إجراء إصابات الدماغ الناجمة عن الليزر في نموذج الفئران

الملخص

المصدر: Kuts، R.، et al. إصابة الدماغ الناجمة عن الليزر في القشرة الحركية للفئران. J. Vis. Exp. (2020)

يوضح هذا الفيديو إجراء لتوليد إصابة دماغية دقيقة وخاضعة للرقابة في القشرة الحركية للفئران باستخدام الليزر.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. الإجراء التجريبي لإصابات الدماغ الناجمة عن الليزر

1. قم بتخدير الفئران بمزيج من 2٪ من الأيزوفلوران في الأكسجين ، مما يسمح بالتهوية التلقائية. تحقق من عمق التخدير الكافي عن طريق الضغط على الذيل بالملقط لمعرفة ما إذا كان منعكس الانسحاب غائبا.
2. باستخدام وسادة تسخين منظمة لدرجة حرارة المستقيم ، حافظ على درجة حرارة جسم الفئران الأساسية عند 37 درجة مئوية طوال الإجراء التجريبي.
3. قم بإزالة الشعر المحلي باستخدام ماكينة الحلاقة وتطهيره ب 70٪ كحول و 0.5٪ كلورهيكسيدين غلوكونات. كرر خطوة التطهير مرتين أخريين.
   ملاحظة: يجب أن يكون عرض الشق الجراحي حوالي 3 سم. قم بإزالة الشعر على الأقل 2 سم حول منطقة الشق.
4. ضع الجرذ على حامل رأس تجسيمي في وضع الانبطاح. قم بعمل شق 3 سم ليعكس فروة الرأس بشكل جانبي ويكشف المنطقة الواقعة بين بريجما ولامدا.
5. الحفاظ على التخدير من خلال مخروط الأنف.
6. استخدم ليزر نيوديميوم-YAG (Nd-YAG) (ذروة الطول الموجي 1064 نانومتر) لإدارة 50J × 10 نقاط ، مع مدة نبضة 1 ثانية ، إلى المنطقة المكشوفة من الجمجمة فوق نصف الكرة الأيمن.
7. تأكد من أن الجزء المولد لليزر من الجهاز على بعد 2 مم من المنطقة المكشوفة لإنتاج شعاع ليزر. تم اختيار 50J × 10 نقاط بعد تقييم دقيق لمجموعات الطاقة / السطح المختلفة. هذا المزيج فعال ولا يسبب تدمير العظام للجمجمة بعد تناوله لمدة تقل عن ثانية.
   ملاحظة: 2 مم هي المسافة بين طرف شعاع الليزر (من الكبل البصري الذي يتم تمريره من خلاله) وعظم الجمجمة. في حالة استخدام عدسة التركيز البؤري ، يجب حساب المسافة ، مع مراعاة زاوية ميل العدسة لتركيز الشعاع في منطقة الضرر المطلوبة. تأكد من السلامة المناسبة عند استخدام جهاز الليزر ، بما في ذلك التدريب المناسب وحماية العين.
8. أخرج الجرذ من الجهاز وأغلق فروة الرأس ب 3-0 خيوط جراحية حريرية.
9. توقف عن التخدير وأعد الجرذ إلى قفصه للشفاء. تطبيق 0.1 مل من 0.25٪ بوبيفاكائين موضعيا لتقليل ألم ما بعد الجراحة مباشرة.
   ملاحظه: يجب أن يستمر الإجراء بأكمله أقل من 5 دقائق إذا تم تنفيذه بشكل صحيح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات مصفوفات الدماغ والأنسجة سيجما - ألدريتش 15013 ميزان الوزن الرقمي سيجما - ألدريتش 4000 روبية الإيثانول 96٪ روميكال سائل قابل للاشتعال سخان مع ميزان حرارة لوحة التدفئة -1 الموديل: HEATINGPAD-1/2 تسريب الكفة ايه آي سي -500 إيزوفلوران ، USP 100٪ شركة بيرامامال للرعاية الحرجة NDC 66794-017 شفرات مشرط 11 سيجما - ألدريتش S2771 Sharplan 3000 Nd: YAG (عقيق ألومنيوم إيتريوم مخدر بالنيوديميوم) صناعات الليزر المحدودة حامل رأس تجسيمي KOPF 900 جنيه