Method Article

إحداث إصابة عصبية مستهدفة باستخدام ليزر عالي الطاقة في يرقة ذبابة الفاكهة

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Li, D., Li, F., et al. ذبابة الفاكهة في الجسم الحي نموذج إصابة لدراسة التجديد العصبي في الجهاز العصبي المحيطي والمركزي. J. Vis. Exp. (2018)

يوضح هذا الفيديو طريقة لإحداث إصابة عصبية مستهدفة في ذبابة الفاكهة باستخدام ليزر عالي الطاقة. بعد وضع اليرقة تحت المجهر ، يقوم ليزر منخفض الطاقة بمسح الخلايا العصبية الفلورية ، ثم تزداد قوة الليزر لإحداث ضرر موضعي. يتم تأكيد الإصابة من خلال زيادة التألق وحفرة في موقع الإصابة.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_title" >1. إصابة الفوتون والتصوير متحد البؤر

  1. إعداد المجهر
    ملاحظة: تم استخدام مجهر المسح الضوئي بالليزر متحد البؤر مع ليزر ثنائي الفوتون لهذه التجربة ، ولكن الأنظمة الأخرى ذات الإعداد المكافئ ستكون كافية أيضا. تم استخدام ليزر الفوتون ثنائي الفوتون (930 نانومتر) لإيصال الإصابة وتم استخدام ليزر الأرجون (488 نانومتر) للتصوير متحد البؤر ل GFP.
    1. في بداية كل جلسة ، قم بتشغيل الليزر ثنائي الفوتون و / أو الليزر (الليزر) متحد البؤر والمجهر. ثم افتح برنامج التصوير.
    2. بالنسبة لإصابة الفوتونين ، قم بإعداد المعلمات التالية لتصوير GFP باستخدام ليزر ثنائي الفوتون عند 930 نانومتر (1،950 ميجاوات).
      1. حدد و....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
الشكل 1: يعرض تجديد الخلايا العصبية في المحيط خصوصية الفئة. (أ و ب) رسم تخطيطي يوضح موضع اليرقات. (ج) الرسم التخطيطي للخلايا العصبية من الفئة الثالثة دا. (د) محاور من الفئة الثالثة da الخلايا العصبية ddaF ، المسماة ب 19-12-Gal4 ، UAS-CD4-tdGFP ، repo-Gal80 / + ، تفشل في إعادة النمو. (ه) رسم تخطيطي للفئة الرابعة دا الخلايا العصبية. (F) محاور من الفئة الرابعة da الخلايا العصبية v'ada ، المسمى ب ppk-.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن تضارب في المصالح.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
ثنائي إيثيل الأثير ، كاشف ACS ، اللامائي Acros OrganicsAC615080010
زيت هالوكربون 27جينيسي العلمي59-133
محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) ، مركز 20x ، درجة الحموضة 7.5 ، مورد # E703-1L VWR97062-948
مسحوق أجار، ألفا إيسار، 500 جمVWRAAA10752-36
عصير العنبويلش
الإيثانول 95٪ (كاشف الكحول 95٪)VWR64-17-5
حمض الخليكسيجما ألدريتش A6283
حمض البروبيونيكجي تي بيكرU33007
نظارات الغطاء: مستطيلاتفيشر العلمي12-544-د 50 مم × 22 مم
مجهر المسح الضوئي بالليزر Zeiss LSM 880زايس
برنامج Zenزايس
الحرباء الترا الثانيةمتماسك

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Drosophila LarvaNeuronal InjuryHigh Power LaserTwo Photon MicroscopyFluorescent NeuronsLaser ScanningInjury ConfirmationAnesthesia ProtocolSlide PreparationFluorescence Imaging

Related Articles