نموذج في المختبر لإصابة التمدد في الخلايا العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان

الملخص

< p class = "jove_content" >المصدر: فيليبس ، جي كي وآخرون. طريقة لإصابة التمدد عالية السرعة للخلايا العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان في شكل 96 بئرا. J. Vis. Exp. (2018)

يوضح هذا الفيديو عملية إحداث إصابة تمدد على الخلايا العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات (hiPSCNs). تؤخذ الخلايا في صفيحة متعددة الآبار بلا قاع مع غشاء سيليكون متصل. يتم تطبيق الضغط الميكانيكي المتحكم فيه على الغشاء للحث على اضطراب الهيكل الخلوي وتلف غشاء الخلية ، مما يؤدي إلى نمط ظاهري لإصابة التمدد في الخلايا.

البروتوكول

فئة

1. تصنيع الألواح

1. قم بمعالجة البلازما من 96 بئرا مع منظف بلازما بقوة 200 واط (انظر جدول المواد) لمدة 60 ثانية على طاقة عالية ، ووضعها في الجانب السفلي لأعلى داخل منظف البلازما. تحقق من وجود توهج أرجواني مرئي من خلال نافذة الغرفة ، مما يشير إلى تكوين بلازما فعالة. تقنية الترابط هذه مقتبسة من Sunkara et al.
2. في غضون 60 ثانية، ضع الجزء العلوي من اللوحة في 200 مل من 1.5٪ (3-أمينوبروبيل) ثلاثي إيثوكسيسيلان (APTES) في ماء منزوع الأيونات (DI) لمدة 20 دقيقة، بحيث يكون الجانب السفلي لأسفل. هذا الحل غير مستقر: قم بإعداده لمدة لا تزيد عن 60 ثانية قبل إدخال اللوحة.
   أنذر: العمل مع APTES في غطاء الدخان.
3. تعالج البلازما غشاء السيليكون المستخرج في منظف البلازما لمدة 60 ثانية على طاقة عالية. حدد وقت العلاج بالبلازما بحيث لا ينتهي أكثر من 5 دقائق قبل نهاية فترة ال 20 دقيقة في الخطوة 1.2.
4. استخدم الملقط لوضع الغشاء المعالج بالبلازما فوق مستطيل ورق زبدة مقاس 7.5 × 11 سم². قم بمحاذاة لوح ألومنيوم مقاس 7.5 سم × 11 سم × 0.5 سم على الجزء السفلي من مشبك تصنيع اللوحة. قم بمحاذاة غشاء السيليكون وورق البرشمان على لوح الألمنيوم باستخدام الملقط.
5. قم بإزالة أسطح الألواح من حمام APTES وتخلص من المحلول الزائد. اغمس في حمام مائي DI سعة 200 مل لمدة 5 ثوان وتخلص من الماء الزائد. اغمس في حمام مائي DI مختلف سعة 200 مل لمدة 5 ثوان وتخلص من الماء الزائد. استبدل الماء في هذه الحمامات قبل غمس سطح طبق آخر.
6. استخدم الهواء المضغوط لتجفيف الجزء العلوي من اللوحة تماما.
7. ضع الجزء العلوي من اللوحة في الجزء العلوي من مشبك تصنيع اللوحة. أغلق مشبك تصنيع اللوحة برفق للضغط على الجزء العلوي من اللوحة والسيليكون معا. المشبك لمدة 1 ساعة على الأقل.
8. اترك اللوحة تلتجف لمدة 24 ساعة في درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام ، محمية من الغبار.

< p class = "jove_title" >2. تمديد اللوحة

1. تنظيف المسافات البادئة
   1. قم بإعداد جهاز صوتي على شكل حمام بقدرة 60 واط مع ماء DI في درجة حرارة الغرفة.
   2. ادعم كتلة المسافة البادئة فوق حمام الصوتنة ، مقلوبة بحيث يتم غمر قمم المسافات البادئة فقط على عمق لا يقل عن 1 مم.
   3. جفف المسافات البادئة بالهواء المضغوط.
2. محاذاة كتلة المسافة البادئة
   1. ضع كاميرا مع تغذية مباشرة فوق جهاز التمدد بحيث تنظر لأسفل على مصفوفة المسافة البادئة. ركز على قمم المسافات البادئة.
      ملاحظه: الإعداد الموضح في القسم 3 ، "توصيف تمدد الغشاء" ، هو أحد إعدادات الكاميرا المحتملة لهذه المهمة.
   2. قم بتأمين لوحة على مسرح جهاز الإصابة باستخدام مشابك المسرح (الشكل 1) وضع ضوء قبة فوق الجهاز.
      ملاحظه: انظر جدول المواد لبرنامج التحكم في الأجهزة.
   3. قم بتشغيل برنامج التحكم في الجهاز بالنقر فوق رمز البرنامج الموجود على سطح مكتب الكمبيوتر الذي يتحكم في جهاز الإصابة. قم بتشغيل مشروع "in_vitro_neurotrauma.lvproj" بالنقر فوقه في نافذة التشغيل. من نافذة المشروع ، قم بتشغيل الأدوات الافتراضية للتحكم في الحركة وتتبع الموضع (VIs) ، والتي تسمى "motion_control.vi" و "position_tracker.vi" ، على التوالي ، عن طريق النقر المزدوج عليها.
   4. أغلق القفص المحيط بجهاز الإصابة. اضغط على زر "السهم" في الزاوية العلوية اليسرى من التحكم في الحركة VI لتشغيل VI وانقر فوق "بالقرب من القاع" لخفض المرحلة إلى حدود 2 مم من الاتصال بالمسافات البادئة. انقر فوق الزر "إيقاف" لإيقاف VI.
      أنذر: أبق يديك بعيدة عن نقالة عند التلاعب بالكاميرا في القفص. يجب أن يكون القفص مزودا بمفتاح باب ينقل الطاقة إلى جهاز التمدد فقط عند إغلاق باب القفص.
   5. في نافذة المشروع ، انقر بزر الماوس الأيمن على "المحور 1". انقر فوق "لوحة الاختبار التفاعلية". في النافذة التي تفتح ، اضبط حجم الخطوة على 50 ميكرومتر عن طريق إدخال "500" وحدة في حقل "موضع الهدف".
   6. انقر فوق الزر الأخضر "go" في الجزء السفلي من نافذة "لوحة الاختبار التفاعلية" بشكل متكرر حتى تتلامس اللوحة لأول مرة مع أي مسافات بادئة. تحقق من وجود جهة اتصال في الصورة الحية التي تعرضها الكاميرا. لاحظ موضع المرحلة الرأسية الذي تم الإبلاغ عنه في الجزء العلوي الأيسر من نافذة "لوحة الاختبار التفاعلية" ؛ هذا هو أول موقف اتصال.
   7. اخفض أكثر (كما هو موضح في الخطوة 2.2.6) حتى يتلامس كل بئر مع المسافات البادئة. إذا لزم الأمر ، حرك الكاميرا لرؤية اللوحة بأكملها وحرك المرحلة لأعلى (عن طريق تحديد "موضع الهدف" السلبي) ولأسفل. لاحظ موضع المرحلة الرأسية الذي تم الإبلاغ عنه في الجزء العلوي الأيسر من النافذة عندما تكون جميع المشاركات على اتصال (هذا هو موضع الاتصال الكامل).
   8. لاحظ الفرق بين موضع الاتصال الأول ومواقف الاتصال الكاملة. أغلق "لوحة الاختبار التفاعلية". قم بتشغيل "التحكم في الحركة VI" (انظر الخطوة 2.2.4) وانقر على "أعلى" لرفع المرحلة. أوقف التحكم في الحركة VI باستخدام زر "إيقاف".
   9. بمجرد أن تصبح المرحلة في الجزء العلوي من سفرها ، افتح الباب لإلغاء تنشيط الجهاز. اضبط مسامير التثبيت على زوايا كتلة المسافة البادئة. قم بفك المسمار المثبت الموجود في الزاوية التي أجريت ملامسة أولا ، لخفضه وشد المسمار المقابل لرفع الزاوية التي جعلت الاتصال أخيرا.
   10. كرر عملية خفض المرحلة حتى تتصل اللوحة بالمسافات البادئة ، وفحص صور التلامس للإمالة ، ورفع المسرح ، وضبط (الخطوة 2.2.9) كتلة المسافة البادئة. عندما تتم محاذاة المرحلة والكتلة ، ستقوم جميع المسافات البادئة بالاتصال مرة واحدة.
   11. افتح الباب لإلغاء تنشيط الجهاز. أدخل مسامير الربط في فتحاتها الموجودة على كتلة المسافة البادئة وشدها. تأكد من أن الكتلة مستوية مع مسامير الربط في مكانها (الخطوات 2.2.4-2.2.8). لاحظ موضع المسرح الذي أبلغت عنه "لوحة الاختبار التفاعلية" عندما تتلامس اللوحة. سيكون هذا هو موضع الصفر لتجارب المسافة البادئة.
3. قم بتشحيم المسافات البادئة
   1. إذا تم إعداد كتلة المسافة البادئة للتو ولم يتم تشحيمها بعد ، فقم بتنظيف وسادة مطاطية صلبة (7.5 سم × 11 سم × 1.5 مم) ووسادة مطاطية ناعمة مغلقة الخلية (7.5 سم × 11 سم × 3 مم) بمنديل مختبر مبلل بالإيثانول. دعهم يجفوا في الهواء.
   2. انقع منديل المختبر في زيت الذرة ووزعه على وسادة مطاطية صلبة للحصول على لمعان باهت.
   3. ضع وسادة الرغوة على الوسادة المطاطية الصلبة لنقل الزيت إلى وسادة الرغوة. ضع لوح ألومنيوم مقاس 7.5 سم × 11 سم × 0.5 سم أعلى وسادة الرغوة وقم بتحميله بوزن صابورة يبلغ حوالي 360 جم (على سبيل المثال ، 6 أنابيب مخروطية محملة ب 45 مل من الماء لكل منها) لضمان النقل المتسق للزيت من الوسادة المطاطية الصلبة إلى وسادة الرغوة. اترك 10 ثوان حتى ينتقل الزيت إلى الوسادة المطاطية الرغوية.
   4. حرك الوسادة المطاطية الرغوية إلى مجموعة المسافة البادئة. ضع لوح الألمنيوم ووزن الصابورة فوقه لضمان النقل المتسق للزيت إلى أطراف المسافات البادئة. اترك 10 ثوان حتى ينتقل الزيت إلى المسافات البادئة.
   5. إذا لم يتم شد أي لوحة منذ إعداد كتلة المسافة البادئة وتشحيمها لأول مرة ، فقم بتمديد لوحة الاختبار قبل بدء التجربة. ملاحظة: سيمنع هذا أي تناقض بين التمدد الأول والامتدادات اللاحقة من إرباك التجربة. بالنسبة للفترات اللاحقة ، كرر الخطوات 2.3.2-2.3.5 فقط قبل كل امتداد.
4. مد لوحة
   1. قم بتشحيم المسافات البادئة كما هو موضح في الخطوة 2.3.
   2. قم بتأمين اللوحة على مسرح جهاز الإصابة باستخدام مشابك المسرح. إذا كان العقم مطلوبا ، فاضبط موضع الغطاء لتأمين اللوحة دون تعريض سطح المزرعة لهواء الغرفة.
   3. اخفض المرحلة إلى موضع الصفر باستخدام "التحكم في الحركة VI" (انظر الخطوات 2.2.4-2.2.6) ؛ يتم تحديد موضع الصفر خلال الخطوة 2.2.
   4. قم بتغيير اسم الملف في حقل "مسار الملف" في "تتبع الموضع VI" إلى اسم ملف فريد ، ثم قم بتشغيله باستخدام زر "السهم" في الزاوية العلوية اليسرى من تلك النافذة.
   5. اضبط عمق المسافة البادئة ومدتها (عادة 1-4 مم و 30 مللي ثانية ، على التوالي ، أقصى عمق 5 مم ، المدة الدنيا 15 مللي ثانية) في حقلي "الإصابة (مم)" و "مدة الإصابة (مللي ثانية)" في "لوحة التحكم في الحركة VI" بالنقر فوق الحقول وكتابة القيم المطلوبة.
   6. قم بتشغيل "لوحة التحكم في الحركة VI" وانقر على "جرح" لوضع مسافة بادئة للوحة.
   7. انقل المسرح إلى أعلى سفره بالنقر فوق "أعلى". ثم أوقف VI باستخدام زر "إيقاف" وقم بإلغاء تنشيط جهاز الإصابة عن طريق فتح الباب.
   8. افحص تاريخ الإزاحة للمرحلة المعروضة في "متتبع الموضع السادس" للتأكد من تطبيق الحد الأقصى المحدد للإزاحة. انقر بزر الماوس الأيمن على الرسم البياني وانقر على "تصدير إلى Excel". انقر فوق "ملف| حفظ" لحفظ البيانات.

< p class = "jove_title" >3. توصيف تمدد الغشاء

1. قم بطلاء التجويف في الجزء العلوي من كل مسافة بادئة باللون الأبيض لتوفير خلفية عالية التباين لتصوير الفيديو عالي السرعة. تحذير: لا تقم بطلاء حواف المسافات البادئة حيث تتلامس مع الألواح.
2. طباعة ثلاثية الأبعاد مع بولي (حمض اللاكتيك) (PLA) ، أو تلفيق ختم أسطواني لعمل نقطة في كل بئر. اجعل الأسطوانة بقطر 5.9 مم وارتفاع 12.2 مم ، مع نتوء أسطواني بقطر 1.5 مم وارتفاع 1.0 مم في الأعلى.
3. تعالج البلازما اللوحة على الجانب الأيمن لأعلى لتنشيط سطح ثقافة خلايا السيليكون في الآبار لمدة 60 ثانية ، كما هو مذكور في الخطوة 2.1.
4. ضع اللوحة على وسادة مطاطية أو سطح ناعم آخر. قم بتجهيز النتوء الصغير على الختم (انظر الخطوة 1.2) بالحبر من قلم تحديد دائم. أدخل الختم في البئر المراد اختباره واضغط لضمان النقل الجيد للحبر. قم بتجهيز الطابع قبل كل بئر.
5. قم بمحاذاة كتلة المسافة البادئة وقم بتليين المسافات البادئة لجهاز الإصابة (انظر الخطوات 2.2-2.3). قم بتثبيت اللوحة على مسرح جهاز الإصابة. ضع ضوءا محوريا ساطعا منتشرا فوق جهاز الإصابة.
6. قم بإعداد كاميرا عالية السرعة على حامل ذراع الرافعة فوق جهاز الإصابة، متجها لأسفل مباشرة، مع ضبط العدسة على أصغر نقطة توقف مرقمة بالإصابة، وقم بتشغيلها. قم بتشغيل برنامج الكاميرا على الكمبيوتر المتصل بالكاميرا. في القائمة المنسدلة معدل الإطارات، حدد 2,000 إطار في الثانية، وفي القائمة المنسدلة للغالق، حدد أسرع وقت تعريض ضوئي ينتج عنه صور عالية التباين. توسيط فوق الآبار المنقطة.
   1. ضع الكاميرا بحيث يحتوي مجال الرؤية على 12 بئرا في شبكة 3 × 4.
      ملاحظه: يوفر مجال الرؤية هذا حلا وسطا مثاليا بين الإنتاجية والدقة لصورة مقاس 1,280 × 1,024.
7. اخفض اللوحة إلى نقطة الصفر (انظر الخطوات 2.2.4-2.2.6). بنقرة واحدة على زر التسجيل في برنامج الكاميرا بحيث يقرأ "الزناد". ابدأ متتبع الموقف السادس (الخطوة 2.4.4).
8. قم بتشغيل الضوء المحوري الساطع المنتشر. ضع مسافة بادئة للوحة كما هو موضح في الخطوة 2.4.6.
9. أطفئ الضوء المحوري الساطع المنتشر.
10. على كمبيوتر التحكم في الكاميرا ، ابحث عن نافذة 30-40 مللي ثانية للتسجيل التي تحدث فيها المسافة البادئة: اسحب سهمي البداية والنهاية في شريط تشغيل الفيديو عالي السرعة في برنامج الكاميرا. انقر فوق حفظ ، وقم بتعيين الاسم في حقل "اسم الملف" ، وحدد "TIFF" في حقل "التنسيق" ، وانقر فوق "حفظ".
    1. انظر من خلال نطاق . ملفات TIF للصور الأقل تمددا (البداية) والأكثر امتدادا (المسافة البادئة الذروة).
    2. لقياس ارتفاع وعرض النقاط في كلتا الصورتين ، استخدم فيجي لفتح صور التمدد الأقل والذروة جنبا إلى جنب. باستخدام أداة التحديد المستطيلة الافتراضية، انقر واسحب لرسم مربع حول نقطة في الصورة الأقل امتدادا قم بقياس الارتفاع والعرض باستخدام "التحليل | القياس".
    3. كرر للنقطة في نفس البئر على صورة ذروة التمدد. كرر لبقية الآبار.
11. احسب سلالة لاغرانج في الاتجاهين x و y على النحو التالي:
    
    ملاحظه: هنا ، E_xx هي سلالة Lagrangian في الاتجاه x ، E_yy هي سلالة Lagrangian في الاتجاه y ، X هو عرض النقطة ، Y هو ارتفاع النقطة ، _f يشير إلى الصورة النهائية (أي صورة المسافة البادئة الذروة) ، و _i يشير إلى الصورة الأولية (أي صورة ما قبل المسافة البادئة). متوسط القيمتين لتحديد الإجهاد في ذلك البئر.

< p class = "jove_title" >4. طلاء الخلايا المستنبتة

1. الأوتوكلاف الصناديق وأوزان الصابورة التي سيتم استخدامها للتعقيم.
2. تعالج البلازما الألواح ذات القاع السيليكوني على الجانب الأيمن لأعلى لمدة 60 ثانية (انظر الخطوة 1.1). اغمر الألواح على الفور في صناديق معقمة تحتوي على 70٪ إيثانول لمدة 15 دقيقة.
3. اغمر الألواح في محلول ملحي معقم بالفوسفات (PBS) في صناديق معقمة منفصلة لمدة 30 دقيقة.
4. استنشق PBS من الآبار. جفف طبقا واحدا فقط في كل مرة لمنع الآبار من فقدان العلاج بالبلازما.
   أنذر: توفر الألواح ذات القاع المصنوع من السيليكون ردود فعل لمسية أقل من الألواح الصلبة عند سحب العينة ومن المرجح أن تسد طرف الماصة.
5. أضف 100 ميكرولتر من 0.1 مجم / مل بولي إل أورنيثين (PLO) لكل بئر إلى الألواح المعقمة. احتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 1 ساعة.
6. اشطف الآبار مرتين باستخدام 100 ميكرولتر PBS معقم ، مع ترك الغسيل الثاني على الآبار حتى يصبح تعليق الخلية جاهزا.
7. قم بإزالة قارورة hiPSCNs من تخزين النيتروجين السائل باستخدام قفازات السلامة وضعها على الثلج الجاف. انقل القارورة بسرعة إلى حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية وقم بإذابة الثلج لمدة 3 دقائق بالضبط. لا تقم بتدوير القارورة.
8. في غطاء معقم ، انقل محتويات القارورة برفق إلى أنبوب مخروطي سعة 50 مل باستخدام ماصة مصلية سعة 1 مل.
9. اشطف القارورة المبردة الفارغة ب 1 مل من وسط الصيانة الكامل بدرجة حرارة الغرفة (قاعدة الوسائط + المكملات الغذائية).
10. انقل 1 مل من الوسائط إلى أنبوب سعة 50 مل بالتنقيط بحوالي قطرة واحدة في الثانية. قم بتدوير الأنبوب برفق أثناء الإضافة. أضف 8 مل من وسط الصيانة الكامل بدرجة حرارة الغرفة إلى أنبوب 50 مل بحوالي 2 قطرة / ثانية.
11. قم بتغطية الأنبوب وقلبه 2-3 مرات. عد الخلايا باستخدام مقياس كثافة الدم. احسب حجم الوسائط الإضافية المطلوبة لتخفيف تعليق الخلية إلى 225,000 خلية/مل.
12. قم بوضع كمية الوسائط (المحسوبة أعلاه) برفق في أنبوب معلق الخلية باستخدام ماصة مصلية سعة 25 مل.
13. أضف 10 ميكرولتر من مخزون اللامينين 1 ملغم/مل لكل 1 مل من تعليق الخلية مع ماصة دقيقة سعة 1,000 ميكرولتر لتحقيق 10 ميكروغرام/مل من اللامينين في معلق الخلية. قم بالشفيق لأعلى ولأسفل مرة واحدة باستخدام الطرف المستخدم في اللامينين ، ثم قم بتغطية الأنبوب وقلب الأنبوب مرة واحدة.
14. استنشق PBS من الألواح ، لوحة واحدة في كل مرة. استخدم ماصة متعددة القنوات لإضافة 100 ميكرولتر من معلق خلية hiPSCN إلى كل بئر. تبلغ مساحة زراعة الآبار 0.33 سم² ، وبالتالي فإن كثافة الخلايا لكل منطقة هي 67,500 خلية / سم².
15. ضع الأطباق في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة بعد البذر لتعزيز التعلق. لتجنب اهتزازات المروحة لغطاء المزرعة المعقم ، ضع الألواح المغطاة على مقعد المختبر. احتضان المزارع عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون₂.
16. قم بإجراء تغيير كامل للوسائط في 24 ساعة ، وأعد ملء الآبار ب 200 ميكرولتر من وسائط الصيانة الكاملة. قم بإجراء تغيير نصف وسائط بمقدار 100 ميكرولتر / بئر كل 2-3 أيام.

< p class = "jove_title" >5. إصابة الثقافات

1. قم بمحاذاة كتلة المسافة البادئة وابحث عن موضع الصفر كما هو موضح في الخطوة 2.2. قم بتشحيم المسافات البادئة كما هو موضح في الخطوة 2.3.
2. قم بتعيين اسم الملف لسجل الإزاحة في "متتبع الموقف VI" (الخطوة 2.4.4). اضبط معلمات الإصابة في "التحكم في الحركة السادس" (الخطوة 2.4.5).
3. خذ اللوحة المراد إصابتها من الحاضنة وقم بتثبيتها على المسرح. اضبط موضع الغطاء لتأمين اللوحة دون تعريض المزارع لهواء الغرفة.
4. اخفض اللوحة إلى نقطة الصفر (الخطوات 2.2.4-2.2.6) باستخدام "التحكم في الحركة VI". ابدأ "متتبع الموقف السادس" (الخطوة 2.4.4).
5. استخدم عنصر التحكم في الحركة VI لوضع مسافة بادئة للوحة (كما هو موضح في الخطوة 2.4.6). بالنسبة لتمارين الإطالة الوهمية ، تخطي هذه الخطوة فقط.
6. أعد المسرح إلى أعلى نطاق حركته (انظر الخطوة 2.4.7). أعد الطبق إلى الحاضنة.
7. افحص تتبع الإزاحة واحفظه (كما في الخطوة 2.4.8).

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل 1: تخطيطي مسمى لجهاز الإصابة.(أ) منظر علوي، (ب) عرض متساوي القياس، (ج) منظر أمامي، (د) منظر جانبي يمين. ينطبق شريط المقياس على طرق العرض الإملائية (A وB وD).

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات .010 "ورقة سيليكون التصنيع المتخصص، Inc #70P001200010 ورقة بولي ديميثيل سيلوكسان (PDMS) سباركلين فيشر ساينتيك #043204 256665 Nunc فيشر ساينتيك # 12-565-600 لوحة 96 بئر بلا قاع مناديل كيم المبللة ULINE إس 8115 منظف البلازما هاريك بلازما #PDC-001-HC (3-أمينوبروبيل) ثلاثي إيثوكسيسيلان سيجما ألدريتش #440140 APTES ورق زبدة رينولدز غير متاح قبة ضوء شركة CCS LFX2-100SW قبة ضوء التيار الكهربائي شركة CCS PSB-1024VB وحدة الإضاءة المنتشرة المحورية سيمنز نيرلايت DOAL-75-LED ضوء محوري منتشر مصفوفة LED عالية الطاقة كري XLamp CXA2540 مصفوفة LED عالية الطاقة حامل LED موليكس 1807200001 حامل LED مزود طاقة LED يعني جيدا إتش إل جي - 320 إتش - 36 ب مصدر طاقة تيار مستمر برنامج FastCam Viewer فوترون كاميرا softeware فاست كام ميني UX50 فوترون غير متاح كاميرا عالية السرعة Micro-NIKKOR مقاس 105 مم f/2.8 نيكون #1455 عدسة الكاميرا عالية السرعة 0.1 مجم / مل بولي إل أورنيثين سيجما ألدريتش #P4597 iCells الديناميكا الخلوية الدولية #NRC-100-010-001 وسائط iCell الديناميكا الخلوية الدولية #NRM-100-121-001 مكمل iCell الديناميكا الخلوية الدولية #NRM-100-031-001 لامينين سيجما ألدريتش #L2020 مشغل ملف الصوت بي آي كيمكو LA43-67-000A التشفير الخطي البصري رينيشو تي 1031-30 أ محرك سيرفو ضوابط كوبلي زينوس XTL وحده تحكم الصكوك الوطنية cRIO 9024 وحدة تحكم PowerPC في الوقت الحقيقي هيكل cRIO الصكوك الوطنية سي ريو 9113 وحدة الإدخال الرقمي الصكوك الوطنية NI 9411 هيكل اكتساب البيانات الصكوك الوطنية 9113 LabVIEW الصكوك الوطنية hiPSCNs الديناميكا الخلوية الدولية