مقالة منهجية

إحداث السكتة الدماغية الخثارية من خلال نقص الأكسجة ونقص التروية في نموذج الفأر

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: صن ، واي واي ، وآخرون ، نموذج سكتة دماغية تخثرية يعتمد على نقص الأكسجة الدماغي العابر ونقص التروية. J. Vis. Exp. (2015).'

يوضح هذا الفيديو إجراء تكرار السكتة الدماغية الخثارية في نموذج الفأر عن طريق سد الشريان السباتي المشترك الأيمن وتعريض الفأر لبيئة منخفضة الأكسجين. تقلل هذه العملية من تدفق الدم والأكسجين إلى الدماغ ، مما يتسبب في تكوين جلطة دموية وتلف في الدماغ.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. الإعداد

  1. قم بإعداد السرير الجراحي على وسادة تدفئة متصلة بمضخة حرارية عند 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة على الأقل قبل الجراحة. ضع لفافة العنق باستخدام برميل حقنة سعة 3 مل على سرير الجراحة. تحضير غاز التخدير بنسبة 2٪ أيزوفلوران في الهواء الطبي.
  2. قم بإعداد ملقط معقم ، ومقص ، وحاملات إبر دقيقة ، ومرقئ ، ومسحات قطنية ، وخيوط. أيضا ، قم بإعداد غراء الأنسجة ومرهم العين.
  3. قم بإعداد نظام نقص الأكسجة وأجهزة التحكم في درجة الحرارة باستخدام مصباح تسخين ومسبار المستقيم. تحضير غاز نقص الأكسجة مع 2٪ إيزوفلوران في 7.5٪ O 2 متوازن بنسبة 92.5٪ N 2 .
  4. قبل ساعة واحدة من الجراحة ، يتم تحليل الفئران عن طريق الحقن تحت الجلد من ميلوكسيكام بطيء الإطلاق (4.0 مجم / كجم).

2. نقص الأكسجة الدماغي العابر (الشكل 1 ب)

  1. قم بتخدير ذكور C57BL / 6 من 10-13 أسبوعا بوزن 22 إلى 30 جم في غرفة تحريض التخدير مع 3٪ isoflurane حتى لا يستجيب لضغط القدم ، ثم قم بإزالة الشعر من الرقبة اليمنى باستخدام ماكينة حلاقة إلكترونية.
  2. ضع الفئران على السرير الجراحي المتصل ب 2٪ من الأيزوفلوران في الهواء الطبي بمعدل تدفق 2 لتر / دقيقة. قم بتأمين الأطراف الأمامية الممتدة على طول لف الرقبة على الجانبين باستخدام شريط طبي.
  3. نظف موقع الجراحة بحثا عن شق بالبيتادين متبوعا بالكحول ثم مسحات القطن.
  4. تحت مجهر تشريح ، قم بعمل شق عنق الرحم الأيمن بطول 0.5 سم باستخدام ملقط مستقيم ومقص دقيق على بعد حوالي 0.2 سم من جلد خط الوسط.
  5. استخدم زوجا من الملقط المسنن بدقة لتفكيك اللفافة والأنسجة لكشف الشريان السباتي المشترك الأيمن (RCCA). افصل RCCA بعناية عن العصب المبهم باستخدام زوج من الملقط الناعم الناعم.
  6. عقدة حية اثنتين من خيوط الحرير المقطوعة مسبقا 5-0 (قابلة للإفراج) على RCCA ، ثم قم بخياطة الجلد باستخدام خيوط 4-0 من النايلون (الشكل 1C) .
  7. ضعي مرهم العين على كلتا العينين لمنع الجفاف.
  8. انقل الفئران بسرعة إلى نظام نقص الأكسجة وضع أنوفها وأفواهها في قناع للوجه مع 2٪ إيزوفلوران في 7.5٪ O 2 بمعدل تدفق 0.5-1 لتر / دقيقة لمدة 30 دقيقة.
    1. أثناء نقص الأكسجة ، استخدم أجهزة التحكم في درجة الحرارة مع مصابيح التدفئة للتحكم في درجة حرارة المستقيم عند 37.5 ± 0.5 درجة مئوية. راقب معدل التنفس عند 80-120 نفسا / دقيقة. يعد الحفاظ على درجة حرارة الجسم أعلى من 37 درجة مئوية أثناء نقص الأكسجة أمرا مهما لخلق احتشاء دماغ ثابت. يحدث انخفاض معدل التنفس عادة بعد 20 دقيقة من نقص الأكسجة. قم بإزالة قناع الوجه والسماح بإمداد الهواء الطبيعي إذا انخفض معدل التنفس إلى أقل من 40. يستغرق هذا 1-2 دقيقة ولا يتم احتسابه ضمن مدة نقص الأكسجة لمدة 30 دقيقة

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
الشكل 1: إجراء إهانة نقص الأكسجة الدماغي العابر (tHI) في الفئران البالغة. (أ) يشمل ثالوث فيرشو الذي يدفع تجلط الدم ركود تدفق الدم وإصابة البطانة وفرط تخثر الدم. (ب) رسم تخطيطي لإجراء السكتة الدماغية tHI. تم ربط عقدتين قابلتين للإفراج على الشريان السباتي المشترك الأيمن (CCA) ، متبوعا بتوصيل 7.5٪ من الأكسجين عبر مخروط الأنف لمدة 30 دقيقة ، بينما تم الحفاظ على درجة حرارة الشرج للفأر عند 37-38 درجة مئوي...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
ذكور الفئران البالغةنهر تشارلز C57BL / 6 10 ~ 13 أسبوعا (22 ~ 30 جم)
نظام تخدير المختبر المتنقلVetEquip901807التخدير
خزان هواء طبي (مضغوط) AirgasUN1002التخدير
إيزوفلورانبيرامال للرعاية الصحيةNDC 66794-013-25التخدير
نظام التخدير الحيواني متعدد المحطاتالجرافيتV703501نظام نقص الأكسجة
7.5٪ O2 متوازن بنسبة 92.5٪ N2 tankAirgasUN1956نظام نقص الأكسجة
جهاز التحكم في درجة الحرارة مع مصباح التدفئة كول بارمرEW-89000-10أجهزة التحكم في درجة الحرارة
مسبار المستقيمكول بارمرNCI-00141PGأجهزة التحكم في درجة الحرارة
تشريح المجهرأوليمبوسSZ40الإعداد الجراحي
مضخة حرارية مع وسادة تسخين جايمارTP700الإعداد الجراحي
ملقط منحني ناعم (مسنن) FST 11370-31أداة جراحية
ملقط منحني ناعم (ناعم) FST11373-12أداة جراحية
مقص صغيرFST 15000-03أداة جراحية
حاملات الإبر الدقيقةFST12060-01أداة جراحية
هالستيد-بعوض المرقئFST 13008-12أداة جراحية
خياطة حريرية 5-0جهاز هارفارد624143المستلزمات الجراحية
4-0 خياطة أحادية الشعيرات المصنوعة من النايلونانظر766Bالمستلزمات الجراحية
غراء المناديلمختبرات أبوت NC9855218المستلزمات الجراحية
مرهم Puralube VetفيشرNC0138063الوقاية من جفاف العين

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة