طريقة لإلحاق إصابات الدماغ الرضحية المغلقة في ذبابة الفاكهة

الملخص

المصدر: كاتزنبرغر ، آر جيه ، وآخرون ، طريقة لإلحاق إصابات دماغية مؤلمة مغلقة في ذبابة الفاكهة . J. Vis. Exp. (2015).

يوضح الفيديو استخدام جهاز الصدمات عالية التأثير (HIT) للحث على إصابات الدماغ الرضحية المغلقة (TBI) في ذبابة الفاكهة . يتسبب إصابات الدماغ الرضية في صدمة دماغية ميكانيكية تؤثر على وظيفة الخلايا العصبية ، مما يؤدي بمرور الوقت إلى التنكس العصبي والوفيات.

البروتوكول

1. بناء جهاز HIT

1. قم بتوصيل الزنبرك باللوحة باستخدام مشابك وأربعة براغي ( الشكل 1 أ ). قم بتوسيط المشابك بالنسبة لعرض اللوحة وقم بتثبيتها ضد بعضها البعض باستخدام المشبك الخارجي المتدفق مع حافة اللوحة. قبل ربط المشابك ، قم بثنيها باستخدام كماشة لتلائم بإحكام على الزنبرك.
   ملاحظة: انظر الجدول 1 للحصول على أوصاف للمواد المطلوبة لإنشاء جهاز HIT. يجب أن تكون النهاية المثبتة للزنبرك على بعد 1/8 بوصة (3.2 مم) من حافة اللوحة ، ويجب أن تمتد النهاية الحرة فوق اللوحة بمقدار 3/4 بوصة (19 مم). اضبط الزنبرك بحيث يكون موازيا لطول اللوحة.
2. لف الطرف الحر للزنبرك مرة واحدة بالشريط اللاصق لحلقات الفيلكرو. يجب أن تكون الحافة الخارجية للفيلكرو متدفقة مع نهاية الربيع. يعتبر الفيلكرو مهما لأنه يستخدم لتأمين القارورة في الزنبرك عن طريق إنشاء تركيبات ضغط محكمة. يسمح الفيلكرو أيضا بتوصيل القوارير وإزالتها بسهولة ، مما يسمح بمعالجة العديد من القوارير في فترة زمنية قصيرة.
3. ضع غطاء دلو الثلج رأسا على عقب ، في المنتصف ، بإحكام على اللوح الخشبي. قم بتوجيه المنطقة المرتفعة لغطاء دلو الثلج بحيث تكون الحافة الطويلة موازية لعرض اللوحة. لاحظ أن المنطقة المرتفعة من دلو الثلج أعلى بمقدار 1/2 بوصة (13 مم) من اللوح الخشبي ، بحيث عندما يتم توصيل قارورة بالزنبرك ، لن يكون الزنبرك مسطحا على السبورة.
4. حرك الجهاز بالكامل على جسم ثابت مثل الحائط ، بحيث يكون غطاء دلو الثلج مثبتا بين اللوحة والجسم ولا يتحرك.
5. قم بلصق المنقلة الورقية في الجزء السفلي من صينية قارورة ذبابة من الورق المقوى وقم بتثبيتها على الحافة مقابل طول اللوحة بحيث تتم محاذاة علامة 90 درجة مع الزنبرك عند سحبها إلى وضع رأسي تماما.

2. تشغيل جهاز HIT

1. ضع ما بين 1 و 60 ثاني أكسيد الكربون ₂ ذباب مخدر في قارورة فارغة وسدادة القارورة باستخدام كرة قطنية ضيقة.
2. احصر الذباب في أسفل 1 بوصة (2.5 سم) من القارورة عن طريق دفع كرة القطن في القارورة حتى تصل إلى 1 بوصة (2.5 سم) من الأسفل. من المفيد رسم خط على القارورة عند علامة 1 بوصة (2.5 سم). لاحظ أن حصر الذباب في مناطق أكبر أو أصغر من القارورة يمكن أن يؤثر على شدة الأنماط الظاهرية.
3. انتظر 5 دقائق حتى يستعيد الذباب القدرة على الحركة من ثاني أكسيد الكربون₂. لاحظ أنه من غير المعروف ما إذا كانت 5 دقائق كافية لإزالة تأثيرات CO₂ تماما.
4. أدخل نهاية الزنبرك في القارورة حتى تتدفق الحافة الداخلية للفيلكرو مع الجزء العلوي من القارورة ( الشكل 1 ب ). عندما يكون الزنبرك مسطحا ، يجب أن تتداخل 1 بوصة (2.5 سم) من القارورة مع المنطقة المرتفعة لغطاء دلو الثلج. يمكن إعادة استخدام القوارير عدة مرات.
5. أثناء الجلوس ، أمسك القارورة في منطقة الفيلكرو باستخدام الإبهام والسبابة من يدك اليسرى. امسك اللوح بإحكام على سطح الطاولة باستخدام يدك اليمنى. بدلا من ذلك ، استخدم المشابك C لتثبيت اللوحة بإحكام على سطح الطاولة.
6. اسحب الزنبرك بشكل مستقيم تماما إلى الزاوية المطلوبة. حرر الربيع. دع الربيع يتوقف تماما.
7. أخرج القارورة من الزنبرك واترك الذباب يتعافى لمدة ≥5 دقائق. أخضع الذباب لضربة أخرى أو انقل الذباب إلى قارورة بها طعام الذباب.
   ملاحظة: يمكن استخدام مجموعة متنوعة من المقايسات لتقييم تأثيرات النمط الظاهري للضربات من جهاز HIT. على سبيل المثال ، يمكن تحديد التأثيرات على طول العمر من خلال تحليل النسبة المئوية للذباب الذي يعيش في بعض الأحيان بعد الإصابة ، ويمكن تحديد التأثيرات على مورفولوجيا الدماغ عن طريق التحليل النسيجي للرأس ، ويمكن تحديد التأثيرات على التعبير الجيني عن طريق التحليل الكمي لمستويات الرنا المرسال.
8. تحديد آثار الإجراء التي لا ترجع إلى الضربات من خلال معالجة ذباب التحكم الذي لا يتعرض للإضرابات بشكل متطابق. ارتد واقيا من السمع لأن تأثير القارورة على غطاء دلو الثلج ينتج ضوضاء عالية.

النتائج

الشكل 1: رسم تخطيطي لجهاز HIT. (أ) رسم توضيحي للمنظر العلوي لجهاز HIT في وضع الراحة. (B) رسم توضيحي للمنظر الجانبي لجهاز HIT. يظهر الزنبرك في وضع الراحة (أحمر غامق) وينحرف إلى 90 درجة (أحمر فاتح).

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
زنبرك ضغط مطلي بالزنك	مجموعة هيلمان	540189	9 7/8 بوصة (طول) ، 15/16 بوصة (القطر الخارجي) ، 0.12 بوصة (حجم السلك)
لوح خشبي			9 بوصة (طول) ، 6.5 بوصة (عرض) ، 0.75 بوصة (ارتفاع)
المشابك	شركة سيجما للتصنيع الكهربائي	49822	3.10 بوصة (الطول) ، 0.68 بوصة (العرض) ، 1.11 بوصة (الارتفاع) ، EMT Two Hole Straps ، انقر فوق النوع لقناة EMT الفولاذية مقاس 1 بوصة
حلقة نصف الفيلكرو ذاتية اللصق			3 بوصة (الطول) ، (3/4 في العرض)
غطاء دلو ثلج من البولي يوريثين	فيشر العلمي	02-591-45	9 1/8 بوصة (الطول) ، 9 1/8 بوصة (العرض) ، 1 1/4 بوصة (الارتفاع)
قوارير ذبابة بلاستيكية	العلوم التطبيقية	AS-510	3 11/16 بوصة (ارتفاع) ، 1 1/16 بوصة (القطر الداخلي) ، 1 1/8 بوصة (القطر الخارجي)
كرات قطنية كبيرة	فيشر العلمي	22-456-883
منقلة الورق			10 بوصة (قطر)