علم أمراض الأعصاب

للكشف عن ضمور الدماغ ، ابدأ بشرائح تحمل أقسام الدماغ منزوعة البرافين من نماذج الفئران التنكسية العصبية في مختلف الأعمار.

لتصور هذه NPs ، خذ قسما ثابتا للدماغ البشري.

أضف الماء المقطر المزدوج لغسل الأقسام.

عالج الأنسجة برباع أكسيد الأوزميوم لتثبيت هياكل الخلايا ، بما في ذلك الليبوفوسين.

تجانس الأنسجة لإطلاق البروتينات في المخزن المؤقت. تمنع مثبطات الإنزيم البروتيني نشاط البروتياز ، مما يمنع تدهور البروتين.

أضف مخزن تخزين مؤقت يحتوي على منظف وعامل اختزال وصبغة تتبع.

احتضان بإنزيم محلل للبروتين لهضم البريونات الطبيعية ، مع ترك الركام المقاوم سليما.

احتضان بمحلول بيروكسيد الهيدروجين لتثبيط البيروكسيديز الداخلي ومنع التلوين غير المحدد.

تحتوي هذه الأقسام على تشابك ليفي عصبي - مجاميع غير طبيعية من بروتين تاو توجد داخل الخلايا العصبية في الحصين.

لتصور كبريتات الهيباران ، ابدأ بقسم أنسجة الحصين البشري المصاب الذي يحتوي على لويحات الأميلويد.

الطرد المركزي للعينة لحبيبات الحطام الخلوي وجمع المادة الطافية.

يحدد هذا البروتوكول استخراج البروتينات من الخلايا السرطانية العصبية. يتم غسل الخلايا بمخزن مؤقت وتحللها عن طريق الاضطراب الأنزيمي والميكانيكي. يتم جمع المادة الطافية الغنية بالبروتين المستخرجة بعد الطرد المركزي.

يوضح هذا الفيديو إجراء تلطيخ الخلايا العصبية القشرية للفئران بالفلورسنت للفحص المجهري. يستهدف البروتينات F-actin والبروتينات المتغصنة لتحليل السلامة الهيكلية وحساب كثافة F-actin ، وهو أمر بالغ الأهمية لدراسة وظيفة الخلايا العصبية وصحتها.

يوضح هذا الفيديو بروتوكول عزل ألياف الأميلويد من مستخلص أنسجة دماغ الفئران باستخدام الكثافة والتدرج المركزي وهضم البروتينات غير النشوانية.

يوضح هذا الفيديو إنشاء نموذج إصابة الخلايا العصبية باستخدام أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) في الخلايا العصبية الحبيبية المخيخية الأولية للفأر. يفصل عملية إحداث الإجهاد التأكسدي عن طريق إضافة تركيزات عالية من بيروكسيد الهيدروجين. يتسبب التعرض ل ROS في كسر خيوط الحمض النووي وعدم الاستقرار الجيني. بالإضافة إلى ذلك ، فإن أكسدة البروتينات الخلوية تضعف وظائفها ، بينما يضر بيروكسيد الدهون بسلامة الغشاء. يؤدي هذا الشلال إلى إطلاق السيتوكروم سي وتنشيط الكاسباز ، مما يؤدي إلى موت الخلايا المبرمج العصبي.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتقييم التأثيرات السامة للأعصاب للجسيمات النانوية باستخدام الخلايا الدبقية الصغيرة. يحدد خطوات تنشيط الخلايا الدبقية الصغيرة بالجسيمات النانوية ، وتصفية الوسائط المشروطة لعزل السيتوكينات المؤيدة للالتهابات المشتقة من الخلايا الدبقية الصغيرة ، واختبار سمية الخلايا العصبية تحت المهاد باستخدام الوسائط المكيفة.

يوضح الفيديو إحداث التنكس العصبي في ذبابة الفاكهة الأعصاب المقطعية عن طريق الإصابة الميكانيكية. يتم ضغط البشرة البطنية لليرقات المخدرة باستخدام ملقط لإحداث إصابة الأعصاب المقطعية. يتم الحفاظ على اليرقات المصابة بالطعام ، مما يسمح للإصابة بالتسبب في تنكس الخلايا العصبية الحركية في الأعصاب ، مما يتسبب في تعطيل توصيلها العصبية العضلية (NMJs).

يوضح هذا الفيديو إجراء لإنشاء نموذج فئران لمرض باركنسون عن طريق حقن السم العصبي 6-هيدروكسي دوبامين (6-OHDA) في الدماغ. يستهدف ضخ السموم العصبية في حزمة الدماغ الأمامي الإنسي (MFB) على وجه التحديد الخلايا العصبية الدوبامينية المسؤولة عن التحكم في المحركات ، مما يؤدي إلى تدميرها وتكرار أعراض مرض باركنسون.

في هذا الفيديو ، يتم عرض بروتوكول تدريجي للخلايا الجذعية الجنينية البشرية إلى عضيات عصبية. تتضمن الطريقة تحفيز تكوين وردة عصبية ، متبوعا بالنضج المتحكم فيه والثقافة النهائية على غشاء كاره للماء لتحقيق عضيات عصبية متطورة بالكامل.

يوضح هذا الفيديو تمايز الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs) إلى خلايا عصبية الدوبامين ، لتقديم نموذج لدراسة مرض باركنسون. يتم استزراع hESCs في وسط تحريض عصبي في صفيحة ميكروويل لتشكيل مجالات عصبية ثلاثية الأبعاد. ثم يتم استزراعها في وسط الحث العصبي لتعزيز التمايز إلى الخلايا العصبية السلفية الدوبامينية. يحدث النضج النهائي للخلايا العصبية في إدراج الثقافة في ظل ظروف واجهة الهواء والسائل ، مما ينتج عنه عضيات ثلاثية الأبعاد تتكون من خلايا عصبية دوبامين ناضجة.

يوضح هذا الفيديو تقييما في المختبر لانهيار مخروط نمو الخلايا العصبية بواسطة مجاميع β الأميلويد (Aβ). يؤدي علاج الخلايا العصبية بمجاميع Aβ إلى زعزعة استقرار الهيكل الخلوي ، مما يؤدي إلى انهيار مخاريط النمو عند طرف المحاور. تتم مقارنة الخلايا المعالجة بالخلايا الضابطة لتقييم مدى انهيار مخروط النمو.

< p class = "jove_content">يوضح الفيديو إجراء لإعداد شرائح الدماغ القشرية البشرية من مرضى الزهايمر لتحليل ترسب ببتيدات الأميلويد بيتا (Aβ) باستخدام قياس الطيف الكتلي للامتصاص بالليزر / التصوير بالتأين بمساعدة المصفوفة (MALDI-IMS). تشمل الخطوات تحضير الشرائح ، ومعالجة الأنسجة لتعزيز التأين ، وتحليل التوزيع المكاني لببتيدات أميلويد بيتا.

يوضح هذا الفيديو التلوين المناعي للخلايا العصبية المعالجة بمجاميع ألفا سينوكلين (αS). تتم معالجة الخلايا العصبية أولا بمجاميع αS. ثم يتم إصلاحها ونفاذها ومعالجتها بمحلول منع. تضاف الأجسام المضادة الأولية ، تليها أجسام مضادة ثانوية مصنفة بالفلورسنت وصبغة نووية. ثم يتم تركيب العينة ومراقبتها تحت المجهر.

< p class = "jove_content" >يوضح هذا الفيديو إجراء للحث على تنكس الشبكية في أسماك الزرد البالغة باستخدام إصابة الليزر. يستهدف الليزر الخلايا المستقبلة للضوء في شبكية العين ، مما يؤدي إلى موت الخلايا وعملية تنكسية. ينشط هذا الضرر خلايا مولر الدبقية (MG) ، مما يؤدي إلى عدم تمايزها إلى أسلاف الخلايا الجذعية التي تساعد في تجديد الشبكية.

يوضح هذا الفيديو إجراء حقن ببتيدات الأميلويد أحادية اللون في الدماغ الأمامي لسمك الزرد البالغ لتوليد سمية الأميلويد ، مما يحاكي الضرر العصبي الذي يظهر في مرض...

يوضح هذا الفيديو بروتوكول قياس تنشيط مستقبلات الرائحة في الخلايا المنقولة باستخدام مستشعر حيوي أحادي فوسفات الأدينوزين الدوري (cAMP) واكتشاف التلألؤ. يتم تطبيق الطريقة لدراسة تفاعلات المستقبلات والترابط ومسارات الإشارات في الخلايا العصبية الشمي.

يوضح هذا الفيديو إجراء حقن ببتيدات أميلويد بيتا ، وكلوريد الألومنيوم ، وعامل النمو الالتهابي العصبي ، والذي يساعد مجتمعة في تكوين لويحات الأميلويد السامة في منطقة الحصين. هذا يسبب ضعف الذاكرة في الفئران ، وهو سمة من سمات مرض الزهايمر.

يوضح هذا الفيديو التسريب التجسيمي الدقيق لبيتا الأميلويد في التلفيف المسنن لإنشاء نموذج فأر لمرض الزهايمر. يؤدي التحديد الدقيق للإحداثيات والتسليم المتحكم فيه لبروتينات بيتا النشوانية إلى تدهور الخلايا العصبية ، وتعطيل معالجة الذاكرة والمساهمة في تطور مرض الزهايمر.

يوضح هذا الفيديو حقن ألياف ألفا سينوكلين في الفأر للحث على التهاب الأعصاب. يتم حقن الألياف داخل الصفاق في فأر معدل وراثيا يعبر عن بروتينات ألفا سينوكلين الطافرة. عند الوصول إلى الجهاز العصبي المركزي ، تدخل الألياف الخلايا العصبية وتحفز تراكم البروتينات الطافرة. تنتشر الركام إلى الخلايا العصبية المجاورة والخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا النجمية. يؤدي التعرف على المجاميع إلى تحفيز الخلايا الدبقية الصغيرة للحث على التهاب الأعصاب ، مما يؤدي إلى إتلاف الخلايا العصبية.

يوضح هذا الفيديو إجراء التصوير في الجسم الحي ل C. ايليجانس التي تعبر عن بروتينات شبيهة بالبريون الموسومة ببروتين الفلورسنت الأحمر. يتضمن البروتوكول تثبيت الديدان الخيطية على وسادة الاغاروز للفحص المجهري متحد البؤر بفاصل زمني ، مما يكشف عن تراكم البروتين ونقله داخل الخلايا وفيما بينها. هذه التقنية ضرورية لدراسة تراكم البروتين المرتبط بالأمراض التنكسية العصبية.

يوضح هذا الفيديو عملية حقن ناقل فيروسي في مادة الفئران السوداء لنمذجة مرض باركنسون. يحدد خطوات تحضير الفئران ، والحقن الدقيق للناقل الفيروسي في المادة السوداء ، وإجراءات التعافي.

يشرح هذا الفيديو عملية عزل وإثراء مجاميع البروتين غير القابلة للذوبان في المنظفات من أنسجة المخ البشري المجمدة بعد الوفاة. يوضح الخطوات الرئيسية ، بما في ذلك التجانس ، ومعالجة المنظفات ، والصوتنة ، والطرد المركزي الفائق لفصل وتنقية الركام غير القابل للذوبان. تتضمن الخطوة الأخيرة إذابة الركام في مخزن اليوريا لمزيد من التحليل.

يوضح هذا الفيديو تصوير وقياس مجاميع البروتين في أدمغة ذبابة الفاكهة المعدلة وراثيا. يتم إصلاح الأدمغة وغسلها ومعالجتها بعامل مضاد للبهتان قبل تركيبها. يتم التقاط الصور باستخدام مجهر متحد البؤر وتحديدها كميا لمراقبة انتقال مجاميع البروتين الطافرة.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا للتحقيق في التوطين المشترك لمستقبلات الأوريكسين والقنب في أنسجة دماغ السمنة الزرد البالغة الطبيعية والناجمة عن النظام الغذائي (DIO) باستخدام التألق المناعي.

يوضح هذا الفيديو عملية تحديد تراكم ألفا سينوكلين في الخلايا العصبية الدوبامين للفأر الجنيني المعالجة مسبقا بألياف ألفا سينوكلين المشكلة مسبقا. يحدد خطوات إصلاح وتلطيخ وقياس الخلايا العصبية الدوبامين التي تحتوي على مجاميع ألفا سينوكلين باستخدام التألق المناعي.

يوضح هذا الفيديو كيفية قياس نشاط البروتيازوم في مقصورات فرعية مختلفة من اللوزة الجانبية من أدمغة الفئران المكيفة بالخوف والتحكم فيها باستخدام مقايسة الببتيد الفلوري. يشق البروتيازوم ركيزة الببتيد الفلوروجينيك ، ويطلق جزيئات الفلورسنت ، والتي يتم قياسها كميا باستخدام قارئ الألواح لتقييم نشاط البروتيازوم في كسور البروتين النووي والمشبكي. يشير النشاط النووي المتزايد إلى تغييرات في التعبير الجيني ، بينما يشير انخفاض النشاط المشبكي إلى استقرار البروتين الضروري للحفاظ على الذاكرة على المدى الطويل.

يوضح هذا الفيديو عملية إحداث خلل الحركة الناجم عن الليفودوبا في نموذج الفئران المبتلا بمرض باركنسون عن طريق إعطاء ليفودوبا جنبا إلى جنب مع مثبط تحويل الدوبامين. الحقن المتكررة تفرط في تحفيز الخلايا العصبية في الدماغ, مما يؤدي إلى خلل وظيفي حركي.

يوضح هذا الفيديو تحريض ألم الاعتلال العصبي الفموي الوجهي في نموذج الفئران عن طريق ربط العصب تحت الحجاج. ينتج عن هذا تلف الأعصاب والتهابها ، مما يتسبب في إشارات ألما غير طبيعية وتحاكي حالات الألم المزمن ، والتي يمكن استخدامها لدراسة مقايسة الألم الفموي والوجهي.

يوضح هذا الفيديو طريقة الكشف عن الخلايا العصبية المتقدمة في السن في الأقسام العضوية القشرية عن طريق تلطيخ نشاط بيتا جالاكتوزيداز ، والذي يرتفع في الخلايا القديمة. يشق الإنزيم ركيزة لإنتاج منتج أزرق ، متبوعا بمراقبة مجهرية للخلايا العصبية الملطخة.

يوضح هذا الفيديو توليد نموذج فأر لإزالة الميالين البؤري باستخدام حقن الليزوفوسفاتيديل كولين (LPC) من نقطتين. تتعرض جمجمة الفأر المخدر. يتم تحديد إحداثيات الحقن ، ويتم حفر حفرة لتمكين حقن LPC في المواقع المستهدفة. يحفز LPC إزالة الميالين البؤري للخلايا العصبية عن طريق الالتهاب ، بينما يضمن الحقن المكون من نقطتين استدامته.

يوضح هذا الفيديو عملية تصور الخلايا العصبية الداخلية المملوءة بالسيتين الحيوي في قسم الحصين للفئران ، مما يسلط الضوء على هويته الكيميائية العصبية من خلال استخدام أجسام مضادة محددة وفحص مجهر فلوري.

يوضح هذا الفيديو التلوين الكيميائي المناعي لبروتين S-100 في أقسام خزعة شفط المستقيم. يتم حظر الأقسام المسترجعة بالمستضد ومعالجتها بالأجسام المضادة الأولية ، تليها الأجسام المضادة الثانوية ضد S-100 ، وهي علامة على مرض هيرشسبرونج. تضاف الركيزة الكروموجينيك لتلطيخ الخلايا المستهدفة. يتم تجفيف العينات وتركيبها قبل تصورها تحت المجهر.

يوضح هذا الفيديو طريقة إحداث إزالة الميالين في الخلايا العصبية للحبل الشوكي للفأر باستخدام حقن الليزولسيثين ، متبوعا بإعادة الميالين من خلال هجرة وتمايز الخلايا السليفة قليلة التغصن. تضعف العملية ثم تستعيد تدريجيا نقل الإشارات العصبية.

يوضح هذا الفيديو عملية تحويل الخلايا العصبية البشرية بفيروس عدسي يشفر بروتين تاو بشري متحور ببروتين فلورسنت أصفر (YFP) لدراسة تراكم البروتين. يحدد الخطوات من دخول الفيروس إلى تعبير تاو المتحور ، وتبلغ ذروتها في تكوين مجاميع تاو السيتوبلازمية المرئية في الخلايا العصبية.

يوضح هذا الفيديو تصنيف الخلايا العصبية بالأجسام المضادة لمجمعات السلسلة التنفسية للميتوكوندريا ، والبروتين المرتبط بالحمض النووي للميتوكوندريا ، وبروتين الغشاء الخارجي للميتوكوندريا ، متبوعا بقياس التدفق الخلوي لتحديد مستوياتها.

يوضح هذا الفيديو إجراء قياس نشاط γ السيكرتيز في الخلايا البشرية المعدلة وراثيا باستخدام نظام محفز للتتراسيكلين. تتضمن العملية تحفيز التعبير الجيني APP مع التتراسيكلين ، وتوليد ببتيدات β الأميلويد ، وتنشيط إنتاج لوسيفيراز. ثم يتم قياس التلألؤ البيولوجي الناتج عن تفاعل الركيزة اللوسيفيراز ، مما يعكس نشاط γ سيكريزيز.

يحدد هذا البروتوكول استخدام الكيمياء النسيجية المناعية لتحديد مناطق الموضع الخشبي في أقسام دماغ الفئران. من خلال استهداف الدوبامين β-هيدروكسيلاز بالأجسام المضادة المسماة بالفلوروفور الأخضر ، يتم تصور الخلايا العصبية المنتجة للنورادرينالين على أنها مضان أخضر تحت المجهر.

يوضح الفيديو عملية استخدام مسبار غسيل الكلى المجهري لجمع البروتينات خارج الخلية من السائل الخلالي (ISF) لدماغ الفأر. يتم إدخال مسبار غسيل الكلى المجهري ، المجهز بغشاء شبه منفذ عالي الوزن الجزيئي ، في دماغ الفأر المخدر عبر قنية توجيه مزروعة. يسمح المسبار ، المتصل بالمضخات ، للمخزن المؤقت الفسيولوجي باختراق أنسجة المخ والاختلاط مع قوى الأمن الداخلي. تنتشر البروتينات الموجودة في قوى الأمن الداخلي عبر الغشاء شبه المنفذ ويتم جمعها لتحليلها.

يوضح هذا الفيديو طريقة إحداث الإجهاد المزمن في الفأر من خلال الشلل المتكرر ، مما يؤدي إلى إطلاق الكورتيكوستيرون وتقليل نشاط مستقبلات الغلوتامات في الخلايا العصبية ، مما يؤدي إلى سلوك شبيه بالاكتئاب.

يوضح هذا الفيديو إجراء تحضير وعلاج شرائح دماغ الفئران باستخدام ببتيد سام للأعصاب لتقليد التنكس العصبي. يسمح البروتوكول بتحليل الأحداث التنكسية العصبية من خلال المقارنة المباشرة للتحكم والشرائح المعالجة في نفس المستوى التشريحي.

يوضح هذا الفيديو استخدام الخلايا العقدية الجذرية الظهرية المنقولة لدراسة إطلاق الناقل العصبي عن طريق تحفيزها باستخدام ناهض مستقبلات الببتيد العصبي.

يوضح هذا الفيديو التلوين الكيميائي المناعي للألياف الكولينية في النواة القاعدية لمنطقة ماينرت من أقسام دماغ الفئران. يتم حظر الأقسام ومعالجتها بأولي ضد أسيتيل ترانسفيراز الكولين, تليها الأجسام المضادة الثانوية البيوتينيل. تضاف مجمعات أفيدين-بيوتين-بيروكسيداز ، والتي ترتبط بالأجسام المضادة الثانوية ، تليها الركيزة الملونة. ثم يتم تجفيف الأقسام وتركيبها قبل تصورها تحت المجهر.

يوضح هذا الفيديو تقييم امتصاص الدوبامين في المشابك العصبية التي يتم حصادها من أدمغة الفئران. يحدد خطوات تحضير المشابك العصبي لامتصاص الدوبامين عبر ناقلات الدوبامين ، ومعالجتها بتركيزات متفاوتة من الدوبامين المصنف بالإشعاع ، وعزل الجسيمات المشبكة ، وقياس النشاط الإشعاعي لتحديد امتصاص الدوبامين.

يوضح هذا الفيديو إجراء تلطيخ شرائح دماغ الفئران الثابتة التي تحتوي على الخلايا العصبية الداخلية المملوءة بالسيتين الحيوي. يتضمن البروتوكول الحضانة بمركب أفيدين بيوتين (ABC) ، والتلوين باستخدام HRP والركيزة الكروموجينيكية ، والحفاظ على الهياكل باستخدام رابع أكسيد الأوزميوم ، وتضمين الأنسجة في الراتنج للتصوير.

يوضح هذا الفيديو الكشف عن تخليق الحمض النووي الريبي لمستقبلات السيروتونين باستخدام مجسات قليل النوكليوتيدات في أنسجة دماغ الفئران المتأثرة بمتلازمة السيروتونين. يتضمن البروتوكول المعالجة المسبقة للأنسجة ، وتهجين المسبار ، والكشف الأنزيمي لتصور وتحديد تعبير الحمض النووي الريبي لمستقبلات السيروتونين تحت المجهر.

في هذا الفيديو ، تم استخدام شريحة دماغ مخيخ الفأر للتحقيق في التفاعلات المشبكية بين الألياف المتوازية وألياف التسلق وخلايا بركنجي ، والتي تعتبر ضرورية للتحكم الحركي. أدى تحفيز ألياف التسلق إلى الاكتئاب طويل الأمد (LTD) في خلايا بركنجي ، مما يضعف القوة المشبكية ويؤدي إلى انخفاض الاستجابة لتحفيز الألياف المتوازية.

يوضح هذا الفيديو تلطيخ التألق المناعي لدماغ ذبابة الفاكهة المعدلة وراثيا للتصوير أحادي الخلية للخلايا الدبقية. يعبر الدماغ عن البروتينات المستهدفة بالغشاء المدمجة مع مجموعات مختلفة من الحلقات المستضدية تحت سيطرة نظام إعادة التركيب الخاص بالدبق. الأدمغة المعزولة والثابتة ملطخة بالأجسام المضادة الأولية الخاصة بالحواتم المستضدية ، تليها الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالفلوروفور. يتيح هذا التصنيف التصوير المتزامن لمجموعات الخلايا الدبقية المختلفة عبر مناطق الدماغ المختلفة.

يوضح هذا الفيديو إجراء جراحيا موجها تجسيما لاستئصال القشرة السمعية في الفئران. تشمل الخطوات تحديد المعالم التشريحية في فأر مخدر مؤمن في إطار تجسيمي ، وإنشاء نافذة على الجمجمة فوق القشرة السمعية ، وشفط الطبقات القشرية ، وتوفير رعاية ما بعد الجراحة لتقييم تأثير الاستئصال على معالجة الصوت.

في هذا الفيديو ، نصف إجراء إجراء تلطيخ التألق باستخدام الفحص المجهري الفلوري لإثبات تلطيخ الفالويد لخلايا القمة العصبية المزروعة على الهلاميات المائية ذات الصلابة المتفاوتة لتصور وتحليل تنظيم الهيكل الخلوي.

يوضح هذا الفيديو التشابك بين البروتينات السطحية العصبية باستخدام Bis-sulfosuccinimidyl suberate أو BS3. يتم تقسيم دماغ الفأر المعزول والمبرد بشكل تاجيلي. يتم استخراج المنطقة المرغوبة من الأقسام ، وفرمها ، ومعالجتها باستخدام BS3. BS3 يربط البروتينات السطحية مثل مستقبلات GABA ، تاركا البروتينات الداخلية دون تغيير. يتم إخماد التفاعل بالجلايسين قبل معالجة العينات لمزيد من التحليل.

يوضح الفيديو تقنية لقياس امتصاص الجلوكوز في ذبابة الفاكهة الخلايا العصبية الحركية اليرقية باستخدام مستشعر الجلوكوز داخل الخلايا القائم على نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). بعد تشريح اليرقات لفضح الحبل العصبي البطني ، يتم تصور الخلايا العصبية الحركية من خلال التألق المنبعث من الفلوروفور المتبرع بالمستشعر. عند تحفيزه بالجلوكوز ، يؤدي FRET بين الفلوروفورات المانحة والمستقبلة للمستشعر إلى انبعاث التألق من المستقبل ، مما يتيح مقارنة امتصاص الجلوكوز بين يرقات التحكم واليرقات الطافرة مع استقلاب...

يوضح هذا الفيديو إجراء تلطيخ قسم أنسجة دماغ الفئران الثابت مع الخلايا النجمية المصنفة بالفلورسنت باستخدام الأجسام المضادة الأولية والثانوية والتقاط صور الخلايا النجمية الملطخة من خلال الفحص المجهري متحد البؤر.

يوضح هذا الفيديو كيفية عزل خلايا بركنجي من أنسجة المخيخ البشري بعد الوفاة باستخدام التشريح المجهري بالليزر.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا مفصلا خطوة بخطوة لإعداد أقسام أنسجة دماغ الفئران المجمدة لتحليلات المصب.

يوضح هذا الفيديو تطوير نموذج ثقافة الأعضاء المؤيد للالتهابات والتنكسية لمرض القرص الفقري في المرحلة المبكرة (IVD) باستخدام عامل نخر الورم α. يحدد إجراء حقن عامل نخر الورم α في القرص الفقري ويشرح الآليات التي من خلالها يتسبب عامل نخر الورم α في التهاب وتدهور الأنفاب.

يوضح هذا الفيديو تفكك أنسجة دماغ الفئران المجمدة إلى معلق أحادي الخلية باستخدام الهضم الأنزيمي والتجربة الميكانيكية. يتم تثبيت الخلايا المحضرة ونفاذها بالإيثانول للتطبيقات النهائية مثل قياس التدفق الخلوي أو تحليل التعبير الجيني.

يوضح الفيديو تحليل حالة البالميتويل لبروتينات غشاء الخلية المعزولة من أنسجة دماغ الفئران. تتضمن العملية تعريض السيستين غير البالميتويليات ومنعها ، ثم استخدام بوليمر يرتبط بالسيستين البالميتويل ، مما يساعد في تقييم حالة البالميتويلاسیون للبروتينات المعزولة.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتصنيع ميكروبيدات البوليمر التي تغلف خلايا إفراز أميلويد بيتا السامة للأعصاب. تتم معالجة معلق الخلية والبوليمر من خلال جهاز تصنيع الميكروبيدات ، مع هلام البوليمر الذي يتم تحقيقه عن طريق الربط المتقاطع للكالسيوم ، وتشكيل حبيبات ميكروبية كروية حول الخلايا. يسمح البوليمر بتكاثر الخلايا مع السماح بإطلاق أميلويد بيتا المتحكم فيه على المدى الطويل ، مما يحاكي تراكمه في مرض الزهايمر.

يوضح الفيديو إجراء خطوة بخطوة لتشريح دماغ بشري ثابت بعد الوفاة بشكل متماثل ، وإعداد كتل الأنسجة الأصغر لمزيد من التحليل.

يوضح هذا الفيديو إجراء تقييم قدرة احتباس الكالسيوم في الميتوكوندريا من خلال مراقبة التغيرات في الوقت الفعلي في التألق مع امتصاص الميتوكوندريا للكالسيوم. هذا الاختبار مفيد لدراسة وظيفة الميتوكوندريا والعمليات المتعلقة بالكالسيوم ، بما في ذلك موت الخلايا المبرمج والأمراض التنكسية العصبية.

يوضح هذا الفيديو تأثير التسريب المستمر للمخدرات في دماغ الفأر على مستويات الجلوكوز في الدم. يتم تقييم استقلاب الجلوكوز عن طريق جمع الدم من ذيل الفأر الصائم وقياس مستويات الجلوكوز قبل وبعد إعطاء الجلوكوز عن طريق الفم. يتم تقييم تحمل الأنسولين عن طريق حقن الأنسولين في الفأر ، مع تسجيل مستويات الجلوكوز على فترات محددة.

في هذا الفيديو، يخضع فأر مخدر لعملية عينية حيث يتم حقن الخرز المغناطيسي في الغرفة الأمامية تحت مجال مغناطيسي لمنع زاوية القزحية القزحية. يعيق هذا الانسداد الشبكة التربيقية ، ويمنع تصريف الخلط المائي ويؤدي إلى زيادة ضغط العين ، مما يؤدي إلى إتلاف الخلايا العقدية الشبكية والعصب البصري. هذا يطور حالة شبيهة بالجلوكوما.

المصدر: Kummari, E., et. al., التشريح الدقيق لالتقاط الليزر - عرض توضيحي لعزل الخلايا العصبية الدوبامين الفردية والمنطقة السقيفية البطنية بأكملها., J. Vis. Exp. (2015) في هذا الفيديو، نوضح بروتوكول الكيمياء المناعية للخلايا العصبية الدوبامين في أقسام أنسجة المخ للتشريح الدقيق اللاحق لالتقاط الليزر.

المصدر: Bennett، S. A.، وآخرون، توصيف تعديلات التعديل اللاحق للترجمة في نماذج اعتلال البروتين التنكسي العصبي للخميرة. J. Vis. Exp. (2019). يوضح هذا الفيديو إجراء تقييم تعديلات الهيستون في خلايا الخميرة التي تفرط في التعبير عن البروتينات التنكسية العصبية. تشمل الخطوات تحلل الخلايا ، والطرد المركزي ، والرحلان الكهربائي ، ونقل الغشاء ، والكشف القائم على الأجسام المضادة للهيستونات المعدلة.

المصدر: Yan، Z.، et al. تقييم التأثير المضاد للاكتئاب ل Xiaoyaosan على الفئران المصابة بالإجهاد المزمن. J. Vis. Exp. (2019). يوضح الفيديو عملية إنشاء نموذج فأر للاكتئاب المزمن الناجم عن الإجهاد وتقييم السلوكيات الاكتئابية. يؤدي التطبيق المزمن لضغوط مختلفة إلى إطلاق الكورتيكوستيرون ، مما يؤدي إلى الإفراط في إثارة الخلايا العصبية وموت الخلايا العصبية في نهاية المطاف ، مما يؤدي إلى أعراض شبيهة بالاكتئاب في الفئران.

المصدر: Bétemps، D.، et al.، الكشف عن α-synuclein المرتبط بالمرض عن طريق ELISA المعزز في دماغ الفئران المعدلة وراثيا التي تفرط في التعبير عن A53T البشري α-synuclein. J. Vis. Exp. (2015). يوضح هذا الفيديو إجراء الكشف عن البروتين المرتبط بالأمراض التنكسية العصبية α-سينوكلين في أنسجة المخ من الفئران المعدلة وراثيا باستخدام ELISA. تشمل الخطوات تجانس الأنسجة ، والطرد المركزي ، واكتشاف ELISA لبروتين α-synuclein لتحديد أشكاله المرتبطة بالمرض.

المصدر: Wulf, M., et.al. بروتوكول قائم على التشريح المجهري بالليزر لتحليل LC-MS / MS للملف البروتيني لحبيبات الميلانين العصبي. J. Vis. Exp. (2021). يوضح هذا الفيديو تحليل عينات الببتيد من حبيبات الميلانين العصبي (NMGs) المعزولة من أنسجة المخ البشرية بعد الوفاة. يتم فصل الببتيدات أولا باستخدام كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC) ثم يتم تحليلها بواسطة قياس الطيف الكتلي لتحديد نسب الكتلة إلى الشحنة (م / ز). يتم تجزئة الببتيدات المستهدفة لتحديد التعديلات اللاحقة للترجمة وتتم مقارنة البيانات...

المصدر: Zhi، L. et al.، قياس معدل استهلاك الأكسجين في الشرائح العقدية الحادة من الفئران البالغة. J. Vis. Exp. (2022). يوضح هذا الفيديو كيفية قياس معدل استهلاك الأكسجين في الميتوكوندريا (OCR) في شرائح الدماغ المخططة للفأر. يوضح بالتفصيل خطوات تحضير لوحة المناديل وخرطوشة المستشعر ، وتحميلها في محلل التدفق ، ويشرح العمليات الخلوية الكامنة وراء أنماط التعرف الضوئي على الحروف.

المصدر: يوشيا، س. س.، وآخرون. دراسة وظائف وأنشطة ناقل K-Cl العصبي KCC2 باستخدام النشاف الغربي. J. Vis. Exp. (2022). يوضح الفيديو خطوات الكشف عن وقياس بروتين ناقل كلوريد البوتاسيوم الفسفوري 2 (KCC2) في محللة الخلية. تتضمن هذه العملية الترسيب المناعي لعزل KCC2 الفسفوري والتلألؤ الكيميائي لتحديد كمية البروتين المعزول.

المصدر: Lani-Louzada، R.، وآخرون . الكي الكامل للضفيرة الوعائية القزحية للجلوكوما المستحثة جراحيا في القوارض. J. Vis. Exp. (2022). يوضح هذا الفيديو القياس الكمي للخلايا العقدية الشبكية من شبكية الفئران الثابتة كيميائيا المعرضة للكي الكامل للضفيرة الوعائية القصوية. تشمل العملية النفاذية ، وتلوين الأجسام المضادة ، والتلوين النووي المضاد ، متبوعا بالتصور تحت مجهر التألق لتقييم تأثير الضغط المرتفع داخل العين على بقاء الخلايا العقدية الشبكية.

المصدر: Jensen, V. N., et al. القياس المتكرر لنشاط عضلات الجهاز التنفسي والتهوية في نماذج الفئران للأمراض العصبية العضلية. J. Vis. Exp. (2017). يوضح هذا الفيديو طريقة تسجيل إشارات التحجم المتزامن وتخطيط كهربية العضل في نموذج فأر ALS يتحرك بحرية. يتضمن الإجراء استخدام أقطاب كهربائية مزروعة وجهاز إرسال لالتقاط نشاط العضلات ، جنبا إلى جنب مع غرفة تخطيط التحجم لمراقبة أنماط التنفس ، للتحقيق في دور العضلات الملحقة في فأر التصلب الجانبي الضموري.

المصدر: جيانغ، إكس، وآخرون. إحفز وتقييم نموذج الفئران لقصر النظر التجريبي. J. Vis. Exp. (2019) يوضح هذا الفيديو إجراء لتحفيز قصر النظر في الماوس من خلال تثبيت إطار عدسة مخصص. يتم تثبيت الإطار على الجمجمة المكشوفة بمادة لاصقة للأسنان ، ويتم إدخال العدسات المقعرة لتحويل النقطة المحورية خلف شبكية العين. يحفز هذا الإعداد استطالة مقلة العين مما يؤدي إلى قصر النظر.

المصدر: جولي، س.، et.al. الجمع بين التألق المزدوج في الموقع التهجين مع الملصقات المناعية للكشف عن التعبير عن ثلاثة جينات في أقسام دماغ الفأر. J. Vis. Exp. (2016). يوضح هذا الفيديو استخدام التألق المزدوج في التهجين في الموقع لتصور التعبير عن هدفين من الحمض النووي الريبي في أقسام دماغ الفأر. يتضمن البروتوكول الكشف المتسلسل عن الحمض النووي الريبي باستخدام مجسات مصنفة بفلوريسين إيزوثيوسيانات وديجوكسيجينين ، متبوعا بتضخيم الإشارة الأنزيمية لتعزيز الحساسية. يتيح التألق الناتج تحليل التوطين المشترك...

المصدر: Baleriola, J., et . al. ، الكشف عن mRNAs المترجمة محوريا في أقسام الدماغ باستخدام التهجين في الموقع عالي الدقة. J. Vis. Exp. (2015) يوضح هذا الفيديو اكتشاف mRNA داخل المحاور الكولينية في شرائح الحصين الثابتة للفأر باستخدام تهجين الفلورسنت في الموقع وتلوين الأجسام المضادة. يكشف المجهر الفلوري عن التوطين المكاني ل mRNAs الموسومة بالمسبار وأستيل ترانسفيراز الكولين في الخلايا العصبية كولينية.

المصدر: Zhang، J.، et al. تحليل الذهب المناعي الكمي عالي الدقة لمستقبلات الغشاء في نقاط الاشتباك العصبي الشريطية في شبكية العين. J. Vis. Exp. (2016) يوضح هذا الفيديو تقنية مجهر إلكتروني لتصور توطين مستقبلات الناقل العصبي في نقاط الاشتباك العصبي. تحتوي أقسام الشبكية على خلايا عقدية شبكية تظهر مستقبلات ناقلات عصبية مرتبطة بالغشاء ويتم تصنيفها بالوحدة الفرعية لسم الكوليرا B (CTB). عند تسمية العلامات بالأجسام المضادة المترافقة مع الجسيمات النانوية الذهبية وتلوين القسم بالمعادن الثقيلة ، يتم تصور...

المصدر: de March, C. A. et. al., المراقبة في الوقت الفعلي في المختبر لتنشيط مستقبلات الرائحة بواسطة رائحة في مرحلة البخار. J. Vis. Exp. (2019) يوضح هذا الفيديو طريقة مراقبة التنشيط في الوقت الفعلي لمستقبلات الرائحة في خلايا الثدييات المؤتلفة باستخدام قياس اللمعان. يؤدي ارتباط الرائحة إلى تنشيط بروتين G وإنتاج cAMP ، مما يؤدي إلى تنشيط بروتينات glosensor التي تنبعث منها تلألؤ عند ربط الركيزة ، مما يوفر مقياسا كميا لاستجابة المستقبلات.

المصدر: Alluri, H., et al. الحرمان من الأكسجين والجلوكوز وإعادة الأكسجين كنموذج لإصابة التروية في المختبر لدراسة الخلل الوظيفي في الحاجز الدموي الدماغي. J. Vis. Exp. (2015). يوضح الفيديو توطين الفلورسنت لبروتينات التوصيل الضيقة وألياف الإجهاد في الخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة في دماغ الفئران (RBMECs). في الطبقة الأحادية المجهدة ، يتم استخدام الأجسام المضادة ذات العلامات الفلورية لتمييز بروتينات التوصيل الضيقة ، بينما يقوم الفالودين الموسوم بالفلوروفور بتسمية ألياف الإجهاد. ثم يتم...

المصدر: Eid، L. & Parent، M. تحضير أنسجة دماغ الرئيسيات غير البشرية للكيمياء المناعية والفحص المجهري الإلكتروني. J. Vis. Exp. (2017). يوضح هذا الفيديو تحضير أنسجة دماغ الرئيسيات غير البشرية المثبتة بالألدهيد باستخدام الكيمياء المناعية المضمنة مسبقا للفحص المجهري الإلكتروني. يحدد خطوات وضع العلامات المناعية على بروتين عصبي معين ، متبوعا بتفاعل بيروكسيداز ينتج راسب ملونا ، مما يتيح تصور البروتين المستهدف في المجهر الإلكتروني.

المصدر: Evilsizor, M. N., et. al. ، التمهيدي للكيمياء المناعية على أنسجة دماغ الفئران المقطوعة بالتبريد: مثال على تلطيخ الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا العصبية. J. Vis. Exp. (2015) يوضح هذا الفيديو إجراء تلطيخ الكيمياء المناعية خطوة بخطوة على أنسجة دماغ الفئران التي تم قطعها بالتبريد لتصور الترتيب المكاني للخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا العصبية.

المصدر: كيرشنر ، ك. ، وآخرون ، طريقة لإزالة الأنسجة الكارهة للماء لأنسجة دماغ الفئران. J. Vis. Exp. (2020). يوضح هذا الفيديو طريقة إزالة الأنسجة الكارهة للماء لعينة من أنسجة دماغ الفئران. يتم تجفيف العينة بالتتابع في الميثانول ، ومعالجتها بمزيج ثنائي كلورو الميثان والميثانول لإذابة الدهون والأصباغ ، ونقلها إلى ثنائي بنزيل الأثير لإزالة الأنسجة بالكامل ، مما يتيح التصوير التفصيلي دون تقطيع رقيق.

للكشف عن هذه البكتيريا ، خذ قسما من الدماغ البشري منزوع البارافينات والمعاد ترطيبه والمصابين بالبكتيريا مع مستضدات بروتينية مكشوفة وفوسفاتيز داخلي غير نشط.

يصيب الفيروس الخلايا العصبية الهرمية في القشرة الدماغية ، والبروتينات الفيروسية المعبر عنها تتموضع داخل الهياكل الحبيبية داخل الهيولى والمعروفة باسم أجسام التضمين.

اغسل لإزالة البارافين ، ثم أعد ترطيب الأنسجة باستخدام تقليل تركيزات الكحول.

يوضح هذا الفيديو عزل سطح الخلية والبروتينات داخل الخلايا عن ثقافة الخلايا النجمية. يتم وضع ثقافة الخلايا النجمية على الجليد لتثبيط الالتقام الخلوي ، ثم يتم تصنيف بروتينات سطح الخلية بكاشف البيوتينيل. يتم تحلل الخلايا لإطلاق بروتينات سطح الخلية الحيوية والبروتينات داخل الخلايا غير الحيوية. أخيرا ، يتم استخدام الخرز المطلي بالستربتافيدين لفصل بروتينات سطح الخلية الحيوية عن البروتينات داخل الخلايا.

يوضح هذا الفيديو عملية الحقن داخل المخ البطيني لدراسة توزيع الفيروس المضخم للخلايا الفئران (MCMV) في دماغ الفأر حديثي الولادة. يتم حقن MCMV ، المصمم للتعبير عن بروتين فلورسنت أخضر محسن (EGFP) للرؤية ، في البطين الجانبي لدماغ جرو الفأر. يدور الفيروس المحقون عبر السائل النخاعي ، ويصيب الخلايا في المنطقة حول البطينين ، بما في ذلك المنطقة الهامشية والضفيرة المشيمية والمنطقة تحت البطينية.

يوضح هذا الفيديو إنشاء نموذج في المختبر لعدوى فيروس زيكا في الدماغ النامي. العضيات الدماغية البشرية التي تحتوي على وريدات من الخلايا الجذعية والخلايا السلفية العصبية (NPCs) والخلايا العصبية مصابة بفيروس زيكا. يصيب الفيروس الشخصيات غير القابلة للعب ويؤدي إلى موت الخلايا المبرمج ، مما يعطل نمو العضوية.

يوضح الفيديو الحقن المجهري لعديدات السكاريد الدهنية (LPS) في أدمغة يرقات سمك الزرد للحث على التهاب الأعصاب. يتم وضع اليرقات على طبق مبطن بالأغروز ، ويتم إدخال الإبرة في بطينين الدماغ ، ويتم حقن LPS. يؤدي LPS المحقون إلى استجابة مناعية تؤدي إلى التهاب الأعصاب.

يوضح هذا الفيديو تقييم صحة الميتوكوندريا في الخلايا النجمية المعدلة وراثيا ، والتي تعبر عن بروتين فلوري داخل الميتوكوندريا. يساعد البروتين على تتبع التغيرات في صحة الميتوكوندريا حيث يتغير تألقه من الأخضر إلى الأحمر ، مما يشير إلى الإجهاد أو التلف. يتم التقاط الصور وتحليلها باستخدام معلمات مختلفة.

يوضح هذا الفيديو إجراء حقن فيروسات فيروس نقص المناعة البشرية الخيالي في قشرة دماغ الفئران ، حيث يندمج الحمض النووي الريبي للفيروس في جينوم المضيف ، ويتكاثر وينتشر لإنشاء عدوى نشطة بفيروس نقص المناعة البشرية في النموذج التجريبي.

يوضح هذا الفيديو إنشاء نموذج ماوس مصاب بعدوى الجهاز العصبي المركزي. يتم حقن الجرو الرضيع بالفيروس داخل الجمجمة وداخل الصفاق. ينتشر الفيروس ، ويصيب الجهاز العصبي المركزي مسببا موت الخلايا العصبية والتهابها. يتم تقييم الجرو بحثا عن أعراض العدوى مع تقدم المرض.

يوضح هذا الفيديو توليد الالتهاب العصبي في نموذج الفأر. يتم أخذ فأر مخدر مصاب بجروح دقيقة ، ويتم تطبيق لقاح فيروس داء الكاذب (PRV) على الجروح. يصيب الفيروس الأعصاب الطرفية ، وينتشر إلى العقد الجذرية الظهرية (DRG) ، ويصيب الحبل الشوكي والدماغ. تؤدي إصابة الخلايا العصبية في الجهاز العصبي إلى استجابة مناعية تسبب تلفا في الخلايا العصبية ، مما يؤدي إلى التهاب الأعصاب.

يوضح الفيديو الحقن داخل المخ لمعلق فيروس زيكا في فأر بالغ للحث على التنكس العصبي. يتم تأمين الماوس المخدر في إطار تجسيمي ، ويتم حفر ثقب في الجمجمة المكشوفة للحقن. يتم حقن معلق فيروس زيكا في أنسجة المخ. تسبب العدوى الفيروسية التهابا يؤدي إلى التنكس العصبي.

يوضح هذا الفيديو القياس الكمي للحمل البكتيري المعدي من دماغ الفأر المتدفق المصاب بالليستريا monocytogenes.

يوضح هذا الفيديو طريقة لدراسة النفاذية من خلال نموذج الحاجز الدموي الدماغي في المختبر (BBB) باستخدام الخلايا النجمية والخلايا البطانية على إدراج غشاء ، مع FITC مجاني وفيريتين محمل ب FITC. يرتبط FITC-ferritin بالمستقبلات الموجودة على الخلايا البطانية ويعبر حاجز الغشاء إلى الغرفة السفلية بينما أظهر FITC الحر نفاذية مقيدة وظل في الغرفة العلوية.

يوضح هذا الفيديو إجراء لإصابة الخلايا الجذعية العصبية الجنينية البشرية بفيروس زيكا. يمكن استخدام الخلايا المصابة لمزيد من الدراسات.

يوضح هذا الفيديو نموذجا في المختبر لدراسة مسببات الأمراض التي تعبر الحاجز الدموي الدماغي (BBB). تشكل الخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة ، التي تعبر عن تقاطعات ضيقة ، طبقة بطانية في الغرفة العلوية ، بينما تمثل الخلايا العصبية والخلايا النجمية والخلايا الدبقية الصغيرة حمة الدماغ في الغرفة السفلية ، مفصولة بغشاء مسامي. تحاكي العدوى الفيروسية في نموذج BBB انتقال العامل الممرض من الدم إلى الدماغ. عند إدخال فيروس عصبي ، فإنه يعبر BBB عن طريق التحول الخلوي ، ويصيب الخلايا العصبية ، ويتكاثر ،...

المصدر: Funes, S., et. al. ، الخلايا الشبيهة بالخلايا الدبقية الصغيرة البشرية: التمايز من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات ومقايسة البلعمة ذات الخلايا الحية في المختبر باستخدام المشابك البشرية. J. Vis. Exp. (2022) يوضح هذا الفيديو اختبارا لدراسة القدرة البلعمية للخلايا الشبيهة بالخلايا الدبقية الصغيرة باستخدام المشابك العصبية الفلورية الحساسة للأس الهيدروجيني.

اغمر الأنسجة في الزيلين لإذابة البارافين.

حقن الألبومين الموسوم بالفلوروفور عن طريق الوريد ، والذي يعبر BBB التالف ، ويصل إلى الدماغ.

تظهر الأنسجة ألياف أميلويد ومجاميع بروتينية غير طبيعية في جدران الأوعية الدماغية ، وهي مؤشرات رئيسية للاضطرابات العصبية.

يتميز MCCH بانخفاض تدفق الدم إلى الدماغ. هذا يحد من إمداد الأكسجين والمغذيات لطبقة الخلايا البطانية في الأوعية الدموية الدماغية ، مما يؤدي إلى إتلاف الخلايا.

قم بتعليق خليط الخلية في مصفوفة خارج الخلية أو محلول ECM.

قم بعمل شق في الرقبة لفضح الشرايين السباتية المشتركة الثنائية وربطها بشكل فضفاض.

يوضح هذا الفيديو طريقة إحداث التهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي (EAE) عن طريق حقن الببتيدات المشتقة من المايلين بمادة مساعدة لتنشيط الخلايا التائية ذاتية التفاعل ، والتي تهاجر إلى الدماغ. يتم إعطاء سم السعال الديكي لزيادة نفاذية الحاجز الدموي الدماغي ، مما يسمح لهذه الخلايا التائية والخلايا المناعية الأخرى بدخول الدماغ. تسبب هذه الخلايا المناعية إزالة الميالين ، مما يؤدي إلى ضعف انتقال الأعصاب وتطور EAE.

يوضح هذا الفيديو إجراء لتقييم اضطراب الحاجز الدموي الدماغي في نموذج فأر EAE. يتم حقن الأصباغ الفلورية ذات الأحجام المختلفة بشكل رجعي ويدور عبر الأوعية الدموية في الدماغ. تتسرب الصبغة الأصغر من خلال الفجوات إلى أنسجة المخ ، بينما تدخل الصبغة الأكبر فقط إذا كان الاضطراب شديدا ، ويرتبط بمدى تلف الحاجز.

يوضح هذا الفيديو إجراء للحث على تلف الأنسجة أو احتشاء جسر الجرذ المخدر باستخدام التحفيز الكهربائي.

في هذا الفيديو ، يتم تفكيك أجنة الزرد المخصبة تحت مجهر استريو ثم تعرضها لمثبط تخليق الكوليسترول ، مما يؤدي إلى تطور تمزق الأوعية الدموية ونزيف الدماغ في اليرقات. يتم بعد ذلك فصل اليرقات النزفية ، التي يمكن التعرف عليها بواسطة بقع حمراء مميزة ، تحت المجهر لمزيد من التحليل.

يوضح هذا الفيديو عملية إحداث اضطراب الحاجز الدموي الدماغي (BBB) والنزيف الدقيق الدماغي في نموذج الفئران باستخدام عديدات السكاريد الدهنية (LPS). يسلط الضوء على تسلسل الاستجابات المناعية التي تؤدي إلى زيادة نفاذية BBB وتلف أنسجة المخ لاحقا.

يوضح هذا الفيديو فحصا للكشف عن النزيف الدماغي الدقيق (CMHs) في نموذج الفئران. CMHs هي نزيف في الدماغ بسبب اضطراب الحاجز الدموي الدماغي ، والذي يتم تحديده بواسطة خلايا الدم الحمراء المتسربة (كرات الدم الحمراء). في نموذج الفئران ، تكون أنسجة المخ الثابتة محمية بالتبريد ، ومقسمة ، وملطخة بالهيماتوكسيلين يوزين لكرات الدم الحمراء ، مما يسمح بالتصور المجهري ل CMHs. تظهر كرات الدم الحمراء المسربة باللون الأحمر البرتقالي تحت المجهر.

يوضح الفيديو إجراء إنشاء نموذج فأر لدراسة إصابات الدماغ الإقفارية الناجمة عن نقص التأكسج لدى الأطفال حديثي الولادة. يحدد خطوات إحداث نقص التروية جراحيا وتعريض لنقص الأكسجة لتفاقم تلف الدماغ. أخيرا ، يوضح كيفية تقييم آفات الدماغ الناتجة ، مما يضمن إعداد نموذج الفأر لمزيد من التحقيق العلمي.

يوضح هذا الفيديو كيفية توصيف الفضاء خارج الخلية في شريحة دماغية باستخدام الأقطاب الكهربائية الدقيقة الانتقائية للأيونات والرحلان الأيوني لقياس الإشارات الكهربائية ومقارنتها. تساعد هذه العملية في تحديد جزء حجم المساحة ودرجة الالتواء.

في هذا الفيديو ، يتم زرع مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية (MEA) المغلفة بأوكسيديز الغلوتامات في أنسجة دماغ الفأر المخدر. يتم حقن محلول الغلوتامات في الفضاء خارج الخلية حيث يكتشف MEA مستويات الغلوتامات ، مما يتيح المراقبة في الوقت الفعلي لامتصاص الغلوتامات من قبل الخلايا النجمية.

في هذا الفيديو ، يتم استخدام جرو فأر معدل وراثيا يحمل جين Ccm2 محاط بمواقع loxP و Cre recombinase المدمجة في مستقبلات هرمون الاستروجين للحث على تشوهات كهفية دماغية (CCMs). يؤدي إعطاء 4-هيدروكسي تاموكسيفين إلى تنشيط Cre في الخلايا البطانية ، مما يؤدي إلى حذف Ccm2 وتشكيل CCMs في الدماغ.

يوضح هذا الفيديو إجراء عزل خلايا الدماغ والخلايا المناعية المتسللة من أنسجة دماغ الفئران الإقفارية عن طريق الهضم الأنزيمي ، متبوعا بإزالة بقايا الخلايا والمايلين عن طريق الطرد المركزي المتدرج للكثافة ، لدراسة استجابات الالتهاب في أبحاث السكتة الدماغية.

يوضح الفيديو تحريض النزيف تحت العنكبوتية عن طريق الانثقاب داخل الأوعية الدموية في نموذج الفأر. يتم إجراء شق في منطقة عنق الفأر المخدر للوصول إلى الشريان السباتي المشترك وتشعبه. يتم إدخال خيوط من خلال الشرايين لثقب فرع الشريان داخل الجمجمة ، مما يؤدي إلى نزيف تحت العنكبوتية.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتوليد نموذج الفئران للنزيف داخل البطينين لحديثي الولادة. في هذا الإجراء ، يتم حقن جرو فأر مخدر بالهيموجلوبين في البطين الجانبي للدماغ. يسبب الهيموجلوبين الإجهاد التأكسدي ويطلق الهيم ، مما يحاكي النزيف داخل البطين. يؤدي الضرر الناتج عن أنسجة المخ ، الناجم عن أنواع الأكسجين التفاعلية والسيتوكينات الالتهابية ، إلى تضخم البطين ، وهو نتيجة شائعة للنزيف داخل البطين.

يوضح هذا الفيديو إجراء إجراء انسداد الشريان الدماغي الأوسط البعيد الدائم ، أو MCAO ، مع الشريان السباتي المشترك ، أو ربط CCA ، في الفئران المسنة لنمذجة السكتة الدماغية الإقفارية. هذا يمنع تدفق الدم إلى الدماغ ، مما يؤدي إلى موت الخلايا العصبية وإنشاء نموذج لدراسة آليات السكتة الدماغية والعلاجات المحتملة.

يوضح هذا الفيديو إجراء إنشاء نموذج فئران نزيف تحت العنكبوتية. يتم زرع فأر مخدر بمجسات لقياس الضغط داخل الجمجمة وتدفق الدم الدماغي. يتم تحديد الموقع المستهدف ، ويتم إدخال الإبرة في وضع ما قبل التصاميم. ثم يتم حقن الدم الذاتي في الفضاء تحت العنكبوتية ، مما يزيد من الضغط داخل الجمجمة ويقلل من تدفق الدم الدماغي ، مما يؤسس النموذج.

يوضح هذا الفيديو تحقيقا تجريبيا لانتقال الخلايا الليمفاوية عبر نموذج بطانة الحاجز الدموي الدماغي (BBB). يتم إنشاء طبقة أحادية من الخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة في الدماغ البشري (HBMECs) في المختبر ، وتضاف خلايا الدم المحيطية أحادية النواة (PBMCs) التي تحتوي على الخلايا الليمفاوية إلى الطبقة الأحادية. ثم يتم تحضين الخلايا للسماح بانتقال الخلايا الليمفاوية ، ويتم قياس الخلايا المهاجرة باستخدام قياس التدفق الخلوي.

يوضح هذا الفيديو تقييم منطقة الاحتشاء ووذمة الدماغ في شرائح الدماغ من الفئران المعرضة لانسداد الشريان الدماغي الأوسط. يتم تحديد المناطق المحتضنة باستخدام تلطيخ الأكسدة والاختزال ، بينما تحدد وظيفة المرشح الأزرق والعتبة في برنامج تحليل الصور منطقة الاحتشاء والوذمة في نصف الكرة المصاب.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتقييم المقاومة الكهربائية عبر البطانة (TEER) في الخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة في دماغ الفئران في المختبر. تشير قيمة TEER العالية إلى تقاطعات الخلايا البطانية السليمة ، بينما تؤدي إضافة الخلايا التائية المنشطة إلى تقليل قيمة TEER ، مما يعكس تعطيل حاجز الوصلات.

يوضح هذا الفيديو إجراء لإزالة التعصيب الودي للشريان الكلوي في نموذج فأر ارتفاع ضغط الدم الناجم عن الأنجيوتنسين II ، باستخدام الفينول لتعطيل وظيفة العصب الودي وخفض ضغط الدم.

يوضح هذا الفيديو عملية إحداث السكتة الدماغية الإقفارية في نموذج الفئران عن طريق انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCA) باستخدام مسمار خيط. يتضمن الإجراء ربط الشرايين السباتية ، وإدخال مسمار خيط في الشريان السباتي الخارجي ، ومنع تدفق الدم من MCA إلى الدماغ ، مما يؤدي إلى موت الخلايا العصبية ومحاكاة السكتة الدماغية الإقفارية.

يوضح هذا الفيديو إجراء تكرار السكتة الدماغية الخثارية في نموذج الفأر عن طريق سد الشريان السباتي المشترك الأيمن وتعريض الفأر لبيئة منخفضة الأكسجين. تقلل هذه العملية من تدفق الدم والأكسجين إلى الدماغ ، مما يتسبب في تكوين جلطة دموية وتلف في الدماغ.

يوضح هذا الفيديو التقنية الدقيقة لإحداث سكتة دماغية للمادة البيضاء في فأر مخدر عن طريق حقن مثبط أكسيد النيتريك في إحداثيات الدماغ المستهدفة داخل المادة البيضاء. وهذا يؤدي إلى انقباض الأوعية الدموية وتثبيط إمدادات الدم ، مما يؤدي إلى تلف الخلايا العصبية والسكتة الدماغية.

المصدر: Wanderer, S., et al. نموذج تمدد الأوعية الدموية التشعبي الجراحي المجهري للكيس الشرياني في الأرنب. J. Vis. Exp. (2020) يوضح هذا الفيديو إنشاء نموذج تجريبي لتمدد الأوعية الدموية في أرنب باستخدام كيس وعاء معالج بالإيلاستاز. بعد استئصال جزء من CCA الأيمن ، تتم معالجة الكيس بالإيلاستاز ، ثم خياطة CCA الأيسر لاستعادة تدفق الدم. يؤدي الضغط الناتج على جدران الحقيبة الضعيفة إلى تكوين تمدد الأوعية الدموية.

المصدر: Sharma، T. P.، وآخرون، نموذج النظام المستقل عبر الصمعي لتعديل الضغط داخل العين وداخل الجمجمة في الأجزاء الخلفية من المتبرع البشري. J. Vis. Exp. (2020). يوضح هذا الفيديو إجراء إعداد العين البشرية لدراسة تأثيرات الضغط العرضي على إشارات الخلايا العقدية الشبكية عن طريق محاكاة الضغوط داخل العين وداخل الجمجمة في نظام مستقل عبر الصفائح.

المصدر: Lani-Louzada، R.، et al. ، الكي الكامل للضفيرة الوعائية الحزوية للجلوكوما المستحثة جراحيا في القوارض. J. Vis. Exp. (2022) يوضح هذا الفيديو تحريض ومراقبة ارتفاع ضغط العين (IOP) في نموذج الفئران. تتضمن العملية كي الأوعية الدموية القوفية ، مما يؤدي إلى انسداد الأوعية الدموية وارتفاع IOP. ثم يسمح للفئران بالتعافي ، ويتم مراقبة IOP بانتظام في كل من العيون التجريبية والعيون الضابطة للمقارنة.

المصدر: Jungen, C., et al. تأثير الخلايا العصبية داخل القلب على الفيزيولوجيا الكهربية للقلب وعدم انتظام ضربات القلب في Ex Vivo نظام Langendorff. J. Vis. Exp. (2018). يوضح الفيديو تقنية خارج الجسم الحي لتحفيز الجهاز العصبي داخل القلب لتقييم قابلية القلب لعدم انتظام ضربات القلب. باستخدام جهاز التروية ، يتم حشو قلب الفأر المعزول بمخزن مؤقت مؤكسج. ثم يتم تحفيز الجهاز العصبي داخل القلب بتردد عال للحث على عدم انتظام ضربات القلب.

المصدر: حكيم ، م. أ. وآخرون . ، العزل والتحليل الوظيفي للبطانة البطانية الشريانية لحمة دماغ الفأر. J. Vis. Exp. (2022). يوضح هذا الفيديو التحليل الوظيفي للأنبوب البطاني الشرياني المعزول من دماغ الفأر. يحدد خطوات قياس مستويات الكالسيوم داخل الخلايا وإمكانات الغشاء ، سواء في خط الأساس أو استجابة للتحفيز الدوائي.

المصدر: Tang, X. et. al., نزيف بونتين هائل عن طريق الحقن المزدوج للدم الذاتي. J. Vis. Exp. (2021) يصف هذا البروتوكول التسريب المتحكم فيه للدم الذاتي في منطقة الجسر من دماغ الفئران لنمذجة نزيف جسر هائل. والغرض من ذلك هو محاكاة نزيف الدماغ الموضعي عن طريق زيادة الضغط الموضعي.

المصدر: Alluri, H., et.al. الحرمان من الأكسجين والجلوكوز وإعادة الأكسجين كنموذج في المختبر لإصابة نقص التروية وإعادة التروية لدراسة الخلل الوظيفي في الحاجز الدموي الدماغي. J. Vis. Exp. (2015). يوضح الفيديو تأثير الحرمان من الأكسجين والجلوكوز وإعادة الأكسجين اللاحقة على الخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة في دماغ الفئران (RBMECs) من خلال محاكاة حالات نقص الأكسجين والحرمان من المغذيات. تؤدي هذه الظروف إلى استنفاد ATP ، وزيادة الكالسيوم داخل الخلايا ، وتوليد أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS)...

المصدر: Gucciardo, E., et. al. ، نموذج لزراعة الأنسجة خارج الجسم الحي لمضاعفات الأوعية الدموية الليفية في اعتلال الشبكية السكري التكاثري. J. Vis. Exp. (2019) يوضح هذا الفيديو تفاصيل بروتوكول التلوين المناعي لثقافات خارج الجسم الحي للأنسجة الوعائية الليفية المضمنة في هلام الفيبرين. يتيح ذلك التصور التفصيلي للتغيرات الوعائية المرتبطة باعتلال الشبكية السكري...

المصدر: Talley Watts، L.، et al. التخثر الضوئي في روز البنغال عن طريق التصوير البصري متحد البؤر في الجسم الحي: نموذج لسكتة دماغية أحادية السفينة. J. Vis. Exp. (2015) يوضح هذا الفيديو تقنية للحث على تكوين جلطة دموية في دماغ الفأر. يخضع الفأر المخدر مع نافذة الجمجمة والجمجمة الرقيقة للتخثر الضوئي من خلال تنشيط صبغة حساسة للضوء باستخدام ضوء عالي الكثافة. تولد هذه العملية أنواع الأكسجين التفاعلية ، والتي تلحق الضرر بجدران الأوعية الدموية وتؤدي إلى تكوين جلطة ، مما يؤدي في النهاية إلى إعاقة تدفق...

المصدر: Kuts, R. et al. إصابات الدماغ الناجمة عن الليزر في القشرة الحركية للفئران. J. Vis. Exp. (2020) يوضح هذا الفيديو تقييم سلامة الحاجز الدموي الدماغي (BBB) بعد إصابة الدماغ الناجمة بالليزر في الفئران. يتم حقن صبغة تتبع في وريد الذيل ، مما يسمح لها بالدوران إلى الدماغ والتسرب إلى الأنسجة من خلال BBB التالف. ثم يتم استخراج الدماغ ومعالجته لإطلاق الصبغة. يتم قياس شدة التألق للصبغة لتحديد مدى تلف BBB الناجم عن الليزر.

تفرز الخلايا النجمية جزيئات الإشارات التي تعزز نضوج الخلايا الجذعية وتمايزها إلى خلايا عصبية وخلايا نجمية.

يوضح هذا الفيديو طريقة لاختبار هجرة الخلايا العصبية الداخلية استجابة لإشارات جذابة كيميائية من الخلايا البطانية حول البطينين (PVECs). يتم وضع الخلايا العصبية الداخلية في حجرة مركزية ، مع وجود PVECs وخلايا التحكم على كلا الجانبين. تشير زيادة الهجرة نحو PVECs إلى استجابة إيجابية لإشاراتها الجذابة الكيميائية.

يوضح هذا الفيديو تلطيخ التألق المناعي للشرائح العضوية المخيخية لتحديد مستضدات مستهدفة محددة يتم التعبير عنها في الخلايا العصبية المخيخية المختلفة ، والتي تدل على النضج العضوي.

يوضح هذا الفيديو طريقة تحديد الخلايا العصبية من مزرعة مختلطة من الخلايا العصبية الحبيبية المخيخية والخلايا الدبقية باستخدام تلطيخ مزدوج مع ثنائي أسيتات الفلوريسين (FDA) ويوديد البروبيديوم (PI) ، حيث تظهر الخلايا العصبية الحية باللون الأخضر وتظهر الخلايا العصبية الميتة باللون الأحمر.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا مفصلا للتلطيخ المناعي لتصور عيوب النمط الظاهري في أجسام الفطر لأدمغة ذبابة الفاكهة الطافرة. يتضمن البروتوكول استخدام الأجسام المضادة ضد Fas2 ، وهو بروتين يشارك في التوجيه المحوري الذي يسهل التطور المورفولوجي والوظيفي السليم لجسم الفطر.

يوضح هذا الفيديو إجراء تلطيخ الخلايا الجذعية العصبية المتكاثرة حديثا في أقسام أنسجة المخ باستخدام دمج EdU ، متبوعا بالتألق المناعي لتصور بروتينات معينة ، مما يعزز فهم ديناميكيات الخلايا والانتشار.

يوضح هذا الفيديو تلطيخ التألق المناعي للعمليات البردية من الأنسجة القحفية الوجهية الجنينية للفأر ، باستخدام الفحص المجهري الفلوري لتقييم تعبير العلامات النووية وتحديد تكاثر الخلايا ونشاط الإشارات.

يوضح هذا الفيديو كيف يتم تصنيف الحويصلات العصبية ببروتينات فلورية محددة لتصور حركتها. أولا ، يتم تحضين ترميز البلازميد لبروتين الفلورسنت بعامل تعداء ثم يتم إدخاله في ثقافة الخلايا العصبية. بعد ذلك ، يتم الحصول على صور الخلايا العصبية وتحليلها لتتبع حركة الحويصلات.

يوضح هذا الفيديو قياس إفراز حمض الريتينويك (RA) من خلايا الغلاف العصبي باستخدام خلايا مراسل RA. يحدد الخطوات المتبعة في الزراعة المشتركة لخلايا الغلاف العصبي مع خلايا مراسل التهاب المفاصل الروماتويدي وإجراء اختبار RA اللوني لقياس مستويات التهاب المفاصل الروماتوي.

يوضح هذا الفيديو التلوين المناعي للجهاز الهضمي للفئران الجنينية لتصور وتحليل توزيع السكان العصبيين باستخدام التألق المناعي والفحص المجهري متحد البؤر.

يوضح هذا الفيديو وضع العلامات الفيروسية وزرع خلايا البروز العقدي الإنسي (MGE) للدراسات في الجسم الحي. يحدد الخطوات المتبعة في نقل خلايا MGE مع محضر فيروسي ، وزرع هذه الخلايا المنقولة في قشرة جرو الفأر ، وتمكين التعبير المراسل في أنواع فرعية محددة من الخلايا العصبية الداخلية.

يوضح هذا الفيديو عزل النوى الغنية بمستقبلات الأوكسيتوسين من دماغ الفئران حديثي الولادة. يتيح التقطيع الإكليلي ، متبوعا بتحديد نوى الدماغ الغنية بمستقبلات الأوكسيتوسين والثقب الدقيق ، الاستخراج الفعال للنوى الغنية بمستقبلات الأوكسيتوسين لمزيد من التحليل.

المصدر: Pericoli, G. et . al., فحوصات الكيمياء المناعية للخلايا الحية ثلاثية الأبعاد للورم الدبقي المنتشر في خط الوسط لدى الأطفال. J. Vis. Exp. (2021) يوضح هذا الفيديو تصوير الخلايا الحية لمراقبة هجرة خلايا الورم الدبقي المنتشرة في خط الوسط لدى الأطفال باستخدام الملصقات الكيميائية المناعية مع الأجسام المضادة ل CD44.

المصدر: Jantzie, L. L., et. al. نمذجة الاعتلال الدماغي للخداج باستخدام نقص الأكسجة ونقص التروية قبل الولادة مع عديد السكاريد الشحمي داخل السلى في الفئران. J. Vis. Exp. (2015) يوضح هذا الفيديو بروتوكولا للحث على حالات نقص الأكسجين والحالات الالتهابية في فئران الجنين عن طريق تقييد تدفق الدم في الرحم وحقن LPS ، ونمذجة الالتهاب العصبي واضطراب نمو الدماغ ذي الصلة بدراسات الولادة المبكرة.

المصدر: Larpthaveesarp, A., et. al. نموذج انسداد الشريان الدماغي الأوسط العابر لسكتة دماغية حديثي الولادة في الفئران P10. J. Vis. Exp. (2017)يوضح هذا الفيديو إنشاء نموذج انسداد الشريان الدماغي الأوسط في جرو الفئران. يتعرض الشريان السباتي الداخلي (ICA) ، ويتم تأمين الرباط للحد من فيضان الدم. يتم إدخال انسداد من خلال ICA للوصول إلى الشريان الدماغي الأوسط. ثم يسمح للجرو بالتعافي قبل إجراء مزيد من التحليل.

يحفز المرض الخلايا المناعية ذاتية التفاعل لمهاجمة بروتينات المايلين ، مما يؤدي إلى تدهور غمد المايلين المحيط بالمحاور العصبية.

يعرض قسم التحكم محاور ذات أغلفة مايلين معبأة بإحكام تحتوي على طبقات غشاء بلازما متحدة المركز. يظهر القسم المصاب المايلين غير المضغوط مع فجوات كبيرة.

يضعف الإجهاد وظيفة الخلايا قليلة التغصن ، مما يعطل غمد المايلين الغني بالدهون المحيط بالمحاور العصبية في قشرة الفص الجبهي الإنسي ، وهي منطقة دماغية تنظم العاطفة.

يوضح هذا الفيديو الترسيب المناعي لشظايا الحمض النووي المتشابكة مع البروتين المستهدف من تحلل الخلايا العصبية الحركية المشتقة من الخلايا الجذعية باستخدام حبات مغناطيسية مطلية بالأجسام المضادة الخاصة بالبروتين المستهدف.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا لتقييم السلامة الهيكلية للوصلات العصبية العضلية في العضلات الطولية الظهرية لذبابة الفاكهة. يتضمن الإجراء تلطيخ الخلايا العصبية والعضلات بجسمين مضادين متميزين ومقارنة أنماط التألق بين الذباب الطافرة والبرية. يشير انخفاض تلطيخ الخلايا العصبية في الذباب الطافرة إلى التنكس العصبي ، بينما يظل هيكل العضلات سليما.

يوضح هذا الفيديو تقييم التأثيرات التنكسية العصبية لمادة كيميائية للاختبار على Caenorhabditis elegans مع الخلايا العصبية ذات العلامات الفلورية. تظهر الخلايا العصبية الطبيعية تأليقا ساطعا للسوما والعمليات السليمة ، بينما يشير التألق المتناقص ، والسوما المتورم ، والعمليات المتقطعة إلى التنكس العصبي.

يوضح هذا الفيديو طريقة لإنشاء نموذج اعتلال عصبي صغير للألياف في الفئران باستخدام مادة الراتنج الناهض TRPV1 (RTX). يحدد الخطوات المتبعة في إدارة RTX للفئران ويشرح كيف يحفز RTX موت الخلايا العصبية في الخلايا العصبية الحسية ذات القطر الصغير ، وبالتالي إنشاء نموذج الاعتلال العصبي.

في هذا الفيديو ، تم إنشاء نموذج فأر للتصلب المتعدد باستخدام التهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي (EAE). يتم حقن الفأر بمستحلب يحتوي على ببتيد عصبي ومادة مساعدة ، مما يؤدي إلى استجابة مناعية تنشط الخلايا التائية ذاتية التفاعل. يتبع ذلك حقن سم السعال الديكي (PTX) لزيادة نفاذية الحاجز الدموي الدماغي ، مما يسمح للخلايا التائية ذاتية التفاعل بالتسلل إلى الدماغ. يبدأ هذا التسلل في سلسلة إشارات تؤدي في النهاية إلى تلف المايلين ، مما يحاكي حالة إزالة الميالين للتصلب المتعدد.

يوضح هذا الفيديو إجراء إحداث الشلل عن طريق نقل خلايا Th17 المنشطة التي تستهدف أكوابورين -4 إلى نموذج فأر. في الجهاز العصبي المركزي ، تتفاعل خلايا Th17 المنشطة مع الخلايا النجمية التي تعبر عن الأكوابورين -4 ، مما يؤدي إلى استجابة مناعية تؤدي إلى شلل الذيل والأطراف في الفأر.

يوضح هذا الفيديو عملية تقييم الخلل الحركي في نموذج الفأر من خلال إعطاء سم السعال الديكي ولقاح يحتوي على الببتيدات والمواد المساعدة التي تحاكي المايلين ، تليها اختبارات جهاز المشي لتقييم الوظيفة الحركية وتقييم تلف الأعصاب الناتج بسبب التنشيط المناعي وإزالة الميالين.

يوضح هذا الفيديو اختبار الدرج لتقييم الوظيفة الحركية في فأر نصف باركنسون مصاب بآفة في الدماغ الأيمن. تعطل الآفة إشارات الدوبامين ، مما يضعف التحكم في المخلب الأيسر ، مما يؤدي إلى بقاء المزيد من الكريات على الدرج الأيسر ، مما يشير إلى خلل وظيفي في الحركة.

يوضح هذا الفيديو استخدام مقايسة الحركة الشعاعية لتقييم الخلل الحركي في C. ايليجانس يعبر عن بروتين TDP-43 البشري من النوع البري أو ALS. يسمح للديدان ذات المستويات المتفاوتة من التعبير TDP-43 من النوع البري أو المتحور بالزحف ، ويتم قياس حركتها بالمسافة الشعاعية المقطوعة من النقطة المركزية على لوحة الفحص. يميز الاختبار بين الإعاقات الحركية الخفيفة والمتوسطة والشديدة بناء على المسافة التي تقطعها سلالات C. ايليجانس.

يوضح هذا الفيديو تقييم العضلات باستخدام الخلايا العصبية الحركية المزروعة وخلايا شوان والأنابيب العضلية ، متبوعا بالعلاج باستخدام مانع عصبي عضلي لمنع الانقباض. تظهر رسومات الحركة الزمنية المرمزة بالألوان رسما متنوعا للحركة الزمنية مرمزا بالألوان. يشير اللون الأحمر إلى أسرع حركة ، ويشير اللون الأزرق إلى الأبطأ.

يوضح هذا الفيديو تصور تفاعلات البروتين والبروتين في ذبابة الفاكهة الوصلة العصبية العضلية (NMJ) باستخدام مقايسة ربط القرب (PLA). بعد عزل جدران الجسم ، يتم فحص البروتينات المتفاعلة مع الأجسام المضادة الأولية والأجسام المضادة الثانوية المترافقة مع PLA. يسهل قرب البروتينات المتفاعلة ربط المجسات باستخدام قليل النوكليوتيدات الموصل ، وتشكيل الحمض النووي الدائري ، والذي يتم تضخيمه بعد ذلك عن طريق تضخيم الدائرة المتدحرجة. ترتبط مجسات الفلورسنت بالحمض النووي المضخم ، مما يسمح بتصور تفاعلات البروتين...

المصدر: Wagner، K. et al.، دراسة تهريب البروتين الغشائي في ذبابة الفاكهة الخلايا المستقبلة للضوء باستخدام البروتينات التي تحمل علامة eGFP. J. Vis. Exp. (2022). يوضح هذا الفيديو تصور تهريب البروتين الغشائي في ذبابة الفاكهة الخلايا المستقبلة للضوء باستخدام بروتينات TRPL الموسومة ب eGFP. يفصل تحضير الذباب المعدل وراثيا للتصوير ، والتقاط صور مضان للخلايا المستقبلة للضوء ، والتقدير الكمي لتهريب TRPL عن طريق قياس مضان eGFP النسبي في المخططات.

المصدر: Deseure، K.، et al. إصابة الانقباض المزمن للعصب تحت الحجاج للفأر (IoN-CCI) لدراسة آلام الاعتلال العصبي ثلاثي التوائم. J. Vis. Exp. (2015). يوضح هذا الفيديو طريقة للحث على ألم الأعصاب في نموذج الفئران عن طريق تضييق العصب تحت الحجاج. بعد تعريض العصب تحت الحجاج وربط الأربطة لتضييقها ، تزيد الاستجابة المناعية في موقع الإصابة من استثارة الخلايا العصبية المجاورة ، والتي تنقل إشارات الألم إلى الدماغ.

المصدر: Brakkee، E. M.، et al. الجراحة والاختبارات السلوكية في نموذج تبديل ورم العصب الظنبوبي في الفئران. J. Vis. Exp. (2023). يوضح هذا الفيديو إجراء لتوليد نموذج تبديل ورم العصب الظنبوبي للفئران (TNT). بعد تعريض العصب الظنبوبي في الساق الخلفية لفأر مخدر ، قم بعبور العصب. بعد ذلك ، قم بإنشاء نفق تحت الجلد ، وقم بتمرير العصب المقطوع عبر النفق ، وخياطته في مكانه. في حالة عدم وجود هدف لإعادة التعصيب ، تشكل النتوءات المحورية غير المنظمة من العصب المقطوع ورما عصبيا ، مما يؤدي إلى ألم الأعصاب عن...

المصدر: Lee, D. et. al., تعديل الظروف التجريبية لفقدان السمع الناجم عن الضوضاء في الفئران وتقييم وظيفة السمع وتلف خلايا الشعر الخارجية. J. Vis. Exp. (2023) يوضح هذا الفيديو إجراء فقدان السمع الناجم عن الضوضاء في الفئران. يضر الصوت عالي الحجم بخلايا الشعر في الأذن الداخلية ويعطل المسارات السمعية ، مما يؤدي إلى ضعف السمع.

المصدر: Lee, D., et. al. الظروف التجريبية المعدلة لفقدان السمع الناجم عن الضوضاء في الفئران وتقييم وظيفة السمع وتلف خلايا الشعر الخارجية. J. Vis. Exp. (2023)يوضح هذا الفيديو قياس استجابة جذع الدماغ السمعية (ABR) في الماوس. توضع الأقطاب الكهربائية على الرأس وخلف الأذن وبالقرب من ذيل الفأر المخدر. يتم تسليم المحفزات الصوتية بكثافة مختلفة ، ويتم تسجيل الإشارات الكهربائية المتولدة كأشكال موجية.

المصدر: أولمستيد ، دي إن ، وآخرون ، شق العصب الوجهي في الفئران: نموذج لدراسة استجابة الخلايا العصبية الحركية للإصابة. J. Vis. Exp. (2015). يوضح هذا الفيديو إجراء سحق العصب الوجهي في الفأر ، حيث يكشف التشريح الحاد من خلال المعالم الرئيسية عن جذع العصب الوجهي في الثقبة الورم المستقر. ثم يتم استخدام الملقط لضغط جذع العصب ، مما يؤدي إلى تلف محوري وتعطيل نقل الإشارات العصبية.

المصدر: Cheah, M., et al. حقن العقدة الجذرية الظهرية وإصابة سحق الجذر الظهري كنموذج لتجديد المحور العصبي الحسي. J. Vis. Exp. (2017). يوضح هذا الفيديو إجراء خطوة بخطوة لحقن معلق فيروسي في العقد الجذرية الظهرية (DRGs) وإحداث إصابة محورية خاضعة للرقابة عن طريق سحق الجذر الظهري في فأر مخدر. يتضمن البروتوكول تعريض DRGs ، وتقديم ناقل فيروسي معزز للنمو لتسهيل التجديد المحوري ، وقطع الوصلات المحورية بالحبل الشوكي لنمذجة إصابة الأعصاب الحسية وتجديدها.

للكشف عن موت الخلايا المبرمج باستخدام مقايسة TUNEL ، عالج شريحة الدماغ باستخدام إنزيم بروتيناز K.

باستخدام الفحص المجهري الفلوري ، تصور العصب المصاب ، والذي يظهر زيادة تدريجية في التورمات والانفصالات المحورية.

يعزز تغليف الدواء خصوصية الخلايا السرطانية ويقلل من السمية العصبية.

يوضح هذا الفيديو توصيل إصابات الدماغ الرضحية (TBI) في الفئران. بعد تعريض الجمجمة ، يتم وضع علامة على موقع TBI. ثم يتم وضع الماوس أسفل جهاز TBI. يتم توصيل التأثير عن طريق رفع القضيب المعدني والسماح له بالسقوط بحرية على الاصطدام ، الذي يتلامس مع الجمجمة.

يوضح هذا الفيديو تلطيخ التألق المناعي للخلايا العصبية في الحصين الفئران المزروعة داخل شريحة ميكروفلويديك لتحليل نضوج الخلايا العصبية والاتصال.

يوضح هذا الفيديو إنشاء نموذج إصابة الخلايا العصبية في الخلايا العصبية الحبيبية المخيخية الأولية للفأر. يحدد الخطوات المتبعة في إحداث إصابة الخلايا العصبية باستخدام NMDA ، ناهض مستقبلات الناقل العصبي المثير ، والجلايسين ، وهو ناهض مشارك. يرتبط NMDA و glycine بمستقبلات عصبية معينة ، مما يتسبب في فرط تحفيزها ويؤدي إلى تدفق هائل للكالسيوم داخل الخلايا ، مما يؤدي إلى تلف الخلايا العصبية والموت.

يوضح هذا الفيديو تلطيخ التألق المناعي لشريحة دماغ الفأر لتحديد توزيع بروتين معين قبل المشبكي. تتضمن العملية حجب المواقع غير المحددة ، وتطبيق الأجسام المضادة الأولية للبروتين المستهدف وعلامة مرجعية ، متبوعا بوضع العلامات الثانوية على الأجسام المضادة والتلوين النووي. تضمن العلامة المرجعية القياس الكمي الدقيق من خلال توفير خط أساس ثابت ، ويتم تحليل توزيع البروتين قبل المشبكي عبر مناطق الدماغ باستخدام الفحص المجهري متحد البؤر.

يوضح هذا الفيديو طريقة للتحقيق في إصابات دماغ يرقات الزرد باستخدام المجهر الإلكتروني لنقل المسح الضوئي على نطاق واسع (STEM) ، وهي تقنية تجمع بين عناصر كل من المجهر الإلكتروني الماسح (SEM) والفحص المجهري الإلكتروني للإرسال (TEM) لإنتاج صور عالية الدقة. يحدد الخطوات المتبعة في إعداد العينات والحصول على صور العلوم والتكنولوجيا والهندسة والرياضيات عالية الدقة لتحديد إصابات الدماغ.

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا جراحيا على نموذج الفئران ، يوضح بالتفصيل الخطوات من تحضير التخدير إلى تحريض إصابة العصب الوجهي. هذا البروتوكول مفيد لدراسة تجديد الأعصاب والتقنيات الجراحية في البحوث الطبية.

يوضح هذا الفيديو إجراء إحداث إصابة دماغية رضية في الجمجمة المفتوحة في الفأر عن طريق عمل شق في خط الوسط في الجمجمة ، والحفر عبر الجمجمة وإزالة السديلة العظمية لكشف قشرة الدماغ ، وتطبيق ضغط عال للحث على الصدمة. ثم يتم خياطة الجرح لإعداد نموذج الفأر للتجارب اللاحقة.

يوضح هذا الفيديو إجراء إحداث موت دماغي في نموذج فأر عن طريق زيادة الضغط داخل الجمجمة المتحكم فيه من خلال قسطرة بالون ، تحاكي موت الدماغ الطبيعي.

يوضح هذا الفيديو إجراء لتوليد إصابة دماغية دقيقة وخاضعة للرقابة في القشرة الحركية للفئران باستخدام الليزر.

يوضح هذا الفيديو البيوتينيل ووضع العلامات الفلورية للبروتينات السكرية السلية المعدلة في الخلايا الجذعية العصبية الأولية والخلايا السلفية ، وكذلك الخلايا العصبية ، وتصورها باستخدام الفحص المجهري الفلوري.

في هذا الفيديو ، يتم استخدام جهاز أنبوب الصدمة لتوليد موجة صدمة عن طريق تمزيق غشاء البوليمر من خلال الضغط المتحكم فيه. تؤثر الموجة الصدمية على شرائح الدماغ الموجودة في كيس مؤمن ، مما يؤدي إلى إصابة مؤلمة لشريحة الدماغ.

يوضح هذا الفيديو إجراء إعداد الخلايا العصبية المستنبتة للتحليل البصري للحويصلات المشبكية المعاد تدويرها. تتضمن العملية وضع علامات مضان لبروتينات الحويصلة المشبكية والتلوين المناعي لتسمية وتصور الحويصلات المعاد تدويرها داخل الخلايا العصبية.

يوضح هذا الفيديو عملية إحداث إصابة تمدد على الخلايا العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات (hiPSCNs). تؤخذ الخلايا في صفيحة متعددة الآبار بلا قاع مع غشاء سيليكون متصل. يتم تطبيق الضغط الميكانيكي المتحكم فيه على الغشاء للحث على اضطراب الهيكل الخلوي وتلف غشاء الخلية ، مما يؤدي إلى نمط ظاهري لإصابة التمدد في الخلايا.

يوضح هذا الفيديو إجراء لإحداث إصابة مؤلمة مغلقة في الرأس في ذبابة الفاكهة المخدر باستخدام جهاز إضراب مع اصطدام يعمل بالغاز. تؤثر الإصابة على وظيفة الخلايا العصبية وتضعف القدرة على المشي.

يوضح هذا الفيديو إجراء إصابة الطعن القشري في الفئران ، بما في ذلك التعرض للجمجمة وتكوين آفة في الدماغ. إنه يحفز النجمي التفاعلي ، وهو استجابة وقائية عصبية للخلايا النجمية ، لدراسة صدمة الجهاز العصبي المركزي والالتهابات وآليات الإصلاح.

يوضح الفيديو طريقة لإنشاء نموذج فأر لإصابات الدماغ الرضحية (TBI) باستخدام جهاز قرع السوائل الجانبي (LFPI). عند تخدير الفأر ، يتعرض الدماغ عن طريق إنشاء نافذة على الجمجمة. يتم توصيل قنية مملوءة بالمحلول الملحي بالنافذة ثم يتم توصيلها ب LFPI. يتم تحرير بندول الجهاز لإنشاء نبضة ضغط تسبب إصابة دماغية مؤلمة.

يوضح هذا الفيديو إجراء إحداث إصابات الدماغ الرضحية (TBI) في نموذج الفأر. يتم أخذ فأر مخدر بجمجمة مكشوفة لإنشاء فتحة في الجمجمة ، ثم يتم إحداث إصابة قشرية خاضعة للرقابة باستخدام جهاز تأثير. تؤدي الإصابة إلى تلف أنسجة المخ ، مما يتسبب في ضعف الوظيفة الإدراكية والتنسيق الحركي.

يوضح هذا الفيديو الإجراء الجراحي لإجراء استئصال الصدر في الحبل الشوكي في الفئران. يحدد خطوات فضح جزء الحبل الشوكي T8 ، وإجراء التشريح لتعطيل المسالك العصبية على جانب واحد ، وتوفير رعاية ما بعد الجراحة.

يوضح هذا الفيديو طريقة لإحداث إصابة عصبية مستهدفة في ذبابة الفاكهة باستخدام ليزر عالي الطاقة. بعد وضع اليرقة تحت المجهر ، يقوم ليزر منخفض الطاقة بمسح الخلايا العصبية الفلورية ، ثم تزداد قوة الليزر لإحداث ضرر موضعي. يتم تأكيد الإصابة من خلال زيادة التألق وحفرة في موقع الإصابة.

يوضح الفيديو استخدام جهاز الصدمات عالية التأثير (HIT) للحث على إصابات الدماغ الرضحية المغلقة (TBI) في ذبابة الفاكهة . يتسبب إصابات الدماغ الرضية في صدمة دماغية ميكانيكية تؤثر على وظيفة الخلايا العصبية ، مما يؤدي بمرور الوقت إلى التنكس العصبي والوفيات.

يوضح هذا الفيديو تحريض إصابات الدماغ الرضحية المخترقة في ذبابة الفاكهة. يتم اختيار الذباب الناشئة حديثا وتخديرها ووضعها تحت مجهر استريو مجهز بالفلورة. يتم تحديد جسم الفطر المعبر عن GFP ، ويتم إدخال دبوس Minutien لإحداث إصابة. يسمح للذباب بالتعافي لمزيد من الدراسات.

المصدر: Shandra، O. et al., إحداث صرع ما بعد الصدمة في نموذج فأر لإصابات الدماغ الرضحية المنتشرة المتكررة. J. Vis. Exp.

يوضح هذا الفيديو تحريض إصابة الدماغ الرضحية (TBI) في فأر باستخدام جهاز إصابة إيقاع السوائل الجانبية (FPI). يتضمن الإجراء إحداث ثقب في جمجمة فأر مخدر لفضح الأم الجافية ، التي يتم توصيل قنية بها. ثم يتم توصيل الجرذ بالجهاز ، والذي يولد موجة ضغط تصل إلى الدماغ ، تحاكي إصابات الدماغ الرضية عن طريق التسبب في موت الخلايا العصبية وتلف الأوعية...

المصدر: يانغ ، ز. ، et.al. نموذج إصابة الرأس الارتجاجي المتكرر في الفئران. J. Vis. Exp. (2016). يوضح هذا الفيديو تحريض إصابات الرأس المتكررة في الفأر باستخدام جهاز تأثير كهرومغناطيسي. يتضمن الإجراء وضع طرف الصدمات بين الغرز الأمامية واللامدوية على جمجمة فأر مخدر واستخدام طرف مسبار لضبط عمق التأثير بدقة. يتم تسليم التأثير بسرعة وعمق متحكم فيهما لمحاكاة إصابات الدماغ الرضحية الخفيفة ، تليها فترة نقاهة ، مع تكرار الإصابات على فترات محددة.

المصدر: Logsdon، A. F.، et al. نموذج موجة الانفجار منخفضة الكثافة للتقييم قبل السريري لإصابات الدماغ الرضحية الخفيفة المغلقة في القوارض . J. Vis. Exp. (2020) يوضح هذا الفيديو تحريض إصابة الدماغ الرضحية الخفيفة المغلقة في نموذج الفأر باستخدام إعداد أنبوب صدمة الغاز المضغوط. تمزق موجة الضغط المتولدة غشاء البوليستر ، مما يؤدي إلى موجة صدمة لرأس الفأر تؤدي إلى حركة سريعة للدماغ داخل الجمجمة ، مما يتسبب في إصابة دماغية خفيفة...

المصدر: Macheda, T., et. al. نموذج الرأس المغلق الذي يتم التحكم فيه بالكهرومغناطيسية لإصابات الدماغ الرضحية الخفيفة في الفئران. J. Vis. Exp. (2022) يوضح هذا الفيديو إجراء إحداث إصابة في الرأس المغلق في نموذج الماوس باستخدام إطار تجسيم. يكرر التأثير المتحكم فيه إصابات الدماغ الرضحية الخفيفة ، مما يسمح للباحثين بدراسة الآثار العصبية والتعافي من خلال قياس ردود الفعل والسلوك بعد الإصابة.

المصدر: Elzat، E.Y.Y.، وآخرون، إنشاء نموذج إصابة الحبل الشوكي لكدمة الفئران بناء على تقنية طفيفة التوغل. J. Vis. Exp. (2022).يوضح هذا الفيديو طريقة إحداث إصابة كدمة على مستوى T9 في نموذج فأر ، باستخدام منصة متحدة المحور لإصابة الحبل الشوكي. يتم إسقاط الوزن على الحبل الشوكي على مستوى T9 مما يؤدي إلى كدمة تسبب على الفور تغير لون الأنسجة وتورمها.

المصدر: لاكشمان ، ن. ، وآخرون . اختبار الغلاف العصبي لتقييم تنشيط الخلايا الجذعية العصبية الذاتية في نموذج فأر للحد الأدنى من إصابة الحبل الشوكي. J. Vis. Exp. (2018). يوضح هذا الفيديو تنشيط وهجرة الخلايا الجذعية العصبية (NSCs) في نموذج إصابة الحبل الشوكي للفأر. لفضح الحبل الشوكي ، تتم إزالة فقرة من المنطقة الصدرية من العمود الفقري من فأر مخدر. ثم يتم إنشاء إصابة سطحية في المادة البيضاء للحبل الشوكي باستخدام إبرة مثنية تحافظ على القناة المركزية. بعد الإصابة ، يتم تنشيط الخلايا العصبية المحيطة...

المصدر: Kumar, S., et. al. نموذج الفأر لتقرحات الضغط بعد إصابة الحبل الشوكي. J. Vis. Exp. (2019) يوضح هذا الفيديو تحريضا مفصلا لإصابة الحبل الشوكي في الفئران. يتم تشريح الفأر المخدر لكشف فقرات T9-T10 ، وإزالة عملياتها الشائكية. ثم يتم تمرير الحبل الشوكي المكشوف لإحداث الإصابة. ثم يتم إغلاق المنطقة الجراحية ، ويسمح للفأر بالتعافي.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتقييم استيعاب البروتين المستهدف في الخلايا النجمية القشرية للفأر باستخدام البيوتينيل ، متبوعا بتحلل الخلية ، واستخراج البروتين القائم على الستربتافيدين ، والتمسخ ، وتحليل اللطخة الغربية لتأكيد الاستيعاب الناجح.

يوضح هذا الفيديو طريقة لتقييم نشاط البروتين باستخدام الخلايا العصبية في الحصين على مناطق البروتين المنقوشة. تظهر الخلايا العصبية تنافر في مناطق البروتين التجريبي والتعلق في مناطق البروتين الضابط ، مما يسلط الضوء على آثار نشاط البروتين الجذاب أو المثير للاشمئزاز.

يوضح هذا الفيديو تحريض الجلوكوما في فأر مخدر عن طريق حقن محلول ملحي مفرط التوتر في الوريد الإسكليكلي. يدخل المحلول الملحي إلى الشبكة التربيقية عبر قناة شليم ، مما يتسبب في تندب الأنسجة ، مما يمنع تدفق الخلط المائي ويرفع الضغط داخل العين. يؤدي الضغط المرتفع إلى إتلاف الخلايا العقدية الشبكية ، مما يؤدي إلى الجلوكوما.

تجانس الأنسجة باستخدام الخالط لإطلاق البروتينات ، بما في ذلك ديكاربوكسيلاز حمض الجلوتاميك ، أو الأشكال الإسوية لإنزيم GAD ، الضرورية لوظائف المخ.

< ص فئة = "jove_content">يوضح هذا الفيديو إجراء الوصول الجراحي إلى العصب البصري في مخدر وتوصيل الليزولسيثين بدقة للحث على إزالة الميالين البؤري ، مما يخلق ظروفا عصبية مرضية لمزيد من الدراسة.

احتضان الشريحة في aCSF التي تحتوي على ناقلات عصبية كاذبة فلورية أو FFNs.

يوضح هذا الفيديو تحريض النوبات الناجمة عن المناولة في فأر مصاب بفيروس التهاب الدماغ والنخاع الفئراني (TMEV). يتعرض الفأر المصاب ، الذي يحتوي على خلايا عصبية مفرطة الإثارة ، لمحفزات جسدية خارجية. يسبب هذا التعرض الإجهاد ، مما يؤدي إلى نشاط كهربائي غير طبيعي في الخلايا العصبية ، مما يؤدي إلى نوبات.

يوضح هذا الفيديو إجراء إحداث نوبات ناتجة عن الحرارة في فأر معدل وراثيا مصاب بطفرات جينية مرتبطة بالصرع عن طريق زيادة درجة حرارة الجسم تدريجيا في غرفة خاضعة للرقابة. يستخدم هذا البروتوكول لدراسة آليات النوبات والعلاجات المحتملة للصرع.

يوضح هذا الفيديو تحريض أحداث ictal في الشرائح القشرية الإكليلية من فأر معدل وراثيا يعبر عن القنوات الكاتيونية التي يتم تنشيطها بالضوء في الخلايا العصبية الهرمية القشرية المثيرة. يتم وضع الشريحة في غرفة التسجيل ، ويتم إدخال قطب تسجيل في الطبقة القشرية السطحية. عند التروية بدواء مسبب للنوبات يسد قنوات البوتاسيوم ، تصبح الخلايا العصبية مفرطة الإثارة وتولد أحداثا تلقائية. لتوليد أحداث ictal عند الطلب ، يتم استخدام نبضة ضوئية قصيرة لتنشيط القنوات الكاتيونية في الخلايا العصبية الهرمية ، مما يؤدي إلى...

يوضح هذا الفيديو عملية إحداث الصرع في الفئران باستخدام حقن البنتيلين تترازول (PTZ) ، وهو مضاد لمستقبلات GABA-A. يؤدي الإعطاء المتكرر داخل الصفاق ل PTZ إلى تقليل عتبة النوبات تدريجيا عن طريق تثبيط تدفق أيونات الكلوريد ، وتعطيل النقل العصبي المثبط ، ويؤدي إلى فرط الاستثارة في الخلايا العصبية التي تؤدي إلى النوبات. تؤدي هذه العملية إلى إشعال وتطور النوبات التلقائية ، التي تحاكي الصرع المزمن.

المصدر: Soukupová, M., et al. غسيل الكلى المجهري للأحماض الأمينية المثيرة أثناء تسجيلات مخطط كهربية الدماغ في الفئران التي تتحرك بحرية. J. Vis. Exp. (2018) يوضح هذا الفيديو تقييم مستويات الناقل العصبي الضثاري خارج الخلية في الفئران المصابة بتحريض الصرع المزمن. بعد زرع مسبار غسيل الكلى المجهري في الدماغ وتأكيد عدم وجود نوبات باستخدام تخطيط كهربية الدماغ (EEG) ، يتم جمع السائل خارج الخلية لتقييم مستويات الناقل العصبي المرتفعة في الفئران المصابة بالصرع. ثم يتم غرس محلول عالي البوتاسيوم للحفاظ على...

المصدر: Schönherr, S., et. al. الجمع بين الملصقات المناعية المتماثلة للبصريات الوراثية وكسر التجميد لفحص الترتيب الخاص بالمدخلات لمستقبلات الغلوتامات في اللوزة الدماغية في الفأر. J. Vis. Exp. (2016)يوضح هذا الفيديو الملصقات المناعية للنسخ المتماثلة المكسورة بالتجميد من أنسجة دماغ الفئران للفحص المجهري الإلكتروني. يتم هضم النسخ المتماثلة المكسورة والمغلفة لفضح المستقبلات. تتم إضافة الأجسام المضادة الأولية والثانوية ذات العلامات الذهبية لتسمية مستقبلات غشاء عصبي محددة. يتم تثبيت النسخة المتماثلة...

في هذا الفيديو، يتم خلط خلايا الورم الأرومي الدبقي والخلايا الدبقية الصغيرة بمحلول مصفوفة بوليمر ونقلها إلى غرفة مسامية حيث يتشكل هلام، مما يؤدي إلى تضمين الخلايا. تحفز الخلايا الدبقية الصغيرة هجرة خلايا الورم الأرومي الدبقي من خلال الإدخال المسامي ، وتحاكي غزو الخلايا السرطانية إلى الأنسجة المحيطة ، ثم يتم إصلاح الخلايا وإعدادها لمزيد من التحليل.

في هذا الفيديو ، يتم عرض طريقة لتمكين نقل الميتوكوندريا المصنفة بالفلورسنت إلى الخلايا الجذعية للورم الأرومي الدبقي (GSCs) من خلال الطرد المركزي. يتم تأكيد الامتصاص الناجح والتكامل الوظيفي للميتوكوندريا المانحة من خلال الكشف عن التألق باستخدام الفحص المجهري متحد البؤر.

المصدر: Guyon, J., et al. نموذج كروي ثلاثي الأبعاد للورم الأرومي الدبقي. J. Vis. Exp. (2020) يوضح الفيديو إنشاء نموذج كروي ثلاثي الأبعاد لغزو الخلايا السرطانية. تتكون الكرات الكروية من خلايا ورم الدماغ البشري ومدمجة في مصفوفة الكولاجين. تتبنى الخلايا السرطانية في المحيط الكروي نمطا ظاهريا غازيا ، وتفرز البروتياز لتحلل الكولاجين وتتقدم لغزو المصفوفة المحيطة.

المصدر: Lim, M., et al. نمذجة ورم خبيث في الدماغ عن طريق حقن الشريان السباتي الداخلي للخلايا السرطانية. J. Vis. Exp. (2022) في هذا الفيديو ، يخضع فأر مخدر لعملية جراحية يتم فيها حقن الخلايا السرطانية في الشريان السباتي المشترك (CCA) لتسهيل التوصيل المستهدف إلى الدماغ. يتضمن الإجراء خياطة دقيقة ومعالجة الشرايين السباتية لتوجيه الخلايا المحقونة نحو الشريان السباتي الداخلي (ICA) ، مما يعزز تكوين الورم في الدماغ بمرور الوقت.

المصدر: Ear, P. H., et. al. إنشاء وتوصيف الورم العصبي الصماوي للأمعاء الدقيقة. J. Vis. Exp. (2019) يوضح هذا الفيديو تلطيخ التألق المناعي لكرويات ورم الغدد الصم العصبية في الأمعاء الدقيقة. يتم تثبيت الكرويات ونفاذها وسدها ثم يتم احتضانها بالأجسام المضادة الأولية والثانوية. تضاف صبغة إلى نوى البقع قبل تركيبها وتصورها تحت المجهر الفلوري.

المصدر: Mudduluru, G., et . al. القياس في الوقت الفعلي القائم على المعاوقة لهجرة الخلايا السرطانية وغزوها. J. Vis. Exp. (2020) يوضح هذا الفيديو فحصا قائما على المعاوقة لقياس غزو خلايا الورم الأرومي الدبقي وهجرتها. تتحلل الخلايا المصفوفة خارج الخلية ، وتتحرك عبر الأغشية الصغيرة التي يسهل اختراقها ، وتلتصق بأقطاب كهربائية ، مما يولد مقاومة. يعكس هذا التحليل في الوقت الفعلي إمكاناتها الغازية لتطبيقات أبحاث السرطان.

المصدر: Bolcaen, J., et. al. ، التشعيع الموجه بالتصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني والتصوير بالرنين المغناطيسي لنموذج فأر الورم الأرومي الدبقي باستخدام مشعاع دقيق. J. Vis. Exp. (2017) يوضح هذا الفيديو إجراء إنشاء نموذج فأر الورم الأرومي الدبقي عن طريق حقن خلايا الورم الأرومي الدبقي المسببة لورم الدماغ في قشرة الفص الجبهي.

المصدر: Mendez، F. M. et al.، ترسيب مناعي للكروماتين الأصلي باستخدام المجالات العصبية لأورام دماغ الفئران. J. Vis. Exp. (2018). يوضح هذا الفيديو عزل مجمعات البروتين والحمض النووي عن خلايا الغلاف العصبي المشتقة من ورم في دماغ الفأر باستخدام ترسيب المناعة الأصلي للكروماتين. يوضح بالتفصيل خطوات تحضير الكروماتين ، والترسيب المناعي ، والغسيل ، وهضم البروتين لإطلاق الحمض النووي لتحليله في اتجاه مجرى النهر.

المصدر: Núñez, F. J., et al. تقييم المؤشرات الحيوية في الورم الدبقي بواسطة الكيمياء المناعية على مزارع الغلاف العصبي ثلاثية الأبعاد للورم الدبقي المضمنة في البارافين. J. Vis. Exp. (2019). يوضح هذا الفيديو تقنية كيميائية مناعية لوضع العلامات الحيوية للورم في المجالات العصبية لورم الدماغ المضمنة في البارافين. تخضع أقسام الغلاف العصبي لإزالة البارافين وإعادة الجفاف ، يليه العلاج لفضح مواقع المؤشرات الحيوية. ثم يتم تطبيق الأجسام المضادة الأولية والثانوية لتسمية هذه المؤشرات الحيوية. ترتبط الأجسام...