تقنية لإلحاق إصابات الدماغ الرضحية المغلقة في ذبابة الفاكهة

الملخص

المصدر: Sun ، M. ، et al. طريقة جديدة لنمذجة اعتلال الدماغ الرضحي المزمن في ذبابة الفاكهة. J. Vis. Exp. (2017).

يوضح هذا الفيديو إجراء لإحداث إصابة مؤلمة مغلقة في الرأس في ذبابة الفاكهة المخدر باستخدام جهاز إضراب مع اصطدام يعمل بالغاز. تؤثر الإصابة على وظيفة الخلايا العصبية وتضعف القدرة على المشي.

البروتوكول

< p class = "jove_title" >1. تجميع جهاز الإضراب (الشكل 1)

1. قم بإزالة المكبس من حقنة توبركولين سعة 1 مل. قطع البرميل عند علامة 1 مل.
2. قم بإزالة حاجز الهباء الجوي (ارتفاع 3 مم × قطر 4 مم) من طرف ماصة سعة 200 ميكرولتر واستخدمه كعامل ارتدام. ضع الاصطدام داخل برميل المحقنة. اضغط برفق على الأسطوانة لتحريك المصطادم إلى طرف الطرف ، بحيث يغطي الجانب المسطح فتحة الفوهة.
3. قم بتوصيل طرف الأسطوانة بأنبوب بلاستيكي متصل بمنظم تدفق ثاني أكسيد الكربون (CO₂) لمحطة تخدير ذبابة الفاكهة.
4. أمسك البرميل عموديا وقم بتثبيته على حامل مشبك قياسي بحيث يظل الاصطدام في الجزء السفلي من البرميل.
5. قم بتعديل طرف ماصة 200 ميكرولتر لعمل حامل الذبابة.
   1. قم بقص 4 مم من الطرف لعمل فتحة قطرها 0.8 مم ، مما يسمح فقط بالكشف عن رأس الذبابة.
      ملاحظة: سيبقى الصدر وجميع الأجزاء الأخرى من جسم الذبابة داخل طرف الماصة.
6. قم بتعديل طرف ماصة سعة 1,000 ميكرولتر وغطاء إبرة حقنة سعة 1 مل لعمل الموصل.
   1. قطع 44 مم من فتحة الحافة. خذ غطاء إبرة حقنة بطول 6 مم 1 مل وادفعه بإحكام في الجزء المتبقي من طرف الماصة سعة 1,000 ميكرولتر.

2. تشغيل جهاز الضربة

1. تخدير ذبابة أنثى بالغة تبلغ من العمر يومين باستخدام ثاني أكسيد الكربون₂ على وسادة ذبابة.
2. انقله برفق إلى حامل الذبابة باستخدام فرشاة دقيقة. اضغط على الحامل برفق حتى يظهر رأس الذبابة خارج طرف الطرف. إذا تعرض خرطوم الذبابة خارج الحافة ، فقم بثنيه برفق داخل الطرف بإبرة حقنة مخففة سعة 1 مل.
   ملاحظه: تأكد من الاحتفاظ بخطوم الذبابة داخل الحامل. خلاف ذلك ، قد تموت الذبابة من إصابة خرطوم مص.
3. شد حامل الذبابة ببرميل المحقنة باستخدام الموصل بحيث يكون رأس الذبابة متجها لأسفل.
4. اضبط ضغط الغاز على 100 كيلو باسكال. اضبط معدل التدفق وفقا لتصميم التجربة.
5. قم بتشغيل وإيقاف تشغيل مفتاح تبديل منظم التدفق بسرعة بحيث يضرب الاصطدام رأس الذبابة مرة واحدة.
6. ارفع حامل الذبابة وحركه فوق وسادة الذبابة. اعكس حامل الذبابة واضغط برفق على الجانب للسماح للطيران بالخروج. اترك الذبابة في قارورة فارغة لتتعافى.

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل 1. رسم تخطيطي لجهاز الإضراب. استخدم الجهاز مواد متوفرة بسهولة في مختبر ذبابة الفاكهة: 1) طرف ماصة 200 ميكرولتر ، 2) 1 مل من حقنة السل ، 3) الاصطدام ، 4) أنبوب توصيل متصل بمحطة تخدير ذبابة الفاكهة ، و 5) موصل لتشديد الطرف على المحقنة.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات حاجز الهباء الجوي الولايات المتحدة الأمريكية العلمية 1120-8810 تستخدم كتأثير 200 ul طرف ماصة الولايات المتحدة الأمريكية العلمية 1111-0706 تستخدم كحامل رأس ذبابة 1000 ul طرف ماصة الولايات المتحدة الأمريكية العلمية 1122-1830 تستخدم كموصل 1 مل حقنة توبركولين بيكتون ديكنسون 309625 أطباق بتري 60 مم فيشر ساينتيك FB0875713A تستخدم كساحات تتبع منظم التدفق جينيسي العلمية 59-122 مرحاض حامل / حامل المشبك القياسي إيسكو العلمية CH0688 فرشاة فاين جينيسي العلمية 59-204 فلايباد جينيسي العلمية 59-114