراعة معلق الخلية هذا على أغطية مطلية ببروتينات لاصقة لتسهيل تطوير المحور العصبي.

يوضح هذا الفيديو تقنية لتوليد الخلايا العصبية من الخلايا الجذعية متعددة القدرات المشتقة من الدم (BD-PSCs). يتم الحصول على BD-PSCs عن طريق إعادة برمجة الخلايا السلفية للدم. يتم استزراع BD-PSCs غير المتمايزة على أغطية مغلفة بالركيزة لزراعة الخلايا باستخدام وسيط تحريض عصبي ووسط تمايز عصبي ، مما يؤدي إلى التمايز إلى خلايا ذات نمط ظاهري عصبي.

يوضح هذا الفيديو طريقة لعزل الخلايا الدبقية الصغيرة واستزراعها من أدمغة الفئران. يستلزم فصل الخلايا الدبقية الصغيرة عن الخلايا العصبية وغير العصبية الأخرى باستخدام ألواح مغلفة بجسم مضاد أحادي النسيلة خاص بالخلايا الدبقية الصغيرة.

يوضح الفيديو عملية عزل الخلايا الجذعية العصبية وزراعتها من المنطقة تحت الثففية لدماغ الفأر. يتضمن تشريح الأنسجة والتفكك الأنزيمي وزراعتها بعوامل التمايز لتتطور إلى خلايا عصبية ناضجة.

يوضح الفيديو تمايز الخلايا الجذعية الجنينية للفأر (mESCs) إلى الأجسام الجنينية (EBs) بطريقة القطرة المعلقة. عند تعليق mESCs في قطرات معلقة واحتضانها ، تتجمع الخلايا لتشكيل EBs ، والتي يتم تمييزها بشكل أكبر إلى خلايا سلفية عصبية (NPCs) باستخدام وسيط تمايز مكمل بحمض الريتينويك (RA).

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا مفصلا لعزل جدران البطين الجانبية عن دماغ الفأر البالغ وإجراء تفكك الأنسجة الأنزيمية للحصول على خلايا مفردة. ثم تخضع هذه الخلايا لظروف استزراع محددة تعزز بشكل انتقائي تكاثر الخلايا الجذعية العصبية وتعزز تمايزها إلى ثقافات مشتركة من الخلايا الدبقية قليلة التغصن والخلايا النجمية.

يوضح هذا الفيديو تقنية لعزل الخلايا السلفية العصبية المستحثة (iNPCs) المشتقة من الخلايا الليفية البشرية البالغة. يحدد الخطوات المتبعة في عزل مستعمرات iNPC وزراعتها في آبار صفائح متعددة الآبار مطلية بطبقة لامينين في وجود وسائط استزراع مناسبة تسهل استمرار الانتشار والتوسع في عدد سكان iNPC.

يوضح هذا الفيديو طريقة زراعة الخلايا العصبية منخفضة الكثافة للغاية في وجود طبقة تغذية عصبية عالية الكثافة. يؤسس ثقافة مشتركة للخلايا العصبية ذات الكثافة المختلفة ، مما يضمن القرب الجسدي الوثيق. تساعد عوامل النمو التي تفرزها الخلايا العصبية عالية الكثافة على بقاء الخلايا العصبية ونموها ، مما يحافظ على الخلايا العصبية منخفضة الكثافة لفترة زمنية أطول.

يوضح هذا الفيديو تقنية لتحويل خلايا الورم الأرومي العصبي SH-SY5Y غير المتمايزة إلى خلايا عصبية ناضجة متمايزة تماما باستخدام تقنية مرور منهجية. يتضمن ذلك زراعة الخلايا في سلسلة من الوسائط مع انخفاض تدريجي في مستويات المصل لمنع تكاثر الخلايا الشبيهة بالظهارة مع تعزيز تمايز وتكاثر الخلايا الشبيهة بالخلايا العصبية. بالإضافة إلى ذلك ، يتم استكمال الوسائط بحمض الريتينويك وعوامل النمو المحددة التي تحفز التمايز النهائي للخلايا الشبيهة بالخلايا العصبية إلى خلايا عصبية ناضجة تظهر مورفولوجيا متفرعة واسعة...

يوضح هذا الفيديو عزل الخلايا عن العقد الحسية للفئران. تتعرض العقد للهضم الأنزيمي لإذابة المصفوفة خارج الخلية. ثم يتم جمع الخلايا المفردة عن طريق الترشيح من خلال مصفاة خلية متبوعة بالطرد المركزي المتدرج للكثافة لإزالة الحطام. أخيرا ، يتم إجراء الغسيل والطرد المركزي لجمع الخلايا المعزولة لتحليلها في المستقبل.

يوضح هذا الفيديو تفكك وثقافة الخلايا العصبية في الحصين من عينات أنسجة الحصين باستخدام التفكك الأنزيمي والميكانيكي. يمنع العلاج باستخدام Ara-C نمو الخلايا غير العصبية ، مما يسهل النمو الانتقائي للخلايا العصبية في الحصين.

يوضح هذا الفيديو طريقة لزراعة الخلايا العصبية الدوبامينية من أنسجة المخ الجنينية للفأر. تتضمن العملية علاج الدماغ المتوسط بإنزيم محلل للبروتين ، وفصل الخلايا ، وزراعتها على أغطية مغلفة بالبوليمر في وسط غني بالمغذيات بالمضادات الحيوية لنموها وقابليتها للحياة على المدى الطويل.

يوضح هذا الفيديو عزل وزراعة الخلايا السلفية العصبية المخيخية من مخيخ جرو الفأر. يتم عزل أسلاف الخلايا العصبية الحبيبية المخيخية وتنقيتها من خلال الالتصاق التفاضلي ، مما يؤدي إلى إزالة الخلايا النجمية بشكل فعال. تتمايز هذه الأسلاف المستنبتة لاحقا إلى خلايا عصبية حبيبية مخيخية.

يوضح هذا الفيديو طريقة لعزل الخلايا العصبية المصنفة بالفلورسنت من دماغ الفأر.

يوضح هذا الفيديو إنشاء نظام زراعة خلايا من ثلاث أقسام باستخدام الكولاجين والشحوم غير التفاعلية. يستخدم هذا النظام لمراقبة التفاعلات بين خلايا الورم الدبقي والمحاور في الوقت الفعلي.

يعرض هذا الفيديو طريقة لعزل الخلايا العصبية الدهليزية من الأذن الداخلية لجرو الفأر. يحدد بدقة الخطوات المتبعة في تشريح الأذن الداخلية ، وحصاد العقدة الدهليزية ، وبالتالي فصل العقدة إلى خلايا مفردة. ثم يتم زراعة هذه الخلايا على أطباق ذات قاع زجاجي لإنشاء ثقافة الخلايا العصبية الدهليزية.

يوضح هذا الفيديو تقنية لعزل واستزراع الخلايا السليفة قليلة التغصن (OPCs) من قشرة دماغ جرو الفأر.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتطوير العقد الجذرية الظهرية أو ثقافة النبتة DRG ونماذج الخلايا المنفصلة DRG باستخدام أنسجة DRG المعزولة للفأر. تساعد هذه النماذج في دراسة الآليات المختلفة مع التفاعلات الدبقية العصبية في بيئة خاضعة للرقابة.

يوضح الفيديو تحضير شرائح الدماغ القولونية المهادية القشرية من أدمغة جرو الفأر. يتم محاذاة الدماغ المعزول على شريحة ملحوظة ويتم قصها بزاوية لمحاذاة الدماغ المتوسط السمعي والدماغ الأمامي في نفس المستوى. ثم يتم تقطيع الدماغ باستخدام اهتزاز ، ويتم نقل الشرائح التي تحتوي على هياكل الدماغ المتوسط السمعي الرئيسية والدماغ الأمامي إلى غرفة احتجاز للحفظ.

< p class = "jove_content" >يوضح هذا الفيديو طريقة لحصاد الخلايا العصبية من العقد الجذرية الظهرية (DRG). يتم عزل DRG من العمود الفقري للفئران ، ومعالجته بالإنزيمات ، ثم فصله ميكانيكيا للحصول على تعليق أحادي الخلية. يتم فصل الخلايا العصبية عن الخلايا الدبقية باستخدام الطرد المركزي المتدرج للكثافة ويتم زراعتها في وسط النمو.

يقدم هذا الفيديو طريقة لعزل الخلايا الجذعية العصبية / الخلايا السلفية من الأنسجة المحيطة بالبطين للحبل الشوكي في الفئران البالغة. تتضمن هذه التقنية احتضان شظايا الأنسجة في محلول يحتوي على إنزيمات محللة للبروتين لتعطيل المصفوفة خارج الخلية وإطلاق الخلايا. بعد ذلك ، يتم طلاء الخلايا المنبعثة في وسط يحتوي على عوامل نمو محددة تعزز تكاثر الجذع العصبي / السلف وتعزز التجميع في مجالات عصبية ثلاثية الأبعاد.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا للحصول على تعليق خلية واحدة قابل للحياة للغاية من الحصين في دماغ الفأر باستخدام مزيج من التفكك الميكانيكي الآلي ومزيج من الإنزيمات للمساعدة في الهضم الأنزيمي.

يوضح الفيديو تحضير معلق أحادي الخلية للخلايا المناعية من أنسجة دماغ الفئران. يتضمن الهضم الأنزيمي لإطلاق الخلايا من أنسجة المخ ، يليه الطرد المركزي المتدرج للكثافة لعزل الخلايا المناعية بناء على كثافتها للحصول على تعليق الخلية الواحدة.

يوضح هذا الفيديو طريقة لعزل خلايا الخلايا قليلة التغصن الأولية من تعليق الخلايا العصبية التي تم الحصول عليها من جرو الفأر باستخدام الفصل المغناطيسي. تستخدم هذه التقنية حبيبات مغناطيسية مغلفة بأجسام مضادة خاصة بمستضدات الخلايا قليلة التغصن ، مما يتيح العزل الانتقائي لهذه الخلايا.

يوضح هذا الفيديو عزل واستزراع خلايا شوان من جذور العمود الفقري للفأر. ثم يتم زراعة الخلايا المعزولة في وسائط معينة. يتم عزل خلايا شوان عن طريق الهضم التفاضلي والالتصاق. يتم نقلها لاحقا إلى أغطية مغلفة بمصفوفة خارج الخلية للربط والانتشار.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا مفصلا لإعداد شرائح دماغ الحصين الأفقية من الفئران ، مع التركيز على الحفاظ على سلامة مسارات ألياف الحصين. تتضمن العملية تقسيم الدماغ وتأمينه بعناية ، واستخدام اهتزاز للتقطيع ، والحفاظ على ظروف الأنسجة المثلى بسائل كربوجين ، مما يؤدي إلى شرائح دماغ الحصين جاهزة لمزيد من التجارب.

يوضح الفيديو توليد شرائح اللوزة الدماغية المائلة من دماغ الفأر. يتم وضع الدماغ بزاوية على مرحلة عينة الاهتزاز للحصول على شرائح تحتوي على اللوزة والمحاور من قشرة الفص الجبهي الإنسي التي تشكل روابط متشابكة مع اللوزة. يتم الحفاظ على شرائح الدماغ في درجة الحرارة الفسيولوجية للحفاظ على الأنسجة لمزيد من التجارب.

يوضح هذا الفيديو تحضير شرائح رقيقة من الدماغ الإكليلي من دماغ الفئران ، مما يكشف عن مناطق اللوزة الغنية بالوصلات المشبكية من قشرة الفص الجبهي الإنسي. ثم يتم استرداد الشرائح في السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي المؤكسج للحفاظ على بقاء الخلايا العصبية.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا لاستخراج الخلايا الدبقية الصغيرة من الآفات المزيلة للميالين في أدمغة الفئران باستخدام فرز الخلايا المغناطيسية. يتضمن البروتوكول تشريح أنسجة المخ المصابة التي تحتوي على خلايا دبقية صغيرة ، ومعالجة الأنسجة بإنزيمات محددة للحصول على تعليق أحادي الخلية ، واستخدام الخرز المغناطيسي الخاص بمستقبلات الخلايا الدبقية الصغيرة لعزل الخلايا الدبقية الصغيرة.

يوضح هذا الفيديو عزل أنواع متعددة من الخلايا عن أنسجة دماغ الفئران. يتم قص الأنسجة ميكانيكيا أولا باستخدام مطحنة الأنسجة في محلول ملحي للحفاظ على التوازن التناضحي. ثم يخضع تجانس الأنسجة لطرد مركزي متدرج الكثافة لإزالة الحطام الخلوي. ثم يتم تعليق الخلايا في محلول لمزيد من التحليل.

يوضح هذا الفيديو إجراء عزل الخلايا المناعية عن ضفائر المشيمية للفأر. يستخدم هذا الإجراء في أبحاث المناعة العصبية لفهم كيفية تأثير الخلايا المناعية في الضفائر المشيمية على صحة الدماغ والأمراض العصبية المختلفة.

أظهر الفيديو طريقة عزل الخلايا وزراعتها من دماغ الفأر حديثي الولادة. تضمنت التفكك الأنزيمي والميكانيكي للدماغ ، يليه الزراعة في وسط النمو الذي يفتقر إلى عامل النمو العصبي للحصول على مجموعة دبقية مختلطة.

يوضح هذا الفيديو إجراء عزل وفرز النوى من أنسجة الدماغ البشري المجمدة حديثا باستخدام فرز النوى المنشطة بالفلورة (FANS) ، والذي يتيح دراسة مجموعات الخلايا المختلفة لمختلف التطبيقات العصبية.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا لعزل الخلايا من الحصين الفئران ، بما في ذلك الخلايا العصبية والخلايا النجمية والخلايا الدبقية الصغيرة.

يوضح هذا الفيديو عزل الخلايا العصبية المصنفة بالفلورسنت عن Caenorhabditis elegans. يتم الحصول على تعليق الخلية من الديدان المعدلة وراثيا المصممة للتعبير عن ناقلات الغشاء الحويصلية المنصهرة بالبروتين الفلوري في الخلايا العصبية الكولبينية. ثم يتم عزل الخلايا العصبية المصنفة بالفلورسنت باستخدام فرز الخلايا المنشطة بالفلورة (FACS) والحفاظ عليها في الثقافة.

يوضح الفيديو تحضير شرائح المخيخ. يوضح إجراء مفصلا لعزل المخيخ عن جنين الكتكوت. ثم يتم تحضير الشرائح من المخيخ المفصل باستخدام مفرمة الأنسجة لمزيد من التحليل التجريبي.

يوضح هذا الفيديو إجراء عزل خلايا العقدة الشبكية الأولية للفئران (RGCs) باستخدام قياس التدفق الخلوي. تسمح هذه الطريقة بالدراسة المستقبلية ل RGCs ، بهدف فهم أفضل للانخفاض الرئيسي في حدة البصر الناتج عن فقدان RGCs الوظيفية في الأمراض التنكسية العصبية.

يوضح هذا الفيديو عزل عضو الفأر الصوتي (VNO) وإعداد الأنسجة لتقسيم الاهتزاز. تستخدم الأقسام لتوصيف السمات الفيزيائية الحيوية والفسيولوجية لمجموعة معينة من الخلايا العصبية الحسية.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا لعزل واستزراع خلايا القشرة الدماغية الأولية من الدماغ الظهري الجانبي لأجنة الفئران.

يوضح هذا الفيديو تقنية لعزل واستزراع خلايا العقد الجذرية الظهرية (DRG) من العمود الفقري للفئران. يتم التعامل مع DRGs المستخرجة من العمود الفقري بالإنزيمات وفصلها ميكانيكيا للحصول على تعليق أحادي الخلية. يتم زراعة الخلايا في وسط يحتوي على مثبطات وعوامل نمو تحد من تكاثر الخلايا الدبقية وتعزز نمو الخلايا العصبية ، على التوالي.

يوضح الفيديو عملية عزل وزراعة الخلايا العصبية الدوبامين من الدماغ المتوسط لأجنة الفئران. يتم فصل أرضيات الدماغ المتوسط البطني المعزولة باستخدام الإنزيمات. يتم حصاد الخلايا العصبية الدوبامين الناتجة ونقلها إلى جزر صغيرة داخل لوحات متعددة الآبار. يتم تحضين الخلايا بوسط خلية عصبية الدوبامين للحفاظ على الخلايا بكثافة عالية داخل الجزر الصغيرة.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتمييز الخلايا السلفية العصبية البشرية (NPCs) إلى خلايا عصبية. يتم إدخال الشخصيات غير القابلة للعب في ثقافة مشتركة للخلايا العصبية القشرية للفأر النجمي ، مما يعزز تمايز NPC إلى خلايا عصبية. يتم تأكيد التمايز من خلال تصور الخلايا تحت مجهر متحد البؤر.

يعرض هذا الفيديو تقنية للزراعة المشتركة للخلايا العصبية الجلوتاماتيرجية وخلايا الورم الدبقي عالي الدرجة للأطفال (pHGG) داخل جهاز ميكروفلويديك. يتم إدخال الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة البشرية في نظام الموائع الدقيقة وتحضنها لتعزيز تمايزها إلى خلايا عصبية جلوتاماتيرجيك قشرية ناضجة. بعد ذلك ، يتم إدخال خلايا pHGG على الخلايا العصبية الناضجة ، مما يؤدي إلى إنشاء ثقافة مشتركة وتمكين التفاعلات بين الخلايا العصبية وخلايا pHGG.

يوضح هذا الفيديو طريقة لإنشاء ثقافة مشتركة غير مباشرة بين الخلايا العصبية والخلايا النجمية باستخدام نهج مجزأ. في هذا الإعداد ، يتم فصل الخلايا العصبية والخلايا النجمية مكانيا ولكنها تشترك في وسط مشروط. تعمل العوامل العصبية التي تطلقها الخلايا النجمية على تعزيز تمايز الخلايا العصبية وتشكيل الروابط المشبكية ، مما يشير إلى تفاعلات الخلايا العصبية الدبقية.

يظهر هذا الفيديو الزراعة المشتركة للخلايا العصبية العقدية الجذرية الظهرية للفئران والضامة. يتم زرع الخلايا العصبية على صفيحة مغلفة ، بينما يتم جمع الضامة من فأر قتل رحيم ، ومعالجتها وإضافتها إلى إدراج الثقافة. ينشط العلاج باستخدام db-cAMP الخلايا العصبية ويحث البلاعم على اعتماد نمط ظاهري مؤيد للتجدد لدعم نمو الخلايا العصبية.

يوضح هذا الفيديو فحصا لتعزيز نمو إسقاطات الخلايا العصبية المعروفة باسم نمو الخلايا العصبية باستخدام الوسط المكيف بالبلاعم. الزراعة المشتركة للخلايا العصبية والضامة مع cAMP وحصاد الوسط المكيف المشتق من البلاعم. تؤدي زراعة الخلايا العصبية ذات الوسط المكيف إلى تعزيز نمو الخلايا العصبية. يتم تصنيف هذه النتوءات بالفلورسنت وتصورها باستخدام المجهر الفلوري.

يوضح هذا الفيديو عملية تحضير أنسجة الحصين البطني والنواة المتكئة من أدمغة الفئران للزراعة المشتركة. تقوم الخلايا العصبية بتوسيع الإسقاطات لتشكيل روابط متشابكة بين أنسجة الحصين البطني والنواة المتكئة. تسمح هذه الطريقة بدراسة التفاعلات العصبية بين هاتين المنطقتين في الدماغ ، مما يوفر نظرة ثاقبة على الإدراك والسلوك والاضطرابات العصبية.

يعرض هذا الفيديو تقنية لإنشاء ثقافة مشتركة للخلايا العصبية ثلاثية التوائم وخلايا لب الأسنان الأولية باستخدام مرشح transwell. في هذه الحالة المنفصلة جسديا ، تفرز الخلايا الوسيطة التي يتم الحصول عليها من أنسجة لب الأسنان جزيئات إشارات paracrine التي تعبر المسام ، مما يعزز تمايز وهجرة الخلايا العصبية نحو الخلايا الوسيطة لإنشاء نظام زراعة مشتركة.

يوضح هذا الفيديو تقنية لإنشاء ثقافة مشتركة للخلايا العصبية الداخلية مع الخلايا البطانية حول الأوعية الدموية. تضاف الخلايا إلى ملحق بئر واحد يوضع داخل طبق ثقافة. بعد أن تلتصق الخلايا بالطبق ، تتم إزالة الملحق ، مما يسمح للخلايا بالتكاثر والتفاعل وتشكيل ثقافة مشتركة.

يوضح هذا الفيديو تطوير نظام ثقافة مشتركة ثلاثية الأبعاد. توضع شرائح دماغ الفأر على غشاء ، ويسمح لخلايا ورم الدماغ البشري المسمى بالفلورسنت بالنمو عليه. بمجرد أن يصبح النظام جاهزا ، يتم تلطيخه للتصوير.

يوضح الفيديو التجديد الوظيفي للوصلات النخاعية باستخدام مقايسة قائمة على مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية (MEA). توضع شرائح الحبل الشوكي على منطقة الشرق الأوسط وأفريقيا ويسمح لها بالاندماج. يتم فصل الشرائح المنصهرة ميكانيكيا عن طريق إنشاء آفة ، مما يحفز الخلايا العصبية النخاعية على النمو فوق الآفة وربط الشرائح. يتم تقييم النشاط الكهربائي للشرائح لتحديد تجديد التوصيلات الوظيفية.

يوضح الفيديو عزل خلايا الدم المحيطية أحادية النواة المتسللة إلى الورم من دماغ الفأر باستخدام التفكك الميكانيكي والهضم الأنزيمي. يتبع ذلك الطرد المركزي المتدرج للكثافة لجمع الخلايا المناعية لمزيد من التحليل.

يوضح هذا الفيديو تقنية للإزالة الانتقائية للخلايا الدبقية الصغيرة من الثقافة العصبية الأولية للفئران. يتم التعامل مع الخلايا العصبية الحبيبية المخيخية بمضادات المستقلب للقضاء على الخلايا الدبقية المتكاثرة. بالإضافة إلى ذلك ، يتم معالجتها بعوامل استهداف الليزوزوم لاستنفاد الخلايا الدبقية الصغيرة من الثقافة.

يوضح هذا الفيديو إجراء للزراعة المشتركة للخلايا النجمية والخلايا العصبية لتشكيل مجالات ثلاثية الأبعاد. توفر هذه المجالات ثلاثية الأبعاد منصة متميزة لفحص تكوين المشبك العصبي وتكامل الشبكة العصبية ، وبالتالي تكون بمثابة نموذج محتمل للبحث في علم الأعصاب التنموي ، والأمراض التنكسية العصبية ، والتدخلات العصبية الدوائية.

يوضح هذا الفيديو إجراء لعزل الخلايا العصبية العقدية الجذرية الظهرية (DRG) من أجنة الفئران ومشاركتها مع سلائف خلايا شوان لتوليد خلايا شوان الناضجة. تتم معالجة DRGs المعزولة لعزل الخلايا العصبية والخلايا الدبقية. يتم زراعة الخلايا المعزولة لتنقية الخلايا العصبية ، والتي يتم استزراعها بعد ذلك مع الخلايا الشبيهة بخلايا شوان (SCLCs) في وسط زراعة مشتركة. يؤدي التفاعل مع الخلايا العصبية DRG إلى نضوج الخلايا العصبية SCLCs في خلايا شوان.

يوضح هذا الفيديو الزراعة المشتركة للخلايا العضاقية والخلايا النجمية والخلايا البطانية في الدماغ البشري. يتم تشكيل كل طبقة خلية بشكل منفصل ثم يتم زراعتها معا ، مما يخلق نظاما من ثلاث طبقات يحاكي الترتيب الخلوي للحاجز الدموي...

يوضح هذا الفيديو إنشاء ثقافة مشتركة للخلايا العصبية المستحثة البشرية (iNs) والخلايا السليفة المستحثة للخلايا الدبقية قليلة التغصن (iOPCs). يتم خلط iNs مع iOPCs في ثقافة مشتركة ثم يتم احتضانها لدعم نضج كل من iNs إلى خلايا عصبية و iOPCs إلى خلايا الدبقية قليلة التغصن. تشكل الخلايا العصبية روابط متشابكة مع الخلايا العصبية الأخرى والخلايا قليلة التغصن ، بينما تطور الخلايا الدبقية قليلة التغصن أغلفة المايلين حول محاور الخلايا العصبية.

يوضح هذا الفيديو استخدام جهاز ميكروفيليديك لدراسة التفاعلات بين لب جرثومة الأسنان والعقد ثلاثية التوائم. يعرض وضع الأنسجة داخل جهاز الموائع الدقيقة ويوفر تصورا مفصلا لنمو العصبات ثلاثية التوائم باتجاه جرثومة الأسنان من خلال الأخاديد الدقيقة للجهاز. بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يسلط الضوء على دور العوامل الجزيئية المشتقة من الأسنان في تعزيز أو تثبيط تمدد العصبات إلى لب جرثومة الأسنان ، وهو أمر بالغ الأهمية لضمان تعصيب الأسنان بعد الولادة بكفاءة.

يوضح هذا الفيديو إجراء عزل الخلايا العصبية العقدية الشبكية (RGNs) من شبكية العين وزراعتها مع الخلايا الدبقية الشمية (OEG). تسمح هذه الطريقة بدراسة إمكانات التجدد العصبي ل OEGs بعد الإصابة العصبية.

يوضح هذا الفيديو طريقة تمييز الخلايا الجذعية العصبية البشرية من المجالات العصبية إلى أسلاف عصبية وخلايا نجمية باستخدام العلاج الأنزيمي والزراعة في وسط غني بعامل النمو ، مما يؤدي في النهاية إلى النضج إلى خلايا سلفية متخصصة.

يوضح هذا الفيديو إنشاء عضيات من نوع الدماغ الأمامي من الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة البشرية (iPSCs) ، مما يدل على التقدم من مجاميع الخلايا الجذعية إلى الهياكل المعقدة التي تحاكي قشرة الدماغ وتتمايز إلى أنواع مختلفة من الخلايا العصبية.

يوضح الفيديو الزراعة المشتركة للخلايا العصبية العقدية الجذرية الظهرية (DRG) مع خلايا Schwann. تزرع الخلايا العصبية DRG لأول مرة على غشاء ممتد مسبقا لنمو المحور العصبي المحاذاة. ثم يتم إدخال خلايا شوان ، والتي ترتبط بالمحاور ، وعزلها وتعزز بقاء الخلايا العصبية ووظيفتها.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا لإثراء الثقافات العصبية من العقد الجذرية الظهرية عن طريق التحريك المناعي ، وبالتالي تحسين نقائها وفائدتها للأبحاث العصبية.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا لتحديد العوامل الخارجية التي تبدأ في إعادة تنشيط ذبابة الفاكهة الخلايا الجذعية العصبية للدماغ من حالتها الهادئة. يتم تشريح اليرقات الحديثة الفقس لعزل أدمغتها ، والتي يتم زراعتها بعد ذلك في وسائط مع أو بدون هرمون اختبار لتقييم قدرة الهرمون على تحفيز إعادة تنشيط الخلايا الجذعية العصبية وتكاثرها.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا للزراعة المشتركة للخلايا البطانية لدماغ الفئران والخلايا الجذعية القشرية الأولية وتسمية البروتينات السكرية على سطح الخلية باستخدام Ac4ManNAz (أزيدوسكر لكل O-acetylated N-azidoacetylmannosamine). تسمح هذه الطريقة بالتخصيب الانتقائي وتحديد بروتينات سطح الخلية في الخلايا الأولية.

يوضح هذا الفيديو نموذج التثقيف لشحن عقدة الجذر الظهري وخلايا شوان. في ظروف الزراعة المشتركة ، يعزز حمض الأسكوربيك تمايز خلايا شوان إلى أشكال مايلينات. تقوم خلايا شوان النخاعية بلف المحاور عدة مرات لإنشاء غمد المايلين ، وهو أمر ضروري لوظيفة الأعصاب.

يصف هذا الفيديو عزل الخلايا العصبية DRG من خلال الهضم الأنزيمي ، والتفكك الميكانيكي ، والطرد المركزي المتدرج. يتم زراعة خلايا DRG بشكل مشترك مع الخلايا القاتلة الطبيعية على مصفوفة خارج الخلية لدراسة التفاعل بين الخلايا المناعية والخلايا العصبية الحسية.

يوضح هذا الفيديو تقنية لتقييم نشاط حمض الريتينويك في أجنة الفئران. عند عزل الخلايا عن أجنة الفئران ، يتم زراعة الخلايا بشكل مشترك مع خلايا مراسل حمض الريتينويك (RA). تنتج الخلايا الجنينية التهاب المفاصل الروماتويدي ، الذي يحفز تعبير بيتا جالاكتوزيداز في الخلايا المراسلة ، مما يشير إلى نشاط التهاب المفاصل الروماتويدي في الخلايا الجنينية.

يوضح هذا الفيديو تقنية لإنشاء نظام نموذج زراعة مشترك ثلاثي الأبعاد للأرومات الليفية القرنية البشرية الأولية والخلايا العصبية المتمايزة. يمكن استخدام نظام الزراعة المشتركة هذا لدراسة تفاعلات الأعصاب اللحمة.

يوضح الفيديو بروتوكولا يستخدم وسائط خالية من المصل لتوليد أسلاف عصبية من الخلايا الجذعية الجنينية للفأر. التركيز المطلوب للخلايا الجذعية الجنينية ، المعلقة في وسائط خالية من المصل ، مطلي على أغطية مغلفة بالجيلاتين. عند الكثافة المثلى للخلايا ، تنتج الخلايا عوامل إشارات أوتوكرين ، والتي ، جنبا إلى جنب مع العوامل المحفزة للتمايز العصبي في الوسائط الخالية من المصل ، تؤدي إلى تمايز الخلايا الجذعية الجنينية إلى أسلاف عصبية.

يعرض هذا الفيديو تطور وتمايز الخلايا الجذعية العصبية البشرية داخل سقالة ثلاثية الأبعاد. يعزز طلاء اللامينين على السقالة ارتباط الخلية ، بينما يحفز الوسط العصبي الخالي من عامل النمو تمايز الخلايا إلى خلايا سلفية عصبية ، والتي توسع عملياتها داخل بنية مسامية في اتجاهات متعددة ، وتشكل ثقافة ثلاثية...

< p class = "jove_content">يوضح هذا الفيديو طريقة في المختبر لتوليد الخلايا العصبية المتعاطفة بعد العقدة من الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات (hPSCs). يتم تمايز hPSCs إلى خلايا قمة عصبية (NCCs) على دعم مصفوفة غشاء القاعدي باستخدام وسيط تمايز. ثم يتم فصل NCCs وتشكيلها في كرويات باستخدام وسيط تمايز آخر. أخيرا ، يتم تحويل الكرات إلى خلايا عصبية متعاطفة بعد العقدة باستخدام وسيط خلية عصبية متعاطفة.

يوضح هذا الفيديو توليد وتمايز المجالات العصبية الأولية. تتكاثر الخلايا الجذعية العصبية من أسماك الزرد ، في وجود عوامل النمو ، في مجالات عصبية عائمة بحرية مع قدرة التجديد الذاتي ، والتي تتمايز لاحقا إلى خلايا دبقية وخلايا عصبية.

يوضح الفيديو طريقة لتوليد عضيات الدماغ البشري من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات. يوضح كيف يشكل الغلاف العصبي طبقة من الأديم العصبي ، والتي تمنع تكوين طبقات جرثومية أخرى. يتم تضمين المجالات العصبية في مصفوفة هلامية ثلاثية الأبعاد وتشكل براعم ظهارية عصبية. عند احتضانها بوسائط عضوية ، تتمايز هذه البراعم الظهارية العصبية إلى مناطق معينة في الدماغ ، مما يؤدي إلى تكوين عضيات دماغية ناضجة.

يوضح هذا الفيديو استخدام شريحة موائع دقيقة مطلية بمصفوفة خارج الخلية للتمييز بين الخلايا الجذعية العصبية والخلايا السلفية أو الخلايا غير القابلة للعب من خلال التحفيز الكهربائي. بعد البذر والالتزام بالمنطقة المطلية ، تنمو الشخصيات غير القابلة للعب ، ويؤدي تطبيق تيار مباشر إلى تمايزها إلى الخلايا العصبية والخلايا النجمية والخلايا قليلة التغصن.

< p class = "jove_content">يوضح هذا الفيديو فحصا لتوليد عضيات دماغية من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs). يتم تحفيز iPSCs البشرية لتشكيل أجسام جنينية (EBs). يتم زراعة EBs فوق سقالة بوليمر باستخدام وسيط تحريضي ، مما يعزز التمايز إلى الخلايا الجذعية العصبية والخلايا السلفية والخلايا العصبية غير الناضجة. أخيرا ، يتم تضمين EBs في مصفوفة ونقلها إلى وسيط صيانة لتكوين العضيات الدماغية.

يوضح الفيديو تكوين الوصلات العصبية العضلية باستخدام جهاز ميكروفلويديك. يتم زرع الخلايا السليفة العصبية والخلايا السلفية العضلية في آبار مختلفة داخل الجهاز وتترك لتنضج في الخلايا العصبية الحركية والأنابيب العضلية ، على التوالي. يؤدي إنشاء حجم وتدرج كيميائي إلى تطوير الوصلات العصبية العضلية النشطة.

يوضح هذا الفيديو تطوير ثقافة عصبية ثلاثية الأبعاد مقترنة بمصفوفة قطب كهربائي دقيق مستوي مع الخلايا العصبية في الحصين. تشكل الخلايا العصبية المعزولة شبكة ثنائية الأبعاد على المنطقة النشطة لمجموعة الأقطاب الكهربائية الدقيقة وتلتصق بالميكروبيدات الزجاجية في صفيحة متعددة الآبار مع إدراج غشاء. عند نقل هذه الميكروبيدات المغلفة بالخلايا العصبية إلى القطب الكهربائي ، فإنها تنظم في شبكة عصبية ثلاثية الأبعاد مترابطة.

يوضح هذا الفيديو عملية توليد كرات الخلايا العصبية باستخدام تقنية ثقافة القطرات المعلقة. داخل القطرات المعلقة ، تتحرك الخلايا نحو القاع ، ويتم تجميعها ذاتيا في هياكل ثلاثية الأبعاد تشكل كرات عصبية ، والتي يمكن استخدامها في الدراسات العصبية البيولوجية.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتتبع النقل المحوري في الخلايا العصبية الحركية باستخدام نظام غرفة الموائع الدقيقة. يتضمن زراعة أنسجة الحبل الشوكي الجنيني للفأر في آبار مغلفة بالبوليمر مع وسط مغذي للحث على النمو المحوري. تؤكد حركة العضيات الملطخة بالصبغة الفلورية في التصوير الحي النقل المحوري ثنائي الاتجاه.

يعرض هذا الفيديو إعادة البرمجة المباشرة للخلايا النجمية التي تعبر عن عوامل التحول إلى خلايا عصبية. تؤدي عوامل التحول إلى سلسلة من الأحداث الجزيئية التي تسهل تحويل الخلايا النجمية إلى الخلايا العصبية. يتم دعم العملية أيضا من خلال توفير عوامل ومكملات محددة من خلال وسيط التمايز العصبي.

< p class = "jove_content" >يوضح هذا الفيديو عملية تحضير شرائح الدماغ على شكل إسفين في بيئة معملية. باستخدام الاهتزاز ، يتم صنع شريحة على شكل إسفين من دماغ الفأر بسماكة متفاوتة. تحتوي هذه الشريحة على جذر العصب السمعي الموجود في الطرف السميك ، بينما توجد الخلايا العصبية المرتبطة بالسمع في الطرف الرقيق.

يوضح هذا الفيديو تقنية لتعزيز التمايز العصبي عن طريق تعريض الخلايا العصبية لقضبان نانوية ذهبية وضوء الليزر ، والذي يشكل إسقاطات خلوية مدعومة ب βIII-tubulin. يكشف تلطيخ ومراقبة التوبولين ونواة الخلية باستخدام الفحص المجهري epifluorescence عن نمو الخلايا ، مما يشير إلى فعالية القضبان النانوية في التمايز العصبي.

< p class = "jove_content">يوضح هذا الفيديو امتصاص الخلايا العصبية للجسيمات النانوية المغناطيسية الفلورية (MNPs) عن طريق الالتقام الخلوي. إن زراعة هذه الخلايا العصبية المحملة ب MNP على الركيزة المزخرفة مغناطيسيا تمكن من ربط الخلايا. تساعد إضافة عامل نمو يحتوي على وسيط في نمو امتدادات الخلايا العصبية ، بينما يوجه المجال المغناطيسي للركيزة اتجاه الامتداد.

يوضح هذا الفيديو تمايز الخلايا الجذعية الجنينية البشرية ، أو hESCs ، مباشرة إلى الخلايا السلفية العصبية دون استخدام الخلايا المغذية أو أي خطوات وسيطة. يؤدي التثبيط الانتقائي للبروتين المورفوجيني للعظام أو BMP وتحويل مسارات إشارات عامل النمو بيتا ، أو TGF-β ، إلى تمايز hESCs إلى خلايا سلفة عصبية ، أو NPCs.

يوضح هذا الفيديو تقنية لإعداد مزارع شرائح عائمة بحرية من الدماغ البشري البالغ. يتم إنشاء شرائح رفيعة من قسم الدماغ باستخدام الاهتزاز. ثم يتم تعليق هذه الشرائح في وسط استزراع مكمل بعوامل النمو للحفاظ على صلاحية الأنسجة.

يوضح هذا الفيديو طريقة لإعداد مزارع شرائح الحصين العضوية من دماغ جرو الفئران. وهو يحدد الخطوات المتبعة في تشريح الحصين ، والتقطيع ، وظروف الاستزراع المطلوبة لتعزيز بقاء الخلية ونموها في شرائح الحصين ، مما يؤدي في النهاية إلى إنشاء ثقافات شرائح عضوية.

يصف هذا الفيديو بروتوكولا للحصول على شرائح الدماغ باستخدام طريقة الاسترداد الوقائية القائمة على N-Methyl-D-glucamine (NMDG). يتم تحضين الدماغ المقطوع في aCSF مع NMDG و HEPES لتقليل موت الخلايا العصبية وتلفها أثناء التقسيم. يسمح للقسم بالتعافي في aCSF لاستعادة الأنشطة...

يوضح هذا الفيديو طريقة للحضانة المطولة للأنسجة العصبية لشبكية العين. يتم الحصول على أكواب العين التي تحتوي على شبكية العين من عين الفأر. يتم هضم الغشاء المحدد الداخلي (ILM) إنزيميا لفضح الخلايا العصبية لشبكية العين ، ويتم نقل إما واقية العين المعالجة أو شبكية العين المعزولة إلى حاضنة متخصصة للحضانة لفترات طويلة عند درجة حرارة منخفضة.

< p class = "jove_content">يوضح هذا الفيديو تقنية لتوليد عضيات مخيخية ناضجة من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs) باستخدام مفاعل حيوي ثلاثي الأبعاد يستخدم مرة واحدة. يسهل المفاعل الحيوي تكوين الركام iPSC, الذي يخضع بعد ذلك للمعالجة بسلسلة من وسائط الاستزراع المخصب في عوامل النمو والكيموكينات التي تحفز تمايز مجاميع iPSC إلى عضيات مخيخية ناضجة. بعد ذلك ، يتم حصاد العضيات وحفظها بالتبريد لمزيد من التحليل.

يوضح هذا الفيديو تقنية لإنشاء ثقافة ثلاثية الأبعاد للخلايا الدبقية. يتم تغليف الخلايا الدبقية المشتقة من دماغ الفئران داخل مصفوفة بوليمر قابلة للتشابك الضوئي تحتوي على مكونات مصفوفة خارج الخلية. عند الحضانة في وسط النمو ، تتكاثر الخلايا الدبقية داخل المصفوفة الداعمة لإنشاء ثقافة ثلاثية الأبعاد.

يوضح الفيديو طريقة لتوليد الغلاف الفلكي من أسلاف الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات. إنه ينطوي على نمو وتكاثر الخلايا الجذعية بوسط مغذي يحتوي على عوامل نمو ومثبطات كيناز. ثم تتجمع هذه الخلايا وتتمايز إلى خلايا نجمية ، وتشكل الغلاف الفلكي.

يوضح هذا الفيديو توليد الخلايا السلفية العصبية من الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات غير المعدلة وراثيا والمعدلة وراثيا (hPSCs). يتم تمييز hPSCs إلى خلايا سلفة عصبية باستخدام وسيط تمايز عصبي. بينما يتم تحفيز التمايز في الخلايا غير المعدلة وراثيا باستخدام جزيئات صغيرة ، يتم تمييز hPSCs المعدلة وراثيا عن طريق إضافة مضاد حيوي يحفز المحفز لعامل نسخ خاص بالتمايز العصبي.

< p class = "jove_content">يوضح هذا الفيديو طريقة للحصول على خلايا شبيهة بخلايا شوان من الخلايا اللحمية لنخاع العظم متعددة القدرات (BMSCs). في البداية ، تخضع BMSCs لعلاج نقص الأكسجة ، يليه التمايز الموجه إلى الخلايا السلفية العصبية. بعد ذلك ، يتم استخدام ظروف وسائط وثقافة محددة للحث على تحويل هذه الخلايا السلفية إلى خلايا شبيهة بخلايا شوان.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتوليد سقالات نجمية ثلاثية الأبعاد داخل أعمدة هيدروجيل دقيقة. الجزء الداخلي من الأعمدة الدقيقة مغطى بالكولاجين. يتم إدخال الخلايا النجمية ، التي تلتصق بالكولاجين ، ومع مزيد من الحضانة ، يتم تجميعها ذاتيا في سقالة ثلاثية الأبعاد.

يعرض هذا الفيديو إنشاء نموذج نسيج عصبي مستقطب ثلاثي الأبعاد باستخدام سقالات الكولاجين الحريرية. يفصل عملية بذر الخلايا العصبية على سقالات الحرير المسامية ، واحتضان ارتباط الخلية ، وتضمين السقالة بالكولاجين ، ويؤكد على أهمية مصفوفة الكولاجين الداعمة في تشكيل نموذج الأنسجة العصبية المستقطبة ثلاثية الأبعاد.

يعرض الفيديو طريقة لفصل وإعادة زرع الخلايا العصبية البشرية المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات باستخدام إنزيم محلل للبروتين خفيف. بعد الترشيح والطرد المركزي ، يتم إعادة طلاء الخلايا العصبية على صفيحة مغلفة متعددة الآبار للحضانة ، مما يعزز التعلق والنضج.

يوضح هذا الفيديو طريقة إنشاء عضيات الأعصاب الحركية عن طريق زراعة الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة البشرية أولا في وسط خاص لتشكيل كرويات ، ثم تمييزها إلى خلايا عصبية حركية باستخدام مثبطات محددة ، وأخيرا زراعتها في شريحة ميكروسويدية لتمديد المحاور وتشكيل عضيات الأعصاب الحركية.

يقدم هذا الفيديو طريقة لتحفيز التمايز في الخلايا الجذعية العصبية باستخدام بلازما الغلاف الجوي الباردة. يولد هذا الأشعة فوق البنفسجية والجزيئات التفاعلية لتحفيز الخلايا العصبية على إنتاج نتوءات ، مما يشير إلى تمايز الخلايا العصبية.

يقدم هذا الفيديو طريقة لتوليد سلائف الخلايا العصبية الداخلية القشرية من الخلايا الجذعية الجنينية للفأر. يستلزم البروتوكول زراعة الخلايا الجذعية في وسائط تحتوي على مثبطات جزيئات صغيرة محددة ، مما يسهل تكاثر الخلايا الجذعية وتجميعها في أجسام جنينية (EBs). بعد ذلك ، يتم فصل EBs عن الإنزيمات وطلاءها على آبار لوحة الاستزراع المغلفة ببروتينات الالتصاق لتعزيز تمايزها إلى سلائف الخلايا العصبية القشرية.

يوضح هذا الفيديو إعادة البرمجة المباشرة للخلايا السلفية المكونة للدم المعدلة وراثيا إلى خلايا جذعية عصبية. تؤدي عوامل النسخ التي تعبر عنها الخلايا السلفية المكونة للدم إلى سلسلة من الأحداث الجزيئية التي تسهل تحولها. يتم استخدام وسائط محددة أخرى لاختيار الخلايا الجذعية العصبية المستحثة وتنميتها.

يوضح هذا الفيديو استخدام الحمض النووي الريبي الصغير المتداخل (siRNA) لإسكات جينات معينة ذات أهمية في الخلايا الجذعية العصبية وتمايزها إلى أنواع الخلايا المرغوبة باستخدام وسيط التمايز المناسب. يتيح هذا الإجراء دراسة الدور الحاسم لجينات معينة في عملية تمايز الخلايا الجذعية العصبية.

يوضح هذا الفيديو عملية التفريق بين الخلايا السلفية العصبية المستحثة (iNPCs) إلى خلايا عصبية وخلايا نجمية باستخدام وسائط متخصصة.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتوليد الخلايا السلفية العصبية في المختبر (NPCs) من الخلايا الجذعية الجنينية للفأر (mESCs). يتم استزراع mESCs في تعليق لتشكيل أجسام جنينية (EBs) ، والتي يتم توجيهها بعد ذلك للتمايز إلى NPCs عن طريق معالجة حمض الريتينويك في ثقافة ملتصقة.

عرض الفيديو طريقة زراعة الخلايا لتمييز الخلايا السلفية العصبية إلى خلايا عصبية. عن طريق احتضان الخلايا في وسط غني بالمغذيات مكمل بعوامل النمو ، نضجت الخلايا السلفية إلى خلايا عصبية ذات محاور وتشعبات متطورة. يضمن عامل التثبيت بقاء الخلية وحمايته من التلف التأكسدي طوال عملية التمايز.

يوضح هذا الفيديو طريقة أنبوب أسطواني معدلة لزراعة شرائح الدماغ على المدى الطويل من نموذج القوارض. أولا ، يتم إرفاق شرائح الدماغ بطبقات الأغطية. بعد ذلك ، يتم أخذ أنابيب الأسطوانة ذات الجوانب المسطحة ذات الفتحة على الجانب المسطح ، ويتم وضع أغطية الغطاء على الفتحة باستخدام أقراص لاصقة. أخيرا ، يضاف وسط مغذي وثاني أكسيد الكربون وخليط الهواء إلى الأنبوب ، ويتم تحضين الأنابيب بحركة متدحرجة.

يوضح هذا الفيديو تقنية للبدء السريع للخلايا العصبية وتمددها وإنشاء اتصالات جديدة مع خلية عصبية مستهدفة باستخدام جهاز الموائع الدقيقة والمعالجة الدقيقة. يمكن استخدام هذا للعلاجات التي تهدف إلى إعادة توصيل الدوائر العصبية بعد الصدمة أو في الأمراض التنكسية العصبية.

< p class = "jove_content" >يوضح الفيديو توليد الخلايا العصبية من الخلايا الليفية الجلدية البشرية البالغة (aHDFs). تتم إعادة برمجة aHDFs باستخدام ناقل فيروسي عدسي يحمل جينات لعوامل النسخ العصبي والحمض النووي الريبي القصير (shRNAs). تمنع shRNAs التعبير عن مثبط النسخ العصبي ، وتنشط عوامل النسخ العصبية الجينات لتمييز aHDFs إلى خلايا عصبية. يتم زراعة هذه aHDFs المعاد برمجتها في وسط تحويل الخلايا العصبية المبكر والمتأخر لتوليد الخلايا العصبية الناضجة.

يوضح الفيديو توليد وصيانة مزارع الشرائح العضوية من أنسجة الورم الأرومي الدبقي. يتم تضمين الأنسجة المعزولة في مصفوفة الاغاروز ، ويتم الحصول على أقسام رقيقة باستخدام الاهتزاز. ثم يتم وضع هذه الأقسام على إدخالات غشائية قابلة للاختراق داخل صفيحة دقيقة ويتم زراعتها في وسائط صيانة ثقافة الشرائح للصيانة طويلة الأجل.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا لعزل وزراعة خلايا شوان من أنسجة الأدمة البشرية. تحتوي الأدمة البشرية على أنواع مختلفة من الخلايا ، بما في ذلك الخلايا الليفية وخلايا شوان. بعد العزل ، تتم معالجة الخلايا بعامل مضاد للانقسام للقضاء على الخلايا الليفية المتكاثرة ، مما يؤدي إلى ثقافة نقية لخلايا شوان.

يوضح الفيديو عملية إنشاء بنية ثلاثية الأبعاد مطبوعة حيويا باستخدام الخلايا النجمية المعلقة في محلول الحبر الحيوي. يسهل البناء المطبوع بيولوجيا ، بعد التشابك ، التصاق الخلايا النجمية وانتشارها ، وتشكيل أنسجة شبيهة بالأعصاب.

يوضح هذا الفيديو كيف يتم فصل الغلاف الدبقي ، المشتق من أورام المخ ، إلى خلايا مفردة وتغليفها في هيدروجيل قائم على حمض الهيالورونيك. تعزز هذه العملية تفاعلات الخلية والخلية ، وتشكل نموذجا منظما ثلاثي الأبعاد للورم الأرومي الدبقي.

يوضح هذا الفيديو تقنية للحصول على شرائح عضوية مخيخية من دماغ جرو الفأر وزراعة الشرائح في وسائط مكملة بالعناصر الغذائية وعوامل النمو لتقليد نمو المخيخ في المختبر. بالإضافة إلى ذلك ، يتم التعامل مع شرائح مخيخية معينة بمركب اختبار ، ويتم تحليل قدرة الحماية العصبية للمركب باستخدام تقنية تلطيخ التألق المناعي.

يصف هذا الفيديو تحضير وزراعة عضيات أورام المخ من معلق خلية واحدة. باستخدام مصفوفة خارج الخلية الغنية بالألامينين كسقالة ووسط استزراع للمغذيات ، يتم تسهيل تكاثر الخلايا وتنظيمها ذاتيا داخل العضوية. وبالتالي ، يتم إنشاء عضيات خارج الجسم الحي ، تحاكي التنوع الخلوي والبيئة المكروية لأورام الدماغ.

يوضح هذا الفيديو عملية توليد الخلايا السليفة قليلة التغصن (OPCs) من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية ، متبوعة بنضج OPCs إلى الخلايا قليلة التغصن. تفتح عملية توليد الخلايا قليلة التغصن طرقا عديدة لتحسين البحث والعلاج للأمراض التنكسية العصبية ، بما في ذلك مرض الزهايمر.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا للتمييز بين الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة البشرية إلى أسلاف مخيخية. يتضمن نقل مستعمرات الخلايا الجذعية إلى صفيحة تعلق منخفضة للغاية لتشكيل أجسام جنينية ، وتعزيز التمايز مع عوامل النمو ، ثم نقل الأجسام الجنينية إلى صفيحة مغلفة بالمصفوفة للالتصاق. تتضمن الخطوات اللاحقة تحفيز هجرة الخلايا وإضافة وسيط النضج لتوجيه تطور السلائف العصبية المخيخية الجلوتاماتية وGABAergic وأسلاف خلايا بركنجي.

يوضح هذا الفيديو عملية تفريق الأجسام الجنينية (EBs) إلى مجاميع الظهارية العصبية وانقسامها اللاحق إلى خلايا عصبية ودبقية. تسمح هذه الطريقة بالتوليد الفعال للخلايا العصبية والدبقية في المختبر ، والتي تعمل كأنظمة اختبار لاختبار السمية بالإضافة إلى تقييم المسارات المختلفة المشاركة في السمية العصبية.

يوضح هذا الفيديو عملية عزل وزراعة الخلايا السلفية الدبقية من الورم الدبقي الجسري الجوهري المنتشر ، أو أنسجة جذع الدماغ المصابة ب DIPG. يتم زراعة الخلايا الدبقية المعزولة من أنسجة الورم عن طريق الهضم الأنزيمي في وسط عصبي قاعدي ، مما يعزز نموها وتطور المجالات العصبية العائمة الحرة.

يعرض هذا الفيديو طريقة لتمييز الخلايا السلفية العصبية للحبل الشوكي (NPCs) إلى خلايا عصبية حركية. إنه يفصل عملية استزراع الشخصيات غير القابلة للعب على صفيحة ثقافة مغلفة باستخدام وسائط متخصصة غنية بمثبطات محددة تهدف إلى تسهيل تمايز NPC إلى خلايا عصبية حركية ناضجة.

يوضح هذا الفيديو تحول الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات (hPSCs) إلى عضيات دماغية كروية. باستخدام مثبطات محددة ، يتم توجيه hPSCs للتمايز نحو سلالة عصبية ، وتشكيل مستعمرات الأديم العصبي. ثم يتم إدخال عوامل نمو خاصة ، والتي تشجع التنظيم الذاتي وانتشار المستعمرات ، مما يؤدي في النهاية إلى تكوين عضيات كروية في الدماغ.

يوضح الفيديو تمايز الخلايا الجذعية العصبية (NSCs) باستخدام جهاز موائع دقيقة يشتمل على حجرة جسدية ومحورية مفصولة بحاجز أخدود صغير. يتم إدخال NSCs في المقصورة الجسدية ويسمح لها بالالتصاق. تتمايز الخلايا العصبية العصبية إلى خلايا عصبية داخل المقصورة الجسدية وتمتد المحاور عبر حاجز الأخدود الصغير إلى الحجرة المحورية.

يوضح هذا الفيديو طريقة لعزل الخلايا الجذعية من مخيخ الفأر بعد الولادة وتمايزها إلى خلايا عصبية. يتم تنقية الخلايا الجذعية من معلق الخلية المعزولة باستخدام حبات مغناطيسية مغلفة بالأجسام المضادة ويتم زراعتها لتشكيل المجالات العصبية. ثم يتم الحفاظ على المجالات العصبية في وسط تمايز لتوليد الخلايا العصبية.

يوضح هذا الفيديو عزل الخلايا الساتلية عن أنسجة العضلات المتفرعة لرأس الفئران من خلال تشريح الأنسجة ، والهضم الأنزيمي ، والتنقية الميكانيكية والطرد المركزي اللاحقة. ثم يتم زرع الخلايا في آبار مغلفة بالمصفوفة خارج الخلية للتمايز إلى الخلايا العضلية ، وفي النهاية إلى الأنابيب العضلية وألياف العضلات الناضجة.

يوضح هذا الفيديو تقنية بسيطة لتكوين الخلايا العصبية الناجم عن حمض الريتينويك في خلايا سرطان الفأر الجنيني P19. ينشط حمض الريتينويك عوامل النسخ ويؤدي إلى التعبير الجيني للتمايز العصبي.

يوضح الفيديو طريقة تحفيز تمايز الخلايا الجذعية إلى أسلاف عصبية باستخدام حمض الريتينويك وطريقة زراعة القطرات المعلقة.

يوضح الفيديو بروتوكولا لتفريق الخلايا السليفة قليلة التغصن (OPCs) إلى خلايا الدبقية قليلة التغصن وإحداث تكوين النخاع في ثقافة مشتركة مع الخلايا العصبية العقدية الجذرية الظهرية (DRG). يتم تحويل OPCs بنواقل الفيروسية العدسية التي تشفر بروتين إشارات ينظم تكوين النخاع. يتم استزراع OPCs المنقولة بشكل مشترك مع الخلايا العصبية DRG لتقييم التمايز إلى الخلايا قليلة التغصن وتكوين النخاع الناجم عن البروتين الإرشادي.

يوضح هذا الفيديو إنتاج الوسط المكيف بالخلايا قليلة التغصن (OCM) من خلايا سلالة الخلايا قليلة التغصن من خلال التأكيد عليها لتعزيز إطلاقها الجزيئي في الوسط. يمكن إضافة هذه الوسيطة ، الغنية بعوامل النمو والسيتوكينات والجزيئات النشطة بيولوجيا الأخرى ، إلى مزارع الخلايا العصبية لاكتساب نظرة ثاقبة لتأثير العوامل التي تفرز الخلايا قليلة التغصن على فسيولوجيا الخلايا العصبية والاتصال.

يوضح هذا الفيديو تقنية لعزل الطيات العصبية القحفية من منطقة الدماغ المتوسط لأجنة الكتاكيت. يقدم عملية تشريح مفصلة للطيات العصبية ، ووضعها ، وإرفاقها على أغطية مغلفة بفيبرونكتين ، تليها ملاحظة هجرة خلايا القمة العصبية من الطيات العصبية.

< p class = "jove_content" >يوضح هذا الفيديو تقنية لتوليد العضيات الدماغية من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs). تتم معالجة الثقافة الملتصقة لمستعمرات hESC بالإنزيمات لفصلها وتقسيمها إلى مجموعات. تشكل هذه المجموعات مجالات ثلاثية الأبعاد في حالة تعليق ، والتي يتم تحفيزها بعد ذلك على التمايز إلى عضيات تحاكي قشرة الدماغ بطبقات من الخلايا العصبية والخلايا الدبقية.

يوضح الفيديو عزل الخلايا العصبية الحركية للعين والبوقلة والحركية الشوكية عن جنين الفأر المعدل وراثيا. يعبر الجنين عن الخلايا العصبية الحركية المصنفة ببروتين الفلورسنت الأخضر (GFP) لسهولة التصور والتعرف عليها. يتم عزل الخلايا العصبية الحركية جراحيا تحت المجهر الفلوري ويتم الاحتفاظ بها في وسط ثقافة.

يوضح الفيديو إجراءات الحفاظ على بيئة خاضعة للرقابة في محطة عمل زراعة الخلايا لنمو الخلايا الجذعية العصبية والحفاظ عليها. تتضمن هذه الإجراءات وضع ظروف الغرفة وبروتوكولات التنظيف وإعداد الوسائط ، وبالتالي الحفاظ على أقصى قدر من العقم والاستنساخ واستبدال الطرق التقليدية.

يوضح هذا الفيديو تقنية لتنقية الخلايا السلفية البطانية CD31 + (EPCs) من مزرعة باستخدام فرز الخلايا المنشطة مغناطيسيا (MACS). يتم معالجة تعليق الخلية بجسم مضاد مترافق بالفلوروفور يرتبط ب CD31 على EPCs. يتضمن استكمال وضع العلامات على CD31 + EPCs إضافة مركب أجسام مضادة ، يرتبط بالفلوروفورات ، وجسيم نانوي مغناطيسي مطلي بالبوليمر ، والذي يرتبط بمركب الجسم المضاد. ثم يتم تنقية الخلايا المسماة باستخدام مجال مغناطيسي ، والتخلص من أي خلايا CD31.

يوضح هذا الفيديو عملية تكوين الغلاف العصبي وتوسعها من أنسجة الحصين. تتكاثر الخلايا الجذعية العصبية والخلايا السلفية من أنسجة التلفيف المسننة للفأر بعد الولادة وتشكل المجالات العصبية الأولية ، والتي يتم إعادة زرعها بعد ذلك لتشكيل مجالات عصبية ثانوية.

< p class = "jove_content">يوضح هذا الفيديو بروتوكولا للحث على تمايز الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات إلى خلايا بطانة الدماغ.

يوضح هذا الفيديو تقنية لعزل واستزراع الخلايا الجذعية المشتقة من الدهون المشتقة من القمة العصبية (ADSCs) المصنفة بالفلورسنت من الأنسجة الدهنية حول قوس الفئران. بعد العزل ، يتم اكتشاف NCADSCs وفرزها باستخدام فرز الخلايا المنشط بالفلورة ، ثم يتم زراعتها لاحقا على طبق ، مما يعزز تكاثر الخلايا.

يوضح هذا الفيديو طريقة لعزل الخلايا الدبقية المعوية من تحت الغشاء المخاطي والصفيحة المخصوصة في أمعاء الفأر. يحدد الخطوات المتبعة في استخراج أنسجة تحت الغشاء المخاطي والصفيحة المخصوصة ، وعزل الخلايا الدبقية المعوية عنها ، وزراعة الخلايا على صفيحة بئر مغلفة لإنشاء ثقافة الخلايا الدبقية المعوية.

يوضح هذا الفيديو عزل الشعيرات الدموية عن أدمغة الخنازير الطازجة. تتضمن العملية إزالة السحايا ، وعزل المادة الرمادية من أنسجة المخ ، وتجانس المادة الرمادية وتصفيتها لعزل الشعيرات الدموية ، وأخيرا استخدام الهضم الأنزيمي لتنقية الشعيرات الدموية بشكل أكبر.

يوضح هذا الفيديو عملية عزل الأوعية الدقيقة للدماغ عن الفئران التي تم قتلها رحيم. ويشمل تشريح الدماغ ، وتنظيف الأنسجة ، والهضم الميكانيكي ، يليه الطرد المركزي المتكرر لعزل الجزء النقي من الأوعية الدقيقة.

يصف هذا الفيديو طريقة لتحضير أغطية زجاجية مطلية بالبولي أورنيثين واللامينين لتعزيز التصاق ونمو الخلايا الجذعية العصبية. تتضمن هذه التقنية حضانات وغسلات متسلسلة ، مما يسهل تكوين مصفوفة داعمة تعزز نمو الخلايا العصبية وتمايزها ، وتحاكي الهياكل الموجودة في الخلايا العصبية.

توضح هذه التجربة بالتفصيل طريقة لتوليد الوصلات العصبية العضلية من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان. يستخدم عملية تمايز مرحلية لتعزيز تطور الخلايا العصبية العضلية والحركية وتكوين المشبك ، مما ينتج عنه تقاطعات عصبية عضلية وظيفية.

يوضح هذا الفيديو طريقة تعزيز تمايز الخلايا الجذعية من خلال علاج DMSO العابر ، والذي يقبض على الخلايا في مرحلة G1. بعد العلاج ، تتم إضافة وسيط تمايز الأديم الظاهر مع مثبطات BMP و TGF-β لتعزيز تكوين السلائف العصبية.

يوضح هذا الفيديو طريقة لعزل الخلايا المحيطة الدماغية عن دماغ الفأر. يتم زراعة الخلايا المعزولة في وسائط خاصة بالحمض لتعزيز تكاثر الحضج.

يعرض هذا الفيديو استخدام تقنية إضاءة الضوء اللين الجانبي لتحسين التصور بالعين المجردة للأجسام الجنينية ، وبالتالي تسهيل التلاعب بها ونقلها أثناء زراعة العضوية الدماغية. يوضح إعداد إضاءة الضوء الناعم ، وطرق تغيير الوسائط ونقل الجسم الجنيني ، بالإضافة إلى إجراء إحداث التمايز العصبي في الأجسام الجنينية لتطور العضوية الدماغية.

يصف الفيديو تحضير ركيزة منقوشة لدراسة مواصفات النمط الظاهري للخلية. يتم استخدام ختم PDMS مطلي بالبروتين لنقل النمط الدقيق على غطاء مطلي ب PDMS. ثم تتم معالجة الغطاء بمادة خافضة للتوتر السطحي لإعاقة التصاق الخلايا على الأسطح غير المرغوب فيها. ثم تضاف الخلايا لتستقر في النمط وتحتضنها لمزيد من التحليل.

يوضح هذا الفيديو طريقة لعزل الأنابيب البطانية من الحمة الدماغية للفأر. من خلال مزيج من الهضم الأنزيمي والتفكك الميكانيكي ، تنتج العملية أنبوبا سليما به خلايا بطانية.

يوضح هذا الفيديو تقنية لزراعة الأقراص الفقرية البقرية في المفاعلات الحيوية لتطوير نموذج ثقافة أعضاء ثلاثي الأبعاد. يتم تطبيق وسائط محددة محرومة من المغذيات وظروف الضغط التنكسي على الأقراص ، مما يحاكي البيئة المكروية المؤيدة للالتهابات والتنكسية التي لوحظت أثناء مرض القرص الفقري في المرحلة المبكرة. يتم قياس ارتفاعات القرص بعد المعالجة لتحليل آثار الحرمان من المغذيات والتحميل التنكسي.

يوضح هذا الفيديو عملية تحفيز الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات على التمايز إلى خلايا عصبية عن طريق نقلها بفيروسات عدسية هندسية تحمل جين عامل النسخ العصبي تحت سيطرة عنصر مستجيب للتتراسيكلين ، يليه العلاج بمشتق التتراسيكلين ووسط النضج.

يوضح هذا الفيديو تقنية لتمايز الخلايا الجذعية الجنينية إلى مجموعة متصلة بالشبكة من الخلايا العصبية ذات نقاط الاشتباك العصبي الوظيفية. يحدد الخطوات المتبعة في تمايز الخلايا الجذعية الجنينية إلى خلايا عصبية ، وتحريض تكوين الشبكة العصبية ، وإثراء الثقافة بالخلايا العصبية الشبكية.

يوضح هذا الفيديو طريقة لعزل خلايا شوان عن الألياف العصبية الوركي للفأر.

يوضح الفيديو طريقة لعزل النوى السليمة من الخلايا الدبقية والجذعية في التلفيف المسنن للحصين (DG). يتم فصل أنسجة DG ميكانيكيا في مخزن مؤقت للتجانس البارد لتحرير النوى. يتم التخلص من بقايا الأنسجة والعضيات الأخرى المنبعثة ، ويتم تلطيخ النوى بصبغة الحمض النووي وجسم مضاد مترافق بالفلوروفور خاص بالمستضد النووي العصبي (NeuN). ثم يتم استخدام فرز النوى التي يتم تنشيطها بالتألق لعزل النوى السالبة NeuN للخلايا غير العصبية.

يوضح هذا الفيديو إعادة برمجة مصير الخلية للخلايا الجرثومية الخيطية إلى خلايا عصبية. تتعرض اليرقات المعدلة وراثيا من الديدان الخيطية Caenorhabditis elegans لتداخل الحمض النووي الريبي (RNAi) لإسقاط عامل منظم للكروماتين معين ، مما يجعل الخلايا الجرثومية من ذريتها أكثر عرضة لإعادة برمجة مصير الخلية. يتم تطبيق الصدمة الحرارية على النسل ، مما يحفز الخلايا الجرثومية على التعبير عن عامل نسخ خاص بالخلايا العصبية يؤدي إلى تحولها إلى خلايا عصبية ، والتي يتم تحديدها باستخدام مراسل الفلورسنت المعبر عنه.

يوضح هذا الفيديو إجراء تمايز الخلايا البشرية متعددة القدرات إلى خلايا شبيهة بالخلايا الدبقية الصغيرة. تتضمن العملية تكوين أجسام جنينية ، ونقلها إلى آبار مغلفة ، واستخدام عوامل نمو محددة لتوجيه التمايز إلى سلائف البلاعم البدائية ، والتي تتمايز أخيرا إلى خلايا شبيهة بالخلايا الدبقية الصغيرة.

يوضح هذا الفيديو استزراع خلايا مولر الدبقية (MG) المعزولة من شبكية العين الفئرانية. يتم فصل شبكية العين إلى معلق أحادي الخلية باستخدام الإنزيمات الهاضمة. ثم تزرع الخلايا في وسط مع عامل نمو يعزز تكاثر خلايا MG وموت الخلايا العصبية. تتم إزالة الخلايا العصبية الميتة أثناء المرور ، وتزرع خلايا MG لمزيد من التحليل.

يوضح هذا الفيديو تقنية لعزل واستزراع الخلايا الدبقية الأولية المختلطة من أنسجة الحبل الشوكي للفأر البالغ. يتضمن البروتوكول الهضم الأنزيمي للأنسجة ، متبوعا بإزالة أغشية الخلايا المكسورة وحطام المايلين للحصول على مجموعة من خلية واحدة. ثم يتم زراعة الخلايا في وسائط محسنة لنمو الخلايا الدبقية المختلطة.

يوضح هذا الفيديو تمايز خلايا السلف الأذني متعدد القدرات (iMOP) الخالدة إلى خلايا ظهارية حسية. يحدد الخطوات المتبعة في زراعة خلايا iMOP ، وتشكيل الغلاف الأذني ، وإحداث التمايز ، وتصور المكونات الخلوية وعلامات التمايز من خلال المجهر الفلوري لتأكيد تمايز الخلايا الناجح.

يوضح الفيديو تمايز أسلاف الأذن متعددة القدرات الخالدة (iMOPs) إلى الخلايا العصبية العقدية الحلزونية (SGNs) والتأكيد القائم على التألق المناعي للتمايز. يتم طلاء iMOPs على أغطية مغلفة بالركيزة المزروعة في وسط تمايز عصبي للتمايز إلى SGNs. يتم تصنيف الخلايا المتمايزة بأجسام مضادة خاصة بعلامات التمايز العصبي وتحليلها تحت المجهر لتأكيد التمايز.

يوضح هذا الفيديو ثقافة خارج الجسم الحي وتصوير الشرائح الحركية للعين من أجنة الفئران المعدلة وراثيا. الأجنة معزولة ومدمجة في الاغاروز. باستخدام الاهتزاز ، يتم الحصول على شرائح تحتوي على النوى الحركية للعين والعينين. يتم الحفاظ على الشرائح في الثقافة وتصويرها باستخدام المجهر الفلوري.

< ص الفئة = "jove_content">يوضح هذا الفيديو عملية متعددة الخطوات لتفريق iPSCs البشرية إلى خلايا بطانة الأوعية الدموية الدقيقة في الدماغ. تحاكي الخلايا المتمايزة الناتجة عن كثب الخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة في الدماغ ، والتي تتميز بتوصلات ضيقة ، مما يجعلها مثالية للبحث في أمراض الدماغ.

يوضح هذا الفيديو طريقة لعزل الخلايا العصبية من الدماغ الأمامي لجنين كتكوت في مرحلة مبكرة وزراعتها على مصفوفة قطب كهربائي دقيق لتشكيل شبكة عصبية.

< p class = "jove_content">يعرض هذا الفيديو إنشاء شريحة حاجز دموي دماغي باستخدام خلايا السلائف المشتقة من iPSC. يتضمن زرع الخلايا السلفية العصبية والخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة في الدماغ في قنوات منفصلة بغشاء مسامي. من خلال تدفق وسائط التمايز ، تشكل الخلايا البطانية تقاطعات ضيقة تشبه الأوعية الدموية ، وتنضج الخلايا العصبية في أنواع مختلفة من خلايا الدماغ ، مما يؤدي إلى إنشاء حاجز دموي دماغي وظيفي على الشريحة.

يوضح الفيديو تحضير شرائح القشرة الحزامية الأمامية المهاد الإنسي (MT-ACC) من أدمغة الفئران. يتم تشريح دماغ الفأر ، ويتم إجراء جروح لكشف مسار MT-ACC ، ويتم إنشاء الشرائح باستخدام اهتزاز. ثم يتم الحفاظ على شرائح MT-ACC في السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي المؤكسج.

يوضح هذا الفيديو تقنية لتوليد خط مراسل الخلايا الجذعية للورم الأرومي الدبقي لتحديد تمايز الخلايا الجذعية للورم الأرومي الدبقي (GSCs) إلى الخلايا الدبقية الدبقية. يحدد الخطوات المتبعة في بذر GSCs ، وتحويلها بفيروس عدسي يشفر GFP ، وتحديد تعبير مراسل GFP من خلال قياس التدفق الخلوي.

يظهر هذا الفيديو إصابة الخلايا العصبية الأولية في الدماغ المتوسط للفأر بالفيروسات المرتبطة بالغدة التي تحمل مؤشر الكالسيوم الفلوري. يؤكد تألق المؤشر العدوى الناجحة ويتيح المراقبة في الوقت الفعلي للعدوى العصبية.

يوضح الفيديو طريقة للحصول على شرائح قشرة الأنف والحصين من دماغ جرو الفئران وزراعتها في إدخالات غشائية داخل صفيحة متعددة الآبار مليئة بالوسائط لمزيد من التحليل.

يوضح هذا الفيديو تشريح وتركيب نباتات الدماغ من ذبابة الفاكهة يرقات. يتم استخراج الجهاز العصبي المركزي (CNS) ، المتصل بأقراص العين ، من اليرقات ثم يتم تركيبه على شريحة زجاجية في محلول ملحي فسيولوجي.

يوضح الفيديو تقنية لتفريق الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة البشرية (hiPSCs) إلى خلايا سلفية عصبية (NPCs). في البداية ، يتم زراعة hiPSCs على طبقة مغذية من الخلايا الليفية الجنينية للفأر (MEFs). بعد ذلك ، يتم فصل الخلايا ونقلها إلى صفيحة مطلية بالبوليمر الحيوي للسماح ل MEFs بالالتصاق ب hiPSCs والانفصال عنها. ثم يتم نقل hiPSCs المعلقة إلى لوحة قاع V ويتم طردها مركزيا لتشكيل مجاميع. أخيرا ، تؤدي إضافة وسيط تمايز إلى تمايز hiPSCs داخل المجموع إلى الشخصيات غير القابلة للعب.

يصف الفيديو إجراء تطوير الأجسام الجنينية الخالية من المصل (SFEBs) من الخلايا السلفية العصبية باستخدام وسائط تمايز مختلفة خالية من المصل أو DM. يسهل DM-2 نضوج الخلايا العصبية وترتيبها لتشكيل SFEBs ، بينما يستخدم DM-3 لمزيد من الحفاظ على النمو.

يوضح هذا الفيديو عملية زراعة الخلايا العصبية على مصفوفة منقوشة متعددة الأقطاب الكهربائية (MEA) لإنشاء شبكات عصبية معيارية. تسمح هذه الطريقة بدراسة نقل الإشارات العصبية والتفاعلات الخلوية.

< ص الفئة = "jove_content">يعرض هذا الفيديو عملية تمييز iPSCs البشرية إلى الخلايا العصبية الحركية. يتضمن الأساس المنطقي استخدام iPSCs التي تم تعديلها وراثيا للتعبير عن عوامل نسخ محددة. عندما استزراع في وسائط تحتوي على دوكسيسيكلين, هذا المضاد الحيوي يؤدي إلى التعبير عن عوامل النسخ, وبالتالي تعزيز التمايز iPSC إلى أسلاف الخلايا العصبية الحركية. في النهاية ، يتم استزراع الأسلاف في وسط عصبي لإنتاج خلايا عصبية حركية ناضجة ووظيفية.