$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
1. جراحة استئصال نصفي الصدر
- ارتد معدات الحماية المناسبة (القفازات والقناع والعباءات) للحفاظ على بيئة معقمة للجراحة. نظف منطقة الجراحة بمناديل كحولية ، وضع ستائر جراحية معقمة فوق المجال الجراحي. تعقيم الأدوات الجراحية ووضعها في المجال الجراحي.
- قم بتخدير الجرذ تحت خليط من غاز الأيزوفلوران (3٪ حث ، 0.5-3٪ صيانة) والأكسجين (1 لتر / دقيقة). تأكد من عمق التخدير الجراحي المناسب عن طريق التحقق من عدم وجود قرصة إصبع القدم واستجابات انعكاس القرنية. راقب الجرذ باستمرار أثناء الإجراء بأكمله واضبط كمية توصيل المخدر كما هو مطلوب للحفاظ على عمق التخدير الجراحي.
- احلق الجذع الظهري بين الورك والرقبة ، ضع الجرذ في المجال الجراحي ، وقم بتطهير موقع الشق بمناديل الكحول ومحلول البروفيودين ، وحافظ على درجة حرارة الجسم الأساسية عند 37 درجة مئوية باستخدام وسادة تسخين يتم التحكم فيها عن طريق التغذية المرتدة يتم مراقبتها بواسطة مقياس حرارة المستقيم.
- ضع مرهم العيون على العينين للحفاظ على رطوبتها وأعد وضعه طوال الجراحة حسب الحاجة.
- قم بعمل شق 2.5 سم في الجلد مع تغطية فقرات T6−T10 بمشرط. اسحب الجلد والدهون السطحية باستخدام مقص تشريح حاد.
ملاحظة: يمكن التعرف على الأجزاء الفقرية T6−T10 إما عن طريق الجس اللطيف للأجزاء الشوكية الظهرية من قاعدة الجمجمة بدءا من النتوء الملحوظ للفقرة الصدرية 2 nd أو ذيلية عن طريق ملامسة الضلع العائم الخلفي ، مما يحفز الحركة في الفقرات الصدرية 13 .
- افصل العضلات المجاورة للفقرات التي يتم إدخالها على الجانب الظهري للفقرات T7−T9 باستخدام مقص تشريح غير حاد وضام ذاتي الاحتفاظ. قم بإزالة وتنظيف أي أنسجة متبقية باستخدام ملقط ناعم وأدوات تطبيق ذات رؤوس قطنية لفضح العمليات الشائكة والصفيحات الفقرية.
ملاحظة: يتم دعم هذه الخطوات والخطوات التالية بشكل كبير من خلال التصور المجهري (~ 5-15x).
- قم بقص الجوانب بعناية (المفاصل اللجنية) بشكل ثنائي على الفقرات T7 و T8 باستخدام أدوات تشذيب العظام الدقيقة. اقطع النسيج الضام الظهري بين الصفيحة الفقرية T8 و T9 بشكل سطحي باستخدام مشرط (عمق 1 مم) مع الحرص على عدم إصابة الحبل الأساسي.
- قم بإزالة العملية الشائكة للفقرة T8 باستخدام أدوات تشذيب العظام. مع ملقط مرقئ منحني مثبت بعناية على العملية الشائكة T7 ، قم بتدوير الطرف الذيلي للصفيحة T8 بشكل مؤخر قليلا (~ 20 درجة) ، وأدخل أدوات تشذيب العظام أسفل الصفيحة T8 ، وقم بعمل قطع خط الوسط يمتد على طول الصفيحة. استمر في استئصال الصفيحة الفقرية عن طريق تكرار الجروح الموجودة على الجانب الأيسر والأيمن من الصفيحة الفقرية الإنسية إلى العمليات العرضية لكشف الحبل الشوكي.
ملاحظة: احرص على إزالة جميع شظايا العظام الناتجة عن استئصال الصفيحة الفقرية.
- بالتنقيط ليدوكائين (2٪ ، 0.1 مل) في القناة الشوكية المكشوفة وإزالة الجافية التي تغطى الجزء الشوكي T8 باستخدام ملقط دقيق ومقص استئصال القزحية. كرر إعطاء الليدوكائين للحبل المكشوف وحدد خط الوسط للحبل السري من خلال تصور خط مركزي تم إنشاؤه بين العمليات الشائكة الممتدة بين فقرة T7−T9 المكشوفة.
ملاحظة: جنبا إلى جنب مع العمليات الشائكة على T7 و T9 ، يمكن أيضا استخدام العقد الجذرية الظهرية المكشوفة على T8 للمساعدة في تحديد خط الوسط. يمكن وضع إبرة 30 جم في خط الوسط للسلك للمساعدة في القطع النصفي اللاحق.
- قم بتقطيع الحبل الشوكي من خط الوسط باتجاه جانب واحد بسكين تشريح. احرص على عدم قطع الشريان الشوكي الأمامي على الجانب البطني (لا تضغط بقوة على الجسم الفقري). باستخدام مقص استئصال القزحية ، قم بقص أي أنسجة متبقية على الجانب المصابين من الحبل الشوكي بعناية للتأكد من أن الربع البطني الجانبي متقاطع بشكل مناسب.
- ضع إسفنجة مرقئ معقمة مبللة بالمحلول الملحي (~ 6 × 2 مم) في التجويف المكشوف فوق الحبل الشوكي وخياطة طبقات العضلات (4-0 بولي جللاكتين 910). بعد ذلك ، قم بخياطة الجلد حول موقع الشق.
- توفير مسكن كاف (بوبرينورفين 0.05 مجم / كجم تحت الجلد [SC]) ، ومضاد حيوي (إنروفلوكساسين ، 10 مجم / كجم S.C.) ، وتجديد السوائل المفقودة بمحلول رنجر مرضع 5 سم مكعب (داخل الصفاق [IP]) مباشرة بعد الجراحة.
- إزالة الجرذ من التخدير. ضع الجرذ في بيئة دافئة تحت وسادة تدفئة أو مصباح (~ 33 درجة مئوية) حتى يستيقظ تماما.
- قدم تسكين تكميلي يوميا خلال أول 3 أيام بعد الجراحة وراقب باستمرار علامات الألم أو فقدان الوزن أو التبول غير السليم أو العدوى أو مشاكل التئام الجروح أو البلع الذاتي.