يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

نموذج في المختبر لدراسة عبور مسببات الأمراض للحاجز الدموي الدماغي وعدوى خلايا الدماغ

1.1K مشاهدة

⸱

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

المصدر: da Costa, A., et al. نموذج واجهة الدم والدماغ البشري لدراسة عبور الحاجز بواسطة مسببات الأمراض أو الأدوية وتفاعلاتها مع الدماغ. J. Vis. Exp. (2019).

يوضح هذا الفيديو نموذجا في المختبر لدراسة مسببات الأمراض التي تعبر الحاجز الدموي الدماغي (BBB). تشكل الخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة ، التي تعبر عن تقاطعات ضيقة ، طبقة بطانية في الغرفة العلوية ، بينما تمثل الخلايا العصبية والخلايا النجمية والخلايا الدبقية الصغيرة حمة الدماغ في الغرفة السفلية ، مفصولة بغشاء مسامي. تحاكي العدوى الفيروسية في نموذج BBB انتقال العامل الممرض من الدم إلى الدماغ. عند إدخال فيروس عصبي ، فإنه يعبر BBB عن طريق التحول الخلوي ، ويصيب الخلايا العصبية ، ويتكاثر ، ويطلق ذرية فيروسية ، مما يدل على الغزو العصبي الناجح.

البروتوكول

1. بناء ومراقبة جودة BBB-Minibrain (الحاجز الدموي الدماغي - الدماغ المصغر) (الشكل 1)

  1. إعداد جهاز إدراج غشاء بوليستر BBB-Minibrain ( الشكل 1 ب )
    1. قم بزراعة خط الخلايا البطانية للدماغ البشري (خلايا hCMEC / D3) على 12 بئر إدراج مرشحات غشاء البوليستر لمدة 6 أيام على وسط الخلية البطانية قبل استخدامها للتجربة.
    2. قم بتغطية صفيحة 12 بئر ببولي د-ليسين (1 مل / بئر ، 10 ميكروغرام / مل ، 4 ساعات في RT) ثم اللامينين (1 مل / بئر ، 1 ميكروغرام / مل ، بين عشية وضحاها في RT).
    3. قم بإزالة اللامينين وإضافة 1 مل من وسط الخلايا البطانية المكمل بمصل بقري الجنين 5٪ (FBS) (5٪ وسط الخلايا البطانية).
    4. احتض....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

figure-results-1
الشكل 1: نموذج BBB-Minibrain. أ. الجدول الزمني لثقافات hCMEC / D3 وصورة لجهاز BBB-Minibrain: يتم تثبيت مرشح إدراج غشاء البوليستر مع الحاجز البطاني hCMEC / D3 بملقط قبل إدخاله في بئر واحد من لوحة زراعة خلايا 12 بئر. ب . رسم كاريكاتوري يصف الجهاز مع الحجرة اللمعية (الدم) التي تحتوي على حاجز الخلايا البطانية وحجرة الدماغ (الدماغ) التي تحتوي على خلايا الدماغ المصغر (الخلايا العصبية البشر.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لم يتم الإعلان عن تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
12 لوحة بئركورنينج336
طبق بتري 85 ملمسارستيدت 83-3902-500
CHME / Cl5 Unité de Neuroimmunologie Viraleبناء على طلب إلى الدكتور لافون
CMCكالبيوكيم217274
96 لوحة بئر داكنة كورنينج3915
DMEM F12الرماد الحراري العلمي3130-038
DMSOميرك سيجما ألدريتش D2650
الإندوجرو الرابعميليبور SCME004
الإيثانولكارلو إربا529121
FBSHycloneSV30015-04 وسط الخلية البطانية
HBSS مع Ca2+-mg2+الرماشر العلمي14025-100
hCMEC/D3CedarlaneCLU512
Hepes 1Mالرصيد الحراري العلمي15630-070
لامينينميرك سيجما ألدريتش L6274
L-glutaminالرماد الحراري العلمي25030-024
لوسيفر الأصفرميرك سيجما ألدريتش L0259
MEM 10Xالرماشر العلمي 21430
MEM 1Xالرماد الحراري العلمي42360
Ntera/Cl2D.1ATCCCRL-1973
بارافورمالدهايد علوم المجهر الإلكتروني15714
PBS بدون Ca2+-Mg2+الرماشيد العلمي14190
PBS-Ca2+-Mg2+الرماد الحراري العلمي14040-091
القلم/الاسترب يوروبيوCXXPES00-07
بولي د-ليسينميرك سيجما ألدريتش P1149
إطالة الذهبالرضع الحراري العلميP36930
طقم تنقية الحمض النووي الريبيQIAGEN74104
بيكربونات الصوديوم 5.6٪ يوروبيوCXXBIC00-07
بيروفات الصوديومالرماشر العلمي11360
خلية T75 + قارورة سارستيدت83-1813-302قارورة البوليسترين لزراعة الأنسجة مع معالجة سطحية محددة (خلية +) للخلايا الملتصقة الحساسة
ترانسويلكورنينج3460إدراج ثقافة غشاء البوليستر المسامي
Trypsin-EDTAميرك سيجما ألدريتش T3924
ماء فائق النقاءالرماشيد العلمي10977-035
Verseneالرصيد الحراري العلمي15040-033EDTA
YFV-FNVIP Dakarقارورة اللقاح

استكشف المزيد من المقالات

الفيروسات الموجهة للجهاز العصبيالخلايا البطانيةالخلايا العصبيةالنقل الخلوي للفيروساتالغزو العصبي الفيروسيالنفاذية البطانيةمقايسة عيار الفيروسنموذج الدماغ المصغر للحاجز الدموي الدماغي