تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< ص الفئة = "jove_title" >
1. المواد
- تحضير حقن LPS
- أضف 25 مل من الماء المقطر إلى 25 مجم من مسحوق LPS المشتق من السالمونيلا التيفيموريوم إلى تركيز نهائي قدره 1 مجم / مل. قم بتخزين الحقن في أنبوب معقم عند 4 درجات مئوية
أنذر: LPS سام.
< p class = "jove_title" >
2.
- يتناول LPS لذكور فئران Sprague-Dawley (SD) ، الذين تتراوح أعمارهم بين 10 أسابيع (متوسط الوزن: 280 ± 20 جم) عن طريق الحقن داخل الصفاق.
أنذر: إذا تم شراء الفئران من منظمة أخرى ، فيجب ألا تقل المرحلة التكيفية عن 7 أيام.
فئة
3. حقن LPS
- حقن LPS داخل الصفاق في كل فأر بجرعة 1 ملغ/كغ وإعادة الفئران إلى قفص منزلهم.
ملاحظه: التخدير ليس ضروريا.
- بعد ست ساعات ، قم بحقن نفس الجرعة من حقن LPS في الفئران.
- بعد ستة عشر ساعة حقن نفس جرعة LPS في الفئران.
أنذر: قد يؤدي حقن الفئران SD بجرعة 1 مجم / كجم إلى معدل وفيات بنسبة 5٪. يمكن أن يزداد معدل الوفيات في الفئران الأصغر سنا أو الأكبر سنا أو إناث الفئران الحوامل.
- أعد الفئران إلى أقفاصها بعد حقن LPS ووفر الوصول المخصص إلى الطعام والشراب.
ملاحظه: ستظهر الفئران استجابة التهابية جهازية مميزة ، وبالتالي يجب أن تظل الأقفاص نظيفة طوال التجربة. يجب مراقبة الفئران بشكل متكرر (2x day) للوزن والمظهر العام والموقف بعد حقن LPS الأول. إذا بدأت الفئران في إظهار وضعية منحنية ، أو عدم الرغبة في الحركة ، أو فقدان الوزن بشكل كبير (>20٪) ، أو تلطيخ البورفيرين ، فيجب قتلها رحيما بشكل إنساني قبل نهاية الدراسة التي تستغرق 7 أيام.
