تقييم تقلص العضلات بعلاج الحاجز العصبي العضلي

الملخص

المصدر: Lin، C. U.، et al.، في المختبر الوصلة العصبية العضلية المستحثة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة من الإنسان. J. Vis. Exp. (2020)

يوضح هذا الفيديو تقييم العضلات باستخدام الخلايا العصبية الحركية المزروعة وخلايا شوان والأنابيب العضلية ، متبوعا بالعلاج باستخدام مانع عصبي عضلي لمنع الانقباض. تظهر رسومات الحركة الزمنية المرمزة بالألوان رسما متنوعا للحركة الزمنية مرمزا بالألوان. يشير اللون الأحمر إلى أسرع حركة ، ويشير اللون الأزرق إلى الأبطأ.

البروتوكول

< p class = "jove_title" >1. تقلص العضلات وعلاج curare

1. لتحفيز تقلص الأنبوب العضلي ، أضف 25 ملي مولار من كلوريد الكالسيوم (CaCl₂) إلى وسط الاستزراع. يمكن ملاحظة حركة الأنابيب العضلية في 1-1 دقيقة.
2. ضع اللوحة المكونة من 6 آبار على مسرح المجهر المقلوب. سجل فيلم عن تقلص الأنبوب العضلي عن طريق الفحص المجهري للخلايا الحية.
3. لإيقاف تقلص الأنبوب العضلي ، أضف curare إلى وسط الثقافة (300 نانوغرام / مل). ثم سجل الفيلم كخطوة 1.2.
4. افتح ملف الفيلم باستخدام برنامج تحليل متجهات الحركة ، ثم انقر فوق تحليل الحركة زر لتحليل الفيلم.
   ملاحظه: يظهر تقلص الأنابيب العضلية على شكل رسم بياني للحركة الزمنية. الأفلام مشفرة بالألوان لإظهار سرعة حركة الأنابيب العضلية. تشير الإشارات اللامعة المرمزة بالألوان إلى حركات الأنابيب العضلية حيث يظهر اللون الأحمر أسرع سرعة حركة ويظهر اللون الأزرق أبطأ سرعة حركة.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
الوسط وعوامل النمو والكواشف	العنصر	العلامة التجارية	قط. الرقم
	B27 ، Gibco	جيبكو	12587-001
	BDNF	أنظمة البحث والتطوير	248-دينار بحريني
	ECM, Matrigel (عامل النمو المخفض)	كورنينج	356230
	GDNF	أنظمة البحث والتطوير	212-GD
	طلاء الأيونات	جول	JEC3000FC
	الفحص المجهري للخلايا الحية	نيكون	مجهر Eclipse Ti
	برنامج تحليل ناقلات الحركة	سوني	SI8000
	N2, Gibco	جيبكو	17502-048
	الوسط العصبي القاعدي	جيبكو	21103-049
	NT3	أنظمة البحث والتطوير	267-N3