عدوى فيروس زيكا للخلايا الجذعية العصبية الجنينية

الملخص

المصدر: McGrath, E. L., et al., عدوى فيروس زيكا للخلايا الجذعية العصبية لدماغ الجنين البشري المزروع للتحليل الكيميائي المناعي. J. Vis. Exp. (2018)

يوضح هذا الفيديو إجراء لإصابة الخلايا الجذعية العصبية الجنينية البشرية بفيروس زيكا. يمكن استخدام الخلايا المصابة لمزيد من الدراسات.

البروتوكول

1. عدوى فيروس زيكا

ملاحظة: ZIKV حساس للغاية لدرجة الحرارة ، لذلك من الضروري تخزين مخزون ZIKV عند -80 درجة مئوية وتجنب دورات التجميد / الذوبان. استمر في العمل على الجليد.

1. خلايا المرور. هناك حاجة إلى 3-4 ملايين خلية في المجموع لزرع صفيحة مكونة من 24 بئرا ، لذلك عند المرور ، ضع عدد الخلايا اللازمة للعدوى والبذر في قارورة عند المرور.
2. إذا قمت بزرع الخلايا في صفيحة من 24 بئرا للتلوين ، فقم بإعداد اللوحة [قم بتغطية الآبار التي تحتوي على زلات الغطاء بنسبة 0.01٪ بولي دي-ليسين (PDL) في ماء معقم واحتضانها لمدة ساعة واحدة عند 37 درجة مئوية. بالنسبة للوحة 24 بئرا ، استخدم 250 ميكرولتر من PDL لكل....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
DMEM	جيبكو	11965-092
F12	جيبكو	11765-054
الجلوكوز (10٪)	سيجما	G8644
هيبس (1M)	كورنينج / cellgro	25-060-c1
بكتيريا القلم (100x)	جيبكو	15140-122
حاضنة ثاني أكسيد الكربون	ثيرمو فورما	الموديل # 3110
أجهزة الطرد المركزي	ثيرمو فيشر علمي	75004221
خزانة السلامة البيولوجية	الشكل العلمي الثاني أ / ب 3	نموذج # 1284
بولي دي ليسين هيدروبروميد (PDL)	سيجما	P6407-5MG
Laminin	Invitrogen	23017-015